陈志谨
- 作品数:7 被引量:34H指数:4
- 供职机构:第三军医大学基础部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省科技攻关计划新世纪高等教育教学改革工程更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程生物学环境科学与工程更多>>
- 铜绿假单胞菌噬菌体PaP1内溶素基因克隆、表达及活性分析被引量:5
- 2008年
- 目的构建铜绿假单胞菌噬菌体内溶素重组原核表达载体,检测重组蛋白的酶学活性及抑菌活性。方法利用重组技术将铜绿假单胞菌裂解性噬菌体PaP1内溶素基因构建到表达载体pQE31中,并在大肠杆菌M15(pREP4)中诱导表达,通过非变性方法纯化重组融合蛋白,利用酶谱电泳、抑菌实验等技术检测酶学活性及抑菌活性。结果酶谱电泳方法结果显示重组融合蛋白对铜绿假单胞菌细胞壁肽聚糖有降解作用,抑菌活性检测结果显示重组融合蛋白对金黄色葡萄球菌有一定的抑菌效果。结论该研究从实验方面证实了噬菌体PaP1内溶素基因的生物学功能。
- 孙卫忠胡晓梅饶贤才谭银玲陈志谨丛延广胡福泉
- 关键词:噬菌体基因表达活性鉴定
- 利用废水液体发酵生产单细胞蛋白的实验研究被引量:11
- 2001年
- 利用工厂废水或动物血制作培养基 ,以液体发酵方式培养产朊假丝酵母NCTC 35 76菌及甘饲 85 0 1菌。离心分离菌体 ,测定菌体生物生长量 ,并观察蔗糖、温度、酸碱度、发酵时间、种子液接种量对生物生长量的影响。生化方法分析NCTC 35 76菌单细胞蛋白的品质 ,氨基酸分析仪分析单细胞蛋白的氨基酸组成。结果表明 ,玉米淀粉厂废水 ,不必调pH ,不用添加其它任何组分 ,即可直接用于液体发酵产朊假丝酵母NCTC 35 76菌 ;pH 4.0~ 7.0均对生长量无明显影响 ;2 4h培养已达到最好生长量 ,再延长时间已不能提高产量 ;2 8℃及 37℃培养无明显差别 ,在3 %~ 17%种子液接种量范围内 ,接种量与生长量有正相关关系。研究表明 ,玉米淀粉厂废水单一成分即可用于液体发酵产朊假丝酵母NCTC 35 76菌 ,原料成本低 ,且易于产品分离纯化和工业化生产中的连续培养 ,是单细胞蛋白生产的良好途径。
- 刘启富陈志谨金晓琳张克斌饶贤才胡晓梅胡福泉
- 关键词:废水利用发酵产朊假丝酵母单细胞蛋白
- 嗜酸乳杆菌3-磷酸甘油醛脱氢酶的分离纯化被引量:8
- 2009年
- 目的分离纯化嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)ATCC 4356的3-磷酸甘油醛脱氢酶。方法利用硫酸铵分级沉淀法、亲和层析、阴离子交换和分子筛层析对嗜酸乳杆菌GAPDH进行了分离纯化。通过N端测序鉴定了纯化产物;并用分子筛测定了嗜酸乳杆菌GAPDH的相对分子质量(Mr)。结果纯化产物在SDS-PAGE胶上呈现Mr为3.7×104的单一条带,产量为0.9 mg/L(嗜酸乳杆菌培养物)。N端测序结果证明纯化产物为嗜酸乳杆菌GAPDH。分子筛测定的GAPDH的Mr为7.08×104,表明嗜酸乳杆菌GAPDH是二聚体。结论通过该纯化方案,可大量获得电泳纯的嗜酸乳杆菌GAPDH,为进一步研究其免疫功能以及开发为免疫促进剂打下了基础。
- 潘渠丛延广侯瑞陈志谨胡福泉邱岳王广科
- 关键词:3-磷酸甘油醛脱氢酶嗜酸乳杆菌纯化二聚体
- 临床医学七年制微生物学实验课的改革与实践被引量:7
- 2002年
- 为了培养学生的动手能力、综合分析问题和解决问题的能力.我们对临床医学七年制微生物学实验课教学大纲、教学计划、教学内容及教学方法进行较系统改革.使实验课形成一门独立的微生物学实验技能课,在微生物学理论课上完后集中授课;增删重组实验内容,压缩印证性实验,增加综合性和探索性实验内容;实验课强调预习,材料尽量让学生自己准备,自己规划安排实验.教员加强实验指导,随时纠正操作上的错误,严格要求,严格训练.要求写出论文式实验报告;在老师的指导下设计探索性实验,对确实合理而且有意义的课题,学校给予一定的资助在课余时间完成.实验效果初步证明,我们的实验教学改革可以保证实验教学的整体性和连续性,有利于培养学生动手能力和对科学研究的兴趣,有利于调动学生的学习积极性.
- 汪正清黎庶陈炜胡廷徽陈志谨
- 关键词:微生物学实验教学教学改革
- 应用重组乳糖酶LacLM生产无乳糖奶的研究
- 2009年
- 为明确由第三军医大学基础部微生物学教研室研发的重组乳糖酶LacLM的工业价值和应用方式,采用葡萄糖氧化法(GOD/POD)测定了该酶水解乳糖的酶学特性,以及对牛奶中所含乳糖的水解率。实验测得该酶对乳糖的Km和Vmax值分别是13.9±1.05mM和14.1±0.31μmol glucose/(min·mg)protein。该酶水解乳糖的最适温度和pH分别为37℃和7。在10℃下每升牛奶加入40mg酶可以在12h内完全水解牛奶中的乳糖;在25℃下每升牛奶加入5mg酶可以在18h内完全水解牛奶中的乳糖;在37℃下添加2.5mg酶就能在10h内完全水解牛奶中的乳糖。试验结果表明,重组乳糖酶LacLM可以直接加入牛奶中,在低温或常温下去除牛奶中的乳糖,适合用于无乳糖奶的工业化生产。
- 潘渠李晋川王竞谭银玲朱晓燕陈志谨胡福泉
- 关键词:牛奶乳糖不耐受
- 萋-尼染色导致的总挥发性有机物污染及其控制方法被引量:3
- 2017年
- 目的建立一种改良抗酸染色冷染方法,用以控制实验室总挥发性有机物(total volatile organic compound,TVOC)污染。方法采用TVOC检测仪定量测定实验室内空气中的苯系物和TVOC污染程度;以卡介苗(bacillecalmette-guerin,BCG)为染色标本,配制含有1%Triton X-100标本稀释液和初染液,建立不用加温助染的抗酸染色冷染法替代传统抗酸染色法。结果传统萋-尼抗酸染色时,室内TVOC污染在12 min时间点即高达1 014 ppb(约1 mg/m^3),成倍超过国家室内卫生标准(GB50325-2010)规定值(500 ppb,即0.5 mg/m^3);同样条件下,用改良冷染法染色期间,室内TVOC量有所增加,但在试验期间最高值为387 ppb,保持在国家室内卫生标准容许限度以下;利用Triton X-100建立的改良抗酸冷染法具有抗酸染色特性,其对抗酸杆菌的可检测度为3×10^(-6)~6×10^(-5)CFU/mL。结论抗酸染色冷染法可用于替代传统萋-尼抗酸染色,从而控制实验室的TVOC污染问题。
- 金浩龙陈志谨熊昆金晓琳
- 通过生物信息学技术预测铜绿假单胞菌噬菌体内溶素的作用机制被引量:2
- 2008年
- 目的对20种铜绿假单胞菌噬菌体基因组中可能的内溶素基因进行生物信息学分析,探讨其可能的作用机制。方法采用开放阅读框预测、同源检索、多重序列比对、蛋白质模型自动匹配等方法预测可能的内溶素及其内溶素相关基因。结果通过铜绿假单胞菌噬菌体基因组进行分析,新发现8种内溶素基因和2种穴蛋白基因,对新发现基因的类型做了相关推定。结论利用生物信息学手段分析已知序列,可以迅速、方便、有效地确定未知基因的功能及作用方式。
- 孙卫忠胡晓梅饶贤才谭银玲陈志谨丛延广胡福泉
- 关键词:噬菌体生物信息分析