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陈则: 作品数：70 被引量：217H指数：7; 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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编码流感病毒血凝素基因和CD40L的核酸疫苗抗小鼠流感研究被引量：5: 2004年; 为了检测表达CD40L的质粒能否作为核酸疫苗佐剂提高A/PR8/34流感病毒血凝素(HA)DNA疫苗的免疫应答,构建了表达鼠CD40L的质粒,并将它与A型流感病毒的 HA DNA疫苗用电击的方法共同免疫BALB/C小鼠(各30礸),免疫两次,间隔三周,第二次免疫后1周,用致死量流感病毒A/PR8/34攻击。发现与单独免疫30礸 HA相比,血清中抗HA的IgG抗体量明显提高,且以IgG2a抗体提高为主,小鼠体重减轻非常少且体重恢复加快。实验结果显示,CD40L能作为流感病毒核酸疫苗佐剂,提高小鼠抗流感病毒攻击的能力。; 邹丽容方芳陈则; 关键词：流感病毒血凝素 CD40L 核酸疫苗免疫应答

茯苓多糖对流感灭活疫苗的免疫增强作用被引量：24: 2009年; 探讨茯苓多糖作为流感病毒灭活疫苗佐剂的免疫增强作用.将不同剂量(200μg或1 000μg)的茯苓多糖分别与低剂量(0.015μg)或高剂量(1.5μg)流感病毒(A/PR/8)灭活疫苗共同免疫小鼠,以相应剂量灭活疫苗的单独免疫组、灭活疫苗与氢氧化铝(100μg)共同免疫组、PBS免疫组作为对照组.一次免疫后3周收集血清,ELISA检测血清中IgG、IgG1和IgG2a的抗体水平;并用致死量(40×LD50)流感病毒(A/PR/8)攻击小鼠,通过观察小鼠的体重丢失率、肺部病毒量、存活率来反映佐剂的免疫增强效果和疫苗的保护作用.结果显示,茯苓多糖能显著增加血清抗体水平,并提高小鼠抗致死量流感病毒攻击的能力,其免疫增强效果与氢氧化铝相当.茯苓多糖可作为一种新型的流感病毒灭活疫苗的免疫佐剂.; 谢国秀王芙艳杨忠东王绍彬张风华陈则方芳; 关键词：茯苓多糖流感灭活疫苗佐剂

基于流感病毒血凝素的通用流感疫苗研究进展: 2015年; 目前使用的流感疫苗都是针对现行流行株设计的，因此难以有效应对病毒快速变异出现的新病毒株，而开发能同时抵抗多个流感病毒株感染的具有交叉保护作用的通用疫苗是今后流感疫苗研发的趋势。随着对流感病毒研究的深入，人们发现将传统认为具有高度变异性的流感病毒血凝素蛋白合理设计成疫苗靶抗原，也可以在一定程度上起到抗多个流感病毒株感染的保护作用，这表明流感病毒血凝素也具有作为通用流感疫苗候选抗原的潜力。此文对近年来基于血凝素构建的通用流感疫苗的研究进行综述。; 陈绍恒陈则; 关键词：流感疫苗流感病毒保守序列抗体

SARS灭活疫苗对猴体的免疫原性及保护效果观察被引量：5: 2004年; 观察SARS灭活疫苗对猴体的免疫原性及保护效果 ,为进一步的临床研究奠定基础 .将BJ0 1株SARS病毒感染的Vero细胞的培养液过滤澄清 ,经 β 丙内酯灭活和超滤浓缩 ,然后经凝胶过滤和离子交换层析获得纯化的SARS灭活疫苗 .经HPLC分析其纯度为 97.6 % ,在电子显微镜下可观察到SARS病毒样颗粒 .蛋白质印迹 (westernblotting)分析表明 ,纯化SARS灭活疫苗可与SARS患者恢复期血清起反应 .纯化的SARS灭活疫苗符合有关的质量标准 .用SARS灭活疫苗免疫猴体可产生高效价的中和抗体 ,可阻止SARS病毒在猴体内增殖 ,且对SARS病毒攻击具有保护作用 .在低中和抗体情况下 ,用SARS病毒攻击免疫猴后没有出现感染增强现象 .猴体免疫SARS灭活疫苗后 ,无论正常剂量还是大剂量疫苗免疫 ,均未发现局部和全身副反应。; 秦鄂德石慧颖唐琳王翠娥常国辉丁志芬赵铠汪建于曼司炳银刘建源陈则吴东来彭文明孟庆文刘伯华韩伟国尹训南段鸿元杨保安战大伟田龙程晓洁吴劲松谭刚李懿李豫川李双利刘永刚刘洪; 关键词：猴体 SARS病毒灭活疫苗免疫原性中和抗体疫苗免疫

一种SARS病毒DNA疫苗pVFS: 本发明涉及医药生物工程技术领域，是一种用于预防严重急性呼吸道综合征的SARS病毒DNA疫苗pVFS。它由pVFS病毒S蛋白的改造后编码基因插入真核表达载体所构成。该重组质粒转化感受态大肠杆菌DH5α就成pVFS工程菌，可...; 孙树汉陈则郭瀛军黄力王开宇张术; 文献传递

A、B型流感病毒HA1嵌合基因疫苗的构建及免疫保护研究: 2008年; 为制备能提供交叉保护的疫苗,本研究在证实A型、B型流感病毒HA1 DNA能够提供抗流感病毒保护的基础上,将编码A型和B型流感病毒HA1的基因构建在同一质粒中,制备成嵌合DNA疫苗。将该重组质粒免疫小鼠,并以致死量同种流感病毒A/PR/8/34或B/Ibaraki/2/85攻击,通过测定小鼠的血清抗HA抗体和保护效果(包括存活率、肺部病毒量和体重丢失率)来评价DNA疫苗的免疫效果。结果表明:A、B型流感病毒HA1嵌合DNA疫苗能保护小鼠抵抗两种致死量流感病毒的攻击,具有提供交叉保护的能力。; 王芙艳杨忠东杨文余平张风华常海燕陈则方芳; 关键词：流感病毒血凝素

Plackett-Burman与响应面法相结合优化化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基被引量：4: 2014年; 目的采用Plackett-Burman与响应面法相结合优化化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基。方法在自主研发的含蛋白无血清培养基的基础上,通过Plackett-Burman试验和响应面试验设计考察23组营养物质对MDCK细胞生长的影响,以细胞比生长速率、维持时间及最大活细胞密度作为响应值进行筛选和定量优化。以最优化的因子浓度配制化学成分明确的无血清无蛋白培养基,分别于细胞培养板和搅拌瓶中培养MDCK细胞,考察细胞比生长速率、维持时间和最大活细胞密度3个响应值的大小。结果通过Plackett-Burman试验筛选出4种对MDCK细胞生长具有显著性促进作用的因子:半胱氨酸、苏氨酸、亮氨酸和葡萄糖,苏氨酸和亮氨酸有助于提高细胞比生长速率,半胱氨酸和葡萄糖有利于提高最大活细胞密度;该化学成分明确的无血清无蛋白培养基能很好地支持MDCK细胞悬浮生长,单细胞悬浮培养MDCK细胞时,细胞比生长速率可达0.058/h,最大活细胞密度可达32.65×105个/ml,分别比基础培养基提高了2.15和3.09倍。结论采用Plackett-Burman与响应面法相结合优化了化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基,为采用MDCK细胞大规模工业化生产流感疫苗奠定了基础。; 黄锭黎文明赵亮范里叶朝阳刘旭平谭文松罗剑陈则; 关键词：MDCK细胞

人类巨细胞病毒UL133基因在临床低传代株中的多态性研究被引量：2: 2010年; 人类巨细胞病毒在多次传代后,会表现出不同的毒力水平.与临床低传代株Toledo相比,实验室高传代株AD169缺失了19个开放阅读框(ORF).这19个基因被认为是与HCMV致病性最可能相关的一组基因,研究这些基因的多态性对揭示HCMV致病性的遗传基础具有指导意义.UL133基因是这19个ORF中的一个.以临床低传代株Toledo和Merlin为对照,分析了23个临床病毒株UL133基因的遗传多态性.序列分析表明,UL133基因具有一定的多态性,Toledo株、Merlin株与我们分离到的临床株一起可分为3个基因型:G1、G2和G3.G2、G3型毒株均能导致先天性感染.没有发现UL133基因型与患儿临床疾病的必然关联.; 扶星星李梨平黄超洋李小曼方芳陈则; 关键词：人巨细胞病毒基因分型遗传多态性

预防流感病毒的截短的神经氨酸酶疫苗及其制备方法: 本发明是一种预防流感病毒的截短的神经氨酸酶疫苗及其制备方法。本疫苗成分是截短的A/PR/8/34流感病毒NA基因。A/PR/8/34流感病毒NA基因编码区全长1365核苷酸，编码一个大小为454个氨基酸的蛋白质产物，其中...; 陈则; 文献传递

SARS相关冠状病毒S2基因的克隆及其DNA疫苗的免疫效果被引量：3: 2003年; 目的 :构建抗原基因为 SARS相关冠状病毒 (severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS- Co V) S2基因的DNA疫苗 ,将其接种小鼠后观察病毒特异性抗体产生情况。方法 :将合成的 S2基因片段克隆至真核表达载体 ,随之将质粒进行小鼠肌内接种免疫 ,定期检测血清中抗 SARS- Co V的病毒特异性抗体水平。结果 :疫苗接种后第 2周就能检测出病毒特异性抗体 ,随着时间的延续 ,抗体水平逐步升高 ,而空质粒对照组未检测出明显的特异性抗体。结论 :以 S2为抗原基因的 DNA疫苗能诱导; 郭瀛军黄力王开宇张术陈祖欢朱维佳陈则孙树汉; 关键词：冠状病毒 S2基因 DNA疫苗免疫效果严重急性呼吸综合征

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