郭彩霞
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南华大学医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省研究生科研创新项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胃癌SGC7901细胞特异性结合肽的筛选及鉴定
- 目的:利用体内噬菌体展示技术,筛选与人胃癌细胞株SGC7901特异性亲和的短肽,以利于指导临床胃癌的早期诊断和靶向性治疗,提高胃癌治疗的针对性。 方法:建立裸鼠胃癌模型,将噬菌体通过尾静脉注射入裸鼠体内,经过四轮筛选,...
- 郭彩霞
- 关键词：胃癌SGC7901细胞短肽靶向性治疗
- PIG11高表达诱导HepG2细胞凋亡及其机制的初步探讨
- 2011年
- 目的利用已建立的稳定高表达PIG11蛋白的HepG2细胞株,探讨PIG11蛋白表达对HepG2细胞凋亡的影响,以及线粒体膜电位改变和Cyt C释放在凋亡过程中的作用。阐明PIG11诱导细胞凋亡的分子机制。方法 PI染色,流式检测细胞的凋亡情况。用Rh123标记,流式测定线粒体膜电位。Western Blot检测胞浆和线粒体中Cyt C的含量变化。结果流式细胞仪检测Rh123荧光强度,结果显示:pLXSN-PIG11-HepG2细胞荧光强度(5.4±0.15)低于HepG2细胞(14.7±0.56)和pLXSN-HepG2细胞(13.2±0.53)(P<0.01)。表明PIG11高表达诱导细胞凋亡过程中存在线粒体膜电位去极化。用CsA(10μmol/L)抑制各组细胞的线粒体通透性转移孔后,流式凋亡检测结果显示pLXSN-PIG11-HepG2细胞凋亡率明显降低。Western Blot检测发现存在线粒体Cyt C向胞浆释放。结论 PIG11高表达可诱导HepG2细胞凋亡,PIG11诱导细胞凋亡机制可能由线粒体膜电位改变及Cyt C向胞浆释放而介导。
- 郭彩霞王晓娟王燕梁晓秋
- 关键词：PIG11凋亡线粒体HEPG2细胞
- Caspase-8和Bcl-2在PIG11诱导HepG2细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2011年
- 目的:利用本实验室已建立PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞株和PIG11蛋白稳定高表达HepG2细胞株,研究Caspase-8和Bcl-2在PIG11诱导HepG2细胞凋亡中的作用,进一步探讨PIG11基因表达对HepG2细胞凋亡的机制。方法:细胞培养,分组:HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2(pLXSN-PIG11转染建立PIG11蛋白高表达HepG2细胞)、pLXSN-HepG2(pLXSN空载体转染HepG2细胞)、miR-PIG11-HepG2(miRNA干扰PIG11蛋白低表达HepG2细胞)、miR-HepG2(干扰空载体HepG2细胞)。Hoechst33342染色荧光和PI染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。Western blot检测Caspase-8蛋白、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:Hoechst 33342染色荧光显微镜下pLXSN-PIG11-HepG2细胞组可见核染色质浓缩,核碎片,荧光增强,以及凋亡小体。PI染色流式细胞仪检测结果显示:HepG2细胞、miR-PIG11-HepG2细胞、miR-HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2细胞、pLXSN-HepG2细胞的凋亡率分别为5.72%±0.81%、1.34%±0.71%、5.10%±0.40%、34.83%±2.29%、5.34%±0.60%。PIG11高表达的pLXSN-PIG11-HepG2细胞组凋亡率比其它各组增高(P<0.01),PIG11低表达的miR-PIG11-HepG2细胞组凋亡率降低(P<0.01)。Western blot检测结果显示PIG11高表达的pLXSN-PIG11-HepG2细胞Caspase-8蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.01),PIG11低表达的miR-PIG11-HepG2细胞Caspase-8蛋白的表达下调,Bcl-2蛋白表达上调(P<0.01)。结论:PIG11蛋白高表达能诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与Caspase-8蛋白及Bcl-2蛋白表达相关。
- 陈永春庄英帜梁晓秋王燕郭彩霞
- 关键词：PIG11CASPASE-8BCL-2凋亡HEPG2细胞
- 胃癌SGC7901细胞特异性结合肽的筛选及鉴定
- 2012年
- 目的筛选与人胃癌细胞株SGC7901特异性亲和的短肽,提高胃癌治疗的针对性。方法建立裸鼠胃癌模型,将噬菌体随机环7肽文库通过尾静脉注射入裸鼠体内,每轮筛选后测噬菌体效价。采用免疫组化及ELISA等方法,对目标噬菌体进行检测,提取噬菌体DNA,进行序列测定。结果经过4轮筛选,噬菌体在胃癌肿瘤组织中得以明显富集。免疫组化结果显示肿瘤组织为强阳性。ELISA结果显示:随机挑选的13个克隆中12个对SGC7901细胞的亲和力高。序列测定结果:PPRWMPS出现的次数最多。结论提示短肽PPRWMPS可能对荷瘤裸鼠模型的胃癌组织具有很强地结合力,有望成为胃癌治疗的靶点。
- 郭彩霞梁晓秋何晓娟
- 关键词：胃癌短肽
- PIG11基因沉默与HepG2细胞凋亡关系的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:构建人PIG11的miRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR,建立PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞株,联合PIG11蛋白稳定高表达HepG2细胞株,探讨PIG11基因表达对HepG2细胞凋亡的影响。方法:构建miRNA干扰载体,通过脂质体转染HepG2细胞,建立PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞,与前期已建立的PIG11蛋白稳定高表达的HepG2细胞模型作对比,利用PI染色流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测Caspase-3蛋白、Caspase-9蛋白的表达情况。结果:成功构建人PIG11的miRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR,转染后获得PIG11基因沉默的HepG2细胞株。PI染色流式细胞仪检测结果显示,HepG2细胞、miR-PIG11-HepG2细胞、miR-HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2细胞和pLXSN-HepG2细胞的凋亡率分别为(5.72±0.81)%、(1.34±0.71)%、(5.10±0.40)%、(34.83±2.29)%和(5.34±0.60)%。PIG11高表达的pLXSN-PIG-11-HepG2细胞组凋亡率比其他组增高(P<0.01),PIG11低表达的miR-PIG11-HepG2细胞组凋亡率降低(P<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示,PIG11高表达的HepG2细胞Caspase-3及Caspase-9蛋白表达均上调(P<0.01),PIG11低表达的HepG2细胞Caspase-3及Caspase-9蛋白的表达下调(P<0.01)。结论:构建人PIG11的干扰载体成功获得PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞株,PI染色流式细胞仪检测及Caspase-3的检测证实PIG11对HepG2细胞凋亡起负调控作用,Caspase-9检测显示PIG11诱导HepG2细胞凋亡可能通过线粒体途径。
- 王燕胡蓉梁晓秋王晓娟郭彩霞
- 关键词：PIG11转染细胞凋亡流式细胞术
- 宫颈癌HeLa细胞特异性结合肽的筛选及鉴定被引量：1
- 2012年
- 背景与目的:宫颈癌的分子靶向治疗具有很好的疗效,同时可以显著减少抗癌药物对人体自身的损伤,因此备受关注。本研究利用噬菌体体内展示技术筛选及鉴定宫颈癌特异性结合肽,将有可能成为化疗药物的靶向载体,为宫颈癌靶向药物治疗奠定基础。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞接种裸鼠,建立肿瘤动物模型。将随机肽库尾静脉注入裸鼠体内,循环15 min,心脏灌注后回收肿瘤组织噬菌体扩增、纯化并以此作为起始物进行第2轮的筛选,如此进行3轮体内筛选后挑取噬菌体克隆,进行免疫组化及ELISA实验,初步鉴定噬菌体克隆对宫颈癌细胞的亲和力及特异性,并将具有强亲和力的克隆进行测序。结果:ELISA结果显示,随机挑选10个噬菌体单克隆中8个克隆对HeLa细胞具有很强的亲和力,将这8个克隆进行测序,获得相同短肽序列LLRSTGF。结论:利用噬菌体展示技术筛选出与宫颈癌细胞HeLa特异性结合的短肽,进一步与化疗药物结合,为宫颈癌靶向治疗提供新的方法。
- 何晓娟郭彩霞杨陈梁晓秋
- 关键词：宫颈癌HELA细胞噬菌体随机肽库特异性结合肽
