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陈军

作品数：15 被引量：33H指数：3
供职机构：大连医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 14篇期刊文章
  • 1篇专利

领域

  • 10篇医药卫生
  • 3篇生物学
  • 2篇农业科学

主题

  • 5篇细胞
  • 4篇肿瘤
  • 4篇肝肿瘤
  • 3篇小鼠
  • 3篇基因
  • 2篇动物
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 2篇脂肪
  • 2篇脂肪变
  • 2篇脂肪变性
  • 2篇实时荧光
  • 2篇实时荧光定量
  • 2篇实时荧光定量...
  • 2篇肿瘤细胞
  • 2篇活性
  • 2篇活性氧
  • 2篇肝癌
  • 2篇PI3K/A...
  • 2篇ERK

机构

  • 15篇大连医科大学
  • 1篇长春师范学院
  • 1篇大连大学
  • 1篇沈阳农业大学
  • 1篇大连市动物疫...

作者

  • 15篇陈军
  • 15篇王靖宇
  • 11篇王福金
  • 11篇王爱国
  • 9篇李慧玲
  • 9篇董建一
  • 5篇邱泽文
  • 4篇詹红微
  • 3篇高文婷
  • 3篇崔海鹏
  • 2篇姚亮
  • 2篇李学凤
  • 2篇庄云芳
  • 2篇王亮
  • 2篇王欣欣
  • 1篇姜午旗
  • 1篇程淑静
  • 1篇高丽波
  • 1篇于翰迅
  • 1篇罗光彬

传媒

  • 3篇中华肿瘤防治...
  • 2篇肿瘤
  • 2篇中国生物化学...
  • 2篇实验动物科学
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇中国比较医学...
  • 1篇现代畜牧兽医
  • 1篇实验动物与比...
  • 1篇中国组织工程...

年份

  • 1篇2023
  • 2篇2016
  • 4篇2015
  • 1篇2014
  • 4篇2012
  • 1篇2011
  • 2篇2007
共 15 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
一种简便、高效的实时荧光PCR相对定量方法的建立被引量：5
2012年
目的建立一种简便、高效的实时荧光PCR相对定量方法。方法采用严格一致的引物参数,对Fabp5、Ppar-α及β-Actin三个基因分别设计特异性扩增引物,制备相应的质粒标准品,10倍梯度稀释后制作标准曲线。并以这三个标准曲线分别单独定量正常小鼠肝组织、H-ras12V转基因小鼠肝肿瘤周围组织和肿瘤组织中的Fabp5、Ppar-α和β-Actin的表达水平,以β-Actin为内参,分别采用双标准曲线法、2-△△Ct法和单标准曲线法对Fabp5和Ppar-α的表达进行相对定量分析。结果单标准曲线法与双标准曲线法测定的Fabp5和Ppar-α差异性表达的相对定量值没有显著差异,而用2-△△Ct法获得的相对定量值与双标准曲线法相比,波动较大。结论在引物参数严格一致的基础上,单标准曲线法是一种可行、简便、高效的实时荧光PCR相对定量方法。
陈军王银李慧玲董建一王福金王爱国王靖宇
关键词：实时荧光定量PCR
IVC笼盒常用两种消毒剂毒性比较
2007年
目的对常用过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种消毒剂毒性进行毒理学评价,检验其使用的安全性。方法采用急性、亚急性动物毒性试验方法,对一些毒理学试验结果进行比较。结果过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠半数致死量(LD50)试验均属低毒;2g/L过氧乙酸对动物皮肤无刺激,对眼睛有轻度刺激;以112mg/L有效氯溶液对豚鼠皮肤有轻度刺激性;3种剂量诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核细胞率与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),对小鼠PCE无诱变作用;对小鼠精子无致畸作用(P>0.05)。结论过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种消毒剂属于低毒级物质,在一般消毒使用浓度下具有较好的使用安全性。
邱泽文詹红微梁桂英陈军高文婷王靖宇
关键词：过氧乙酸二氯异氰尿酸钠急性毒性亚急性毒性微核
一种基于多重PCR检测实验猫体内寄生虫的引物
本发明公开一种基于多重PCR检测实验猫体内寄生虫的引物，由1~5号引物对构成，上游引物F1~F5及下游引物R1~R5的DNA序列分别如SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：10所示，只需一次扩增即可同时检测实验猫体...
王亮陈军周子娟王靖宇罗三品刘林风王梓安
LXR-alpha/SREBP-1c通路参与HCV NS5A诱导的肝细胞脂质代谢紊乱被引量：4
2014年
肝细胞脂肪变性是丙型肝炎患者的突出病理特征,但丙肝病毒（HCV）诱导脂肪变性的分子机制尚不清楚.为探究HCV非结构蛋白5A（NS5A）参与诱导脂肪变性的可能分子机制,本研究以HCV NS5A转基因小鼠为研究对象,采集3～16月龄NS5A转基因小鼠和同窝非转基因小鼠的肝组织,进行病理学检测,并用气相色谱-质谱（GC-MS）法分析脂质主要成分胆固醇酯的含量.采用RT-PCR法检测肝细胞中与脂质代谢密切相关基因肝X受体（LXR-alpha）、固醇调节元件结合蛋白（SREBP-1c）、脂肪酸合成酶（FAS）、硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）、过氧化物酶体增殖物受体alpha（PPAR-alpha）的mRNA表达水平.结果表明,与同窝非转基因对照小鼠相比,3～5月龄NS5A转基因小鼠的肝组织没有发生显著的病理性变化,但6～16月龄的NS5A转基因小鼠的肝脏发生了显著的脂肪变性（47.1%vs 13.0%;P=0.003）.与此相一致,胆固醇酯的含量在NS5A转基因小鼠的肝脏中显著升高（P〈0.01）.RT-PCR检测结果表明,与对照小鼠相比,14月龄NS5A转基因小鼠肝组织中与脂质代谢相关的基因LXR-alpha、SREBP-1c、FAS、SCD1的mRNA表达水平显著增高（P〈0.05）,而PPAR-alpha的表达则没有显著变化（P〉0.05）.以上结果提示,NS5A在小鼠肝细胞中可能通过调高LXR-alpha/SREBP-1c信号通路相关基因的表达,进而促进脂质重新合成,诱导脂肪变性.
陈军邱泽文高文婷李慧玲董建一王福金王爱国王靖宇
关键词：非结构蛋白5A脂肪变性
miR-146a/b在Hep3B细胞中的表达及上下游调控机制探讨被引量：2
2016年
目的:探究miR-146a/b在Hep3B的表达及其上游调控机制和下游靶标蛋白。方法:MTT法检测人正常肝细胞株LO2和人肝癌细胞株HepG2、Hep3B的增殖活性。分别提取3个细胞的总RNA和蛋白,应用RT-qPCR和蛋白印记法分别检测细胞株中miR-146a/b的表达和细胞外调节激酶1/2(ERK)、磷酸化ERK 1/2(p-ERK1/2)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、NF-κB抑制蛋白α亚基(IκBα)、白介素1受体关联激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)的蛋白水平。用抑制剂分别抑制Hep3B细胞PI3K、AKT、ERK、NF-κB信号分子的活性并检测miR-146a/b的表达水平及IRAK1、TRAF6的蛋白水平。结果 Hep3B细胞增殖活力和miR-146a/b表达水平显著高于LO2和HepG2(P<0.01)。蛋白印记结果显示,以LO2为对照组,Hep3B细胞的pERK1、ERK1、p-AKT、IκB的蛋白水平明显升高,分别为LO2的10.87、24.68、6.67和1.92倍;IRAK1、TRAF6的蛋白水平明显降低,分别为LO2的0.23和0.003倍。与LO2细胞相比,HepG2细胞的IκB和IRAK1蛋白表达明显升高,分别为LO2的4.46和2.69倍。抑制Hep3B细胞的PI3K和AKT活性12 h和24 h,miR-146a和miR-146b的表达水平显著降低(P<0.05);抑制ERK和NF-κB的活性12 h和24 h,miR-146a/b的表达水平没有显著变化。抑制PI3K、AKT、ERK、NF-κB信号通路活性均可上调TRAF6和下调IRAK1的蛋白表达水平。结论:在恶化程度较高的Hep3B细胞中,PI3K/AKT可通过上调miR-146a/b的表达进而下调TRAF6的蛋白水平,这一机制为肝肿瘤发生发展的机理研究提供了重要线索。
董建一王欣欣王康伟陈军李慧玲王福金王爱国王靖宇
关键词：PI3K/AKTTRAF6
H-ras12V促进肝肿瘤细胞脂肪变性机制探讨被引量：2
2015年
目的探讨固醇调节元件结合蛋白1c(transcription factor sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)在Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤细胞脂肪变性中的作用机制。方法采集9个月龄C57BL/6J小鼠(12只)正常肝组织(Wt)和H-ras12V转基因小鼠(12只)的肝肿瘤组织(T)及其周围组织(P),并用病理学方法进行确诊检测。酶偶联比色法检测组织样本中的甘油三酯含量,蛋白质印迹法检测磷酸化的磷脂酰肌醇3激酶(phosphorylation ofphosphatidylinositol-3kinase,p-PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷酸化的蛋白激酶B(phosphorylation of protein kinase B,p-AKT)及SREBP-1c的蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测SREBP-1c靶基因乙酰辅酶A羧化酶a(acetyl-CoA carboxylase a,ACACa)、乙酰辅酶A羧化酶b(acetyl-CoA carboxylase b,ACACb)、硬脂酰辅酶A脱氢酶(stearoyl-CoA desaturase1,SCD1)及脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASn)基因的mRNA表达水平。结果正常肝组织和周围组织未发生组织病理学变化,肝肿瘤组织与周围组织边界清楚,肝肿瘤组织中的肿瘤细胞分化良好并伴有大泡性脂肪变性。与病理结果相一致,与正常肝组织(1±0.29)及转基因小鼠肝肿瘤周围组织(0.78±0.18)相比较,转基因小鼠肝肿瘤组织中的甘油三酯含量(2.14±0.15)显著增高,P值均<0.001,差异有统计学意义。转基因小鼠肿瘤周围组织与正常肝组织中的甘油三酯含量差异无统计学意义,P=0.092。蛋白质印迹法检测结果表明,与正常肝组织相比,p-PI3K在P和T中呈逐步升高趋势,且差异有统计学意义,P<0.05;与正常肝组织相比,p-AKT和AKT在周围组织和肝肿瘤组织中呈升高趋势,但仅肝肿瘤组织中的p-AKT差异有统计学意义,P=0.028;与正常肝组织及周围组织相比,肝肿瘤组织中的SREBP-1c前体蛋白及成熟体蛋白的表达水平均显著升高,P值均<0.001。实时荧光定量PCR检测结果显示,ACACb和SCD1在正常肝组织、周围组织及肝肿瘤
李学凤陈军赵文王福金王爱国王靖宇
关键词：固醇调节元件结合蛋白肝肿瘤细胞脂肪变性
不同激素剂量和组合对不同品系小鼠超数排卵的影响被引量：1
2011年
背景:超数排卵效果受动物品系、营养水平、年龄、发情周期阶段、光照、超排方法、超排所用激素种类和剂量等诸多因素影响,其中激素剂量和动物品种是关键因素。目的:探讨不同剂量孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)组合,对不同品系小鼠超数排卵效果的影响。方法:分别用不同剂量的PMSG和HCG对ICR鼠、KM鼠和BALB/c鼠进行超数排卵处理,比较激素处理后各品系小鼠超数排卵的胚胎总数、平均胚胎率、正常胚胎及平均可用胚率。结果与结论:5IU PMSG+7IU HCG剂量组合对ICR鼠和KM鼠超排处理效果较好,BALB/c鼠超排的最适激素剂量为3IU PMSG+5IU HCG;使用5IU PMSG+7IU HCG剂量组合分别处理3种品系小鼠时,ICR鼠和KM鼠平均胚胎率和平均可用胚率显著高于BALB/c鼠(P<0.05)。为获得较多的胚胎进行相关实验,应当选择ICR和KM等小鼠进行超排,特别是选择国际通用的ICR鼠。
邱泽文姜午旗高丽波罗光彬陈军詹红微高文婷王靖宇
关键词：小鼠超数排卵胚胎BALB/C鼠激素
小鼠肝肿瘤细胞原位灌注分离培养方法的建立被引量：1
2015年
目的建立一种有效分离小鼠肝肿瘤细胞的原代培养方法,为肝癌发生发展的机制研究提供有效的实验手段。方法以9月龄H-ras12V转基因肝癌小鼠为实验材料,采用传统的小鼠肝细胞原代培养的灌注分离法,并对其进行改进,即在灌注的同时,用剪刀剪去肿瘤表面阻塞的血管和组织,疏通灌注液流,达到有效消化肿瘤组织的目的。对用此改良灌注法分离的肝肿瘤细胞和肿瘤周围组织细胞进行成活率计数,并进行后续的原代细胞培养,观察第3、5、7天的细胞生长状态和形态特征。结果通过对传统的灌注分离肝细胞法进行改良,分离的肝肿瘤细胞成活率由未改良前的10%提升到40%。原代培养的结果表明,分离的肝肿瘤细胞与肝肿瘤周围的正常肝细胞的形态和随时间延长的凋亡变化状态没有显著差异。结论改良的灌注法能够有效的分离小鼠肝肿瘤细胞,并显著提高其存活率和细胞质量,可用于后续的原代细胞培养并开展相关的实验。另外,本文对改良灌注法的详细叙述也为相关的科研工作者提供了切实可行的操作规程。
李学凤陈军庄云芳董建一李慧玲王福金王爱国王靖宇
关键词：肝肿瘤原代细胞培养
肝肿瘤线粒体功能障碍及抗氧化应激机制的探讨被引量：2
2015年
目的 :探讨癌基因Ras诱导小鼠肝组织中线粒体功能的障碍及肝肿瘤细胞抗氧化应激反应的分子作用机制。方法 :采集H-ras12V转基因雄性小鼠的肝癌组织、癌旁组织以及正常健康雄性小鼠的肝组织(正常对照)。采用比色法定量检测肝组织中线粒体呼吸链复合物Ⅰ的活性;对线粒体呼吸链相关基因的转录组进行测序,并采用实时荧光定量PCR法检测组织中线粒体复合物关键酶NADH脱氢酶(辅酶)1α亚基12[NADH dehydrogenase(ubiquinone)1 alpha subcomplex 12,Ndufa12]、NADH脱氢酶(辅酶)铁硫蛋白6[NADH dehydrogenase(ubiquinone)Fe-S protein 6,Ndufs6]、泛醌细胞色素C还原酶结合蛋白(ubiquinol-cytochrome C reductase binding protein,Uqcrb)和细胞色素C氧化酶7a2(cytochrome C oxidase subunitⅦa polypeptide 2,Cox7a2)m RNA的表达水平以及Bcl-2和解偶联蛋白2(uncoupling protein2,Ucp2)m RNA的表达水平;免疫荧光法检测组织中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量。结果 :与正常健康雄性小鼠肝组织相比,H-ras12V转基因雄性小鼠肝癌组织和癌旁组织中线粒体呼吸链复合物Ⅰ的活性均显著降低(F=14.26,P=0.003);转基因小鼠肝癌组织和癌旁组织中Ndufa12、Ndufs6、Uqcrb和Cox7a2 m RNA的表达水平均显著降低(F=18.55,P=0.001;F=7.06,P=0.014;F=12.81,P=0.002;F=10.51,P=0.004)。免疫荧光检测结果显示,与正常对照组和转基因小鼠肝癌组织相比,转基因小鼠癌旁组织中ROS的水平显著升高(F=31.35,P=0.001);Bcl-2和Ucp2m RNA表达水平均显著升高(F=20.29,P=0.002;F=15.51,P=0.001)。结论 :癌基因Ras的表达直接下调了肝组织线粒体呼吸链复合物关键酶的表达,进而导致线粒体功能障碍并上调细胞内ROS的水平。肝癌细胞通过促进Bcl-2和Ucp2的表达降低线粒体产生的ROS,进而促进肝癌的发生和发展。
庄云芳李慧玲姚亮崔海鹏董建一陈军王福金王爱国王靖宇
关键词：活性氧
H-ras12V转基因肝癌小鼠的遗传不稳定性分析被引量：1
2012年
目的:探讨H-ras12V转基因小鼠的肝癌发生与遗传不稳定性的关系,以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)在其中的作用。方法:用微卫星标志物的PCR-放射自显影法检测H-ras12V转基因雌雄小鼠肝癌及其周围组织的微卫星杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)、杂合性保留(retention of heterozygosity,ROH)和微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)。用实时荧光定量PCR和FCM法分别分析该转基因雌雄小鼠肝组织中H-ras12V癌基因表达水平和ROS水平。结果:仅雌雄转基因小鼠肝癌组织中伴有LOH发生;所有小鼠均发现伴有ROH,但转基因小鼠肝癌组织中ROH检出率与非转基因小鼠肝组织相比显著增高(P<0.05);所有组织标本中均未检测出MSI。转基因小鼠的H-ras12V癌基因表达和ROS水平均显著高于非转基因小鼠,且雄性小鼠显著高于雌性小鼠(P<0.05)。结论:H-ras12V癌基因可能通过诱导ROS水平增高,进一步引起遗传不稳定性。这可能是H-ras12V转基因小鼠肝癌发生的一条重要途径。
李慧玲董建一陈军王福金王爱国王靖宇
关键词：杂合性丢失微卫星不稳定性活性氧
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