陈世知
- 作品数：15 被引量：32H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 米非司酮对小鼠着床期子宫内膜活化的β-连环蛋白(active β-catenin)表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨活化的β-连环蛋白(active β-catenin)在胚胎着床过程中的作用。方法:将孕第2日(d2)昆明小鼠随机分成3组,每组30只,A组:孕d2单次背部皮下注射0.1ml米非司酮(1.2mg/ml);B组(溶剂对照):以等量1,3-丙二醇代替米非司酮;C组:不作任何处理。用免疫组织化学、间接免疫荧光、Western blotting方法定性、定量、定位检测3组小鼠在妊娠d3￣7活化的β-连环蛋白的动态表达。结果:B、C组小鼠子宫内膜中活化的β-连环蛋白于孕d3在腺上皮和腔上皮、基质细胞质和细胞膜表达;妊娠d4在腔上皮细胞质和细胞膜强表达,并达高峰;妊娠d5￣7在腺上皮、血管内皮、腔上皮下基质细胞膜和细胞质表达,且B、C组间在妊娠d3￣7各时间点的表达无显著性差异(P>0.05);A组小鼠妊娠d3￣7活化的β-连环蛋白的表达较B、C组显著降低(P<0.01),在妊娠d4表达量未见高峰,且表达部位局限于基质细胞,腔上皮无表达。结论:米非司酮可能通过抑制孕激素与其受体结合而下调活化的β-连环蛋白表达,进而抑制子宫内膜黏附性,影响子宫内膜容受性的建立而阻碍胚胎顺利着床。
- 陈世知何俊琳刘学庆丁裕斌黄静陈雪梅王应雄
- 关键词：米非司酮子宫内膜
- 普萘洛尔对映异构体诱导HUVEC细胞的蛋白质表达谱差异被引量：7
- 2008年
- 手性药物只能通过严格的手性识别才能选择性地与特定生物大分子相互作用,在药动学、药效学等方面上表现出手性特征.以非选择性β肾上腺素能受体阻滞剂普萘洛尔(PRO)的对映异构体R(+)/S(-)-PRO为模型药物,分别作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC),提取全细胞蛋白质,经双向电泳、MALDI-TOF-MS、SWISSPROT数据库分析鉴定差异表达蛋白质;共筛选出22个差异表达蛋白质点,鉴定了HSP86、HSP84、GRP75、KLC18、KBTB2、TGM2、GBLP、GCNT2、RAB36、KLH34等10种蛋白质.研究表明,PRO对映异构体可引起广泛的基因表达改变,涉及信号分子、代谢酶、骨架蛋白、伴侣蛋白等,且具有显著的手性特征,这可能与PRO显著的手性生物学特征有紧密联系,但仍需开展进一步深入研究,以明确产生PRO手性生物学特征的多种途径和机制.蛋白质组学技术为深入了解药物的手性生物学特征及其作用机制提供了新的思路和策略,对手性药物开发和临床合理用药有着重要的意义.
- 毛小琴邱峰邱宗荫陈世知贾雄飞
- 关键词：普萘洛尔对映异构体蛋白质组学人脐静脉内皮细胞
- 非小细胞肺癌中TRIM25和PKM2蛋白表达被引量：9
- 2015年
- 目的检测临床非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)病人组织中TRIM25、PKM2蛋白的表达情况,探讨它们的关联性及意义。方法应用组织免疫荧光法,检测TRIM25、PKM2蛋白在60例NSCLC组织和20例癌旁边正常肺组织(>5 cm)表达情况,同时运用Western blotting方法检测TRIM25、PKM2在10例新鲜NSCLC组织中表达情况,并结合标本的临床病理特征进行分析。结果 TRIM25在60例非小细胞肺癌组织中的阳性表达率45%,而20例癌旁正常肺组织中仅为10%(P=0.005)。TRIM25在腺癌中阳性表达率为28.6%,而在鳞癌中为59.4%(P=0.017)。TRIM25被发现与TNM分期、淋巴结转移之间呈正相关性(P<0.05)。PKM2在60例非小细胞肺癌组织中表达率为73.3%,而在20例癌旁正常肺组织中为30%(P=0.001)。PKM2在腺癌的表达为57.1%,而在鳞癌中为87.5%(P=0.008)。通过关联性分析TRIM25和PKM2存在相关性(P=0.026)。Western blot结果表明当TRIM25表达升高时PKM2表达增长放缓。结论 TRIM25、PKM2蛋白可能同时参与到NSCLC发生发展过程中,存在负相关性。
- 敬怀志邱峰陈世知粟林屈灿
- 关键词：癌细胞增殖免疫荧光组织化学WESTERNBLOT
- Active β-catenin在小鼠子宫胚胎着床前后的表达变化及其生物学意义被引量：1
- 2009年
- 采用免疫组化、间接免疫荧光、Western印迹方法定量、定性、定位检测动情期未孕小鼠和妊娠第3～7天子宫内膜组织中active β-catenin的表达规律。免疫组化结果显示,与对照组相比,妊娠子宫内膜active β-catenin的表达量明显升高(P<0.05),且于妊娠第3天在腺上皮和腔上皮、基质细胞膜表达;妊娠第4天在腺上皮、基质细胞表达增加,在腔上皮表达强烈;妊娠第5天后表达在血管内皮、基质细胞膜和核,腔上皮表达减弱或消失,并大量表达在胚胎和初级蜕膜带。间接免疫荧光分析显示active β-catenin与E-钙粘着蛋白在妊娠第3、4天的子宫内膜腺上皮和腔上皮、基质细胞膜上有共定位表达,active β-catenin与VEGF于妊娠第5天后共表达在基质细胞和血管内皮。Western印迹结果显示active β-catenin在小鼠胚胎着床前后存在持续表达,表达高峰在妊娠第4天,妊娠第5天后表达量有所下降但仍高于着床前水平。实验结果提示active β-catenin在小鼠胚胎着床前后的时空表达具有相对固定的模式,同时呈现明显的部位和表达量的变化,推测active β-catenin可能通过促进黏附、侵袭、和血管生成在胚胎着床前后起重要作用。
- 陈世知何俊琳刘学庆丁裕斌黄静陈雪梅王应雄
- 关键词：ACTIVE胚胎着床小鼠
- 传染性单核细胞增多症患者不同标本EBV-DNA检测的临床价值被引量：4
- 2018年
- 目的探讨血浆、外周血单个核细胞(PBMC)、咽拭子的EBV-DNA载量对16岁以上传染性单核细胞增多症(IM)患者的诊断价值。方法回顾性分析130例16岁以上疑似IM患者血浆、PBMC和咽拭子3种标本EBV-DNA载量检查结果。结果 61例临床和实验室确诊IM中,血浆标本检出16例,EBV-DNA检出率为26.22%;31例检测PBMC的患者EBV-DNA检出率为61.29%;37例咽拭子EBV-DNA检出率为83.78%。血浆、PBMC、咽拭子以一项或多项阳性为依据的联合检测,EBV-DNA检出率100.00%。结论通过血浆、PBMC、咽拭子EBV-DNA的联合检测可提高16岁以上IM阳性检出率,为临床提供更多的病原学诊断和治疗依据。
- 陈世知谢运兰梅严花庄稚佳
- 关键词：传染性单核细胞增多症血浆外周血单个核细胞咽拭子
- 三基序蛋白25过表达对肺癌细胞H1299顺铂敏感性的影响
- 2014年
- 目的:初步探讨三基序蛋白25(tripartite motif containing 25,TRIM25)过表达对人肺癌细胞株H1299顺铂敏感性的影响及其分子作用机制。方法:应用基因克隆技术构建TRIM25高表达质粒载体,瞬时转染人肺癌细胞株H1299,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot法检测TRIM25蛋白表达水平及其过表达时丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)蛋白水平的变化。用顺铂分别处理转染前后的H1299细胞24 h,MTT法检测细胞耐药性,Annexin V/PI双染法流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡。结果 :同H1299空白组和转染pGCMV/neo空载体组比较,pGCMV-trim25转染组细胞中TRIM25蛋白的表达水平明显增加(P=0.003,P=0.005);且TRIM25过表达时,细胞中PKM2蛋白的表达水平降低(P=0.001,P=0.003)。用顺铂处理后,pGCMV-trim25转染组细胞的药物敏感性显著下降(P<0.001),转染组细胞凋亡率亦明显降低(P<0.001)。结论:TRIM25在肺癌细胞H1299中高表达时,可能通过下调PKM2而降低对顺铂的敏感性。
- 屈灿邱峰陈世知粟林敬怀志
- 关键词：药物敏感性
- GBLP相互作用蛋白研究
- 为了进一步阐明GBLP在普萘洛尔(PRO)生物学效应发生机制中的作用，本文采用免疫共沉淀法结合HPLC-CHIP-IT-MS/MS系统筛选并鉴定了GBLP相互作用蛋白。结果表明，有7种蛋白与GBLP存在相互作用，分别为C...
- 邱峰毛小琴陈世知邱宗荫
- 关键词：普萘洛尔免疫共沉淀生物学效应抗氧化机制
- 文献传递
- 新型腺病毒载体的制备及其特性研究被引量：4
- 2006年
- 目的:本研究在普通腺病毒载体(Adv)纤毛头节区插入了具有整合素特异性的RGD肽,制备了一种新型RGD-Adv,以克服Adv基因转导的柯萨奇腺病毒受体依赖性。方法:用体外连接法构建RGD-Adv,并考察其基因转效率、稳定性及体外、体内毒性。结果:RGD-Adv可有效地实现向受试细胞转导基因,其转导能力随病毒量的增加而加强。结论:具有av亲和性的RGD-Adv是一种安全高效的新型腺病毒载体,将在基因治疗及实验研究中发挥重要作用。
- 邱峰陈世知陈虹
- 关键词：腺病毒载体RGD肽整合素
- 树突状细胞的抗原基因转导及其抗肿瘤免疫作用的研究被引量：3
- 2006年
- 目的制备整合素靶向性腺病毒载体RGD-Adv,向树突状细胞(DCs)转导抗原基因,并研究表达特异性抗原DCs的免疫学特点和抗肿瘤效果。方法使用体外连接法构建RGD-Ad,并以流式细胞技术检测其基因转导效率,通过抗原呈递试验、CTL效应试验和小鼠体内抗肿瘤试验考察表达特异性抗原DCs诱导产生CTL效应和在体抗肿瘤作用情况。结果RGD-Adv可安全高效转导DCs,且为病毒载体剂量依赖性;表达特异性抗原DCs能有效诱导抗原特异性CTL效应,并具有显著抗肿瘤效果。结论RGD-Adv是一种理想的载体系统,通过使DCs表达特异性抗原,诱导机体特异性免疫机制,产生抗肿瘤效果,是一种极具前景的肿瘤免疫治疗方法。
- 邱峰陈世知陈虹周远大
- 关键词：树突状细胞腺病毒载体
- 免疫共沉淀结合微流控芯片技术筛选GBLP相互作用蛋白被引量：2
- 2009年
- 为了进一步阐明G蛋白β亚基2样1蛋白(guanine nucleotide-binding protein subunit beta 2-like 1,GBLP)在普萘洛尔(propranolol,PRO)生物学效应发生机制中的作用,采用免疫共沉淀法结合液相色谱-芯片-离子阱串联质谱(HPLC-CHIP-IT-MS/MS)系统筛选并鉴定人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)中的GBLP相互作用蛋白.结果表明,有7种蛋白与GBLP存在相互作用,分别为酪蛋白α-S1、酪蛋白α-S2、β酪蛋白、桥粒芯蛋白1前体、α-烯醇化酶、果糖二磷酸醛缩酶C、硫氧还原蛋白过氧化物酶2.这些蛋白的生物信息学检索结果提示,GBLP可能参与了细胞的能量代谢调节和抗氧化机制,与普萘洛尔的生物学效应发生机制密切相关.
- 邱峰毛小琴陈世知邱宗荫贾雄飞
- 关键词：普萘洛尔人脐静脉内皮细胞免疫共沉淀
