陈良国
- 作品数：14 被引量：103H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 普通小麦供体种穗发芽抗性相关基因AIP2的克隆与进化研究被引量：2
- 2013年
- 克隆普通小麦3个基因组供体种的穗发芽抗性相关基因AIP2(ABI3interacting protein 2),预测、分析其功能,阐明其保守区域在不同材料间的变异,为其进化研究提供理论依据,同时为普通小麦AIP2基因的研究以及利用该基因改良穗发芽性状奠定基础。以野生一粒小麦(Triticum boeoticum,AA,2n=14)、拟斯卑尔脱山羊草(Aegilops speltoides,SS,2n=14)、节节麦(Aegilops tauschii,DD,2n=14)为材料,采用同源克隆的方法克隆AIP2基因,利用生物信息学软件分析其基因结构及功能,并进行遗传进化分析。结果表明,从小麦3个供体种材料中成功克隆AIP2基因,该基因开放阅读框非常保守,均为969bp,编码323个氨基酸残基。3个供体材料间AIP2氨基酸序列仅存在7个氨基酸残基的差异,结构域预测结果显示,AIP2蛋白含有锌指环家族典型的锌指环结构域,进化分析发现,AIP2基因在植物中非常保守,推测该基因在禾谷类作物中可能具有相似的功能。
- 胡翠花李晓燕高翔陈其皎董剑赵万春陈良国石引刚
- 关键词：小麦克隆进化
- 小麦农艺性状与品质特性的多元分析与评价被引量：66
- 2014年
- 估算96个小麦品种(系)的11个农艺性状和10个品质特性参数的主成分,并以主成分和欧氏距离为基础,分别作二维排序分析和聚类分析。农艺性状的前4个主成分反映了85.3450%的原始数据信息量;品质特性的前4个主成分代表了89.1483%的原始数据信息量。以96个材料的主成分得分绘制二维排序图,27个小麦品种(系)表现为矮秆、子粒和旗叶较大,丰产性较好、综合农艺性状优良;32个小麦品种(系)表现为铁、锌含量较高,加工品质较好、综合品质特性优良。在系统聚类图中,农艺性状和品质特性分别被聚成5类。综合农艺性状较好的材料主要集中在第Ⅲ类和第Ⅳ类;综合品质特性较好的材料主要集中在第Ⅰ类和第Ⅱ类。综合分析发现,同时兼顾丰产性较好且子粒铁、锌含量较高,品质特性较好的小麦品种(系)有:泰山9818、西农822、轮选719、杨-31、西安837和中育9383。将聚类分析和二维排序分析结合起来,能较好的对小麦的性状组成做出综合评价,鉴定和评价出优质、高产、综合性状优良的小麦品种(系),为小麦遗传育种提供优良的种质资源,为合理选配亲本提供参考。
- 要燕杰高翔吴丹李晓燕陈其皎董剑赵万春陈良国石引刚李学军
- 关键词：小麦农艺性状主成分分析聚类分析
- 黑麦籽粒Waxy蛋白亚基的高效分离与鉴定技术体系的构建被引量：1
- 2013年
- 【目的】构建用于制备级分离及高效鉴定黑麦籽粒Waxy蛋白亚基的技术体系,为该亚基理化特性的分析、功能的发掘及Waxy种质的快速筛选等提供理论参考。【方法】设计特异引物从灌浆期间的奥地利黑麦籽粒cDNA中克隆获得Waxy,并进行体外表达;利用DuoFlow对籽粒蛋白提取物进行纯化,对峰值收集物、原核表达产物及其Ni柱纯化的重组Waxy蛋白进行SDS-PAGE分离,挖取蛋白条带进行MALDI-TOF质谱鉴定,结合经由基因序列所推导的氨基酸序列,确定回收产物的Waxy蛋白属性;在优化电泳条件的基础上构建针对Waxy蛋白的毛细管电泳体系;同时,利用部分黑麦品种对DuoFlow及CE体系的有效性进行验证。【结果】核苷酸序列分析表明,从奥地利黑麦cDNA中克隆获得一条覆盖Waxy全长的编码序列(GenBank登录号:KF559182),其理论编码产物约为60 kD;利用DuoFlow Q1阳离子交换柱,以低浓度Tris-Hcl(20 mmol·L-1Tris-Hcl,pH 9.5)进行蛋白挂柱,高浓度NaCl(20 mmol·L-1Tris+1 mol·L-1NaCl,pH 9.5)进行蛋白洗脱,214 nm波长检测,实现了对籽粒Waxy蛋白的DuoFlow高效分离;纯化产物的SDS-PAGE条带大小、质谱鉴定肽段与黑麦、小麦Waxy蛋白序列相似性的统计结果表明,DuoFlow峰值回收产物具有黑麦Waxy亚基一致的特征序列,故属于Waxy蛋白;以DuoFlow纯化产物为标准样,以0.05 mmol·L-1硼砂+15%乙腈+1%SDS溶液(pH 9.5)为缓冲液,采用分离电压20 kV,温度25℃,检测波长214 nm,压力进样,0.5 psi×5 s,在11—12 min处获得峰值约12 mAU单一主峰,图形清晰,基线水平,从而构建了Waxy蛋白的CE鉴定体系,且籽粒Waxy蛋白提取物能直接用于对该亚基的检测;同时,利用黑麦品种对上述体系的验证结果表明,DuoFlow及CE体系适于对Waxy亚基的高效分离与通量检测。【结论】从奥地利栽培黑麦cDNA文库中克隆获得Waxy完整编码序列,构建了能特异分离黑麦籽粒Waxy蛋白的DuoFlow制备级纯化体系,
- 孟敏董剑高翔赵万春李晓燕陈其皎陈良国石引刚
- 关键词：WAXY蛋白毛细管电泳
- 低分子量谷蛋白亚基在小麦品种形成过程中的变化特征被引量：1
- 2013年
- 【目的】研究普通小麦品种选育过程中低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)的变化特性,理解该基因家族成员多样性的起源,并为小麦品质改良提供参考。【方法】以3套小麦高代杂交品系(F5/F6)为材料,利用毛细管电泳(CE)技术从储藏蛋白水平鉴定LMW-GS亚基的变化;根据GenBank中已公布的LMW-GS编码序列设计特异性引物,进行PCR扩增、克隆、测序及序列分析。【结果】毛细管电泳结果表明,与亲本相比,高代供试品系均保持了相对稳定的LMW-GS数目,但多个亚基在籽粒中的最终含量却发生明显变化;同时,测试品系还产生了亲本所不具有的新条带。对克隆获得的54条序列(GenBank登录号KC222070-KC222121和KC478714-KC478715)进行序列分析,均具有LMW-GS的典型结构,包括相对保守的信号肽、存在丰富变异的中间重复区及保守的C-端,因此属于LMW-GS基因家族成员;子代与对应亲本的相似性分析表明,3套材料中均存在极端保守序列,子代序列与其相应父本序列完全一致,且都属于LMW-m型亚基;相对保守序列所占比例最大,由于微弱的SNPs,双亲都充当变异序列的供体;蛋白质序列分析还揭示了额外Cys亚基的产生过程。此外,还发现含10个或11个半胱氨酸(Cys)残基的LMW-GS。Cys残基的变异主要发生在C-端Ⅲ区,只有1条序列的Cys变异发生在C-端Ⅱ区。【结论】小麦品种选育过程,父源性的LMW-m型低分子量谷蛋白亚基较其它类型亚基更趋于序列的保守,SNPs则是产生LMW-GS多样性的主要动力。
- 杨芮高翔陈其皎李晓燕董剑孟敏赵万春石引刚陈良国
- 关键词：小麦毛细管电泳多样性
- 利用HPCE构建小麦LMW-GS标准图谱初探被引量：1
- 2015年
- 为给不同小麦品种低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)的鉴定、品质预测提供快速、准确的方法,以黄淮麦区14个普通小麦品种为材料,首先利用SDS-PAGE和分子标记确定LMW-GS组成,然后采用改进的HPCE体系分离LMW-GS,最后通过控制变量法比对小麦品种间相同亚基以判断各LMW-GS亚基在图谱中对应的峰。结果表明,采用SDS-PAGE和分子标记相结合的方法可以更加准确地鉴定小麦LMW-GS;利用HPCE体系获得的小麦LMW-GS图谱具有很高的重复性,重复试验所得小麦LMW-GS图谱中各个峰迁移时间的相对标准偏差均在0.30%以下;通过控制变量法所建立的小麦LMW-GS图谱可以实现Glu-A3a、GluA3c、Glu-A3d、Glu-B3a、Glu-B3d、Glu-B3h的快速鉴定。
- 王玉杰杨明明董剑高翔赵万春石引刚陈良国
- 关键词：小麦低分子量谷蛋白亚基分子标记高效毛细管电泳
- 小麦PPO基因等位变异及面粉白度特性分析被引量：4
- 2012年
- 利用分子标记PPO18和STS01对173份供试小麦品种Ppo2-A和Ppo2-D位点的等位基因变异进行分子检测,并根据品种间不同PPO等位基因组合类型将供试小麦品种进行分类,同时对多酚氧化酶PPO活性进行生化测定及面粉白度测定分析。结果表明,173份小麦品种共检测出Ppo-A1b/Ppo-D1a、Ppo-A1b/Ppo-D1b、Ppo-A1a/Ppo-D1a和Ppo-A1a/Ppo-D1b4种等位基因组合类型,且各基因组合类型出现的频率分别为38.7%、13.9%、35.8%和11.6%;供试小麦品种不同位点PPO等位基因出现的频率差异较大,2A位点等位基因Ppo-A1a、Ppo-A1b出现频率相近,而2D位点等位基因Ppo-D1a出现频率是Ppo-D1b的3倍;所测定的173份小麦品种PPO活性均值为117.3A475/(min.mg),其中低PPO品种所占比例较高;4种基因组合类型PPO活性顺序为Ppo-A1a/Ppo-D1b>Ppo-A1a/Ppo-D1a>Ppo-A1b/Ppo-D1b>Ppo-A1b/Ppo-D1a,且彼此间差异均达到显著水平(P<0.05);供试小麦的面粉白度均值为73.0%,达到国家面粉白度等级一级标准的品种38份,占供试小麦总数的22.0%;其中基因组合为Ppo-A1a/Ppo-D1b的品种面粉白度显著低于其他3种基因组合。总体来看,供试的小麦品种间面粉白度及籽粒PPO活性变异范围较广,面粉白度与PPO活性呈显著负相关,且控制PPO的主效基因的等位变异对PPO活性及面粉白度均有显著影响。对供试小麦品种的面粉白度、PPO活性表现及PPO等位基因组合类型进行综合考察,筛选出23份具有高白度低PPO活性的小麦品种,可以作为高白度低PPO活性小麦育种的亲本材料。
- 王蕾高翔陈其皎李晓燕董剑赵万春魏慧石引刚陈良国
- 关键词：小麦品种PPO活性面粉白度
- 簇毛麦——用于小麦改良的一种野生植物被引量：4
- 2012年
- 将小麦野生近缘属的有益性状基因导入普通小麦(Triticum aestivum)已成为目前小麦品种改良的重要而有效的途径之一。簇毛麦(Dasypyrum villosa)常被用作改良小麦的一种有效的基因资源,其具有耐寒、分蘖力强、生长繁茂、多小花、籽粒蛋白质含量高、耐盐抗旱和抗多种小麦主要病害等特性。本研究对簇毛麦染色体及其组型和带型、簇毛麦与小麦属的亲缘关系、簇毛麦与小麦属的杂交以及簇毛麦在普通小麦改良中的应用等方面的研究进展进行回顾总结,以期为更好地对簇毛麦的开发利用提供依据。
- 赵万春董剑陈其皎李晓燕高翔石引刚陈良国
- 关键词：贮藏蛋白基因资源抗病虫
- 小麦主要库、流、源器官对产量和品质影响的初步评价被引量：5
- 2014年
- 为研究小麦主要库、流、源器官与产量和品质的关系,分析评价其对产量和品质的影响,为小麦优质高产育种提供参考,首先分析旗叶、穗下节和籽粒与产量性状和品质特性间的相关性,然后以旗叶、穗下节和籽粒为自变量,以产量性状和品质特性为因变量进行多元回归分析。结果表明:(1)较大的旗叶面积是保证小麦产量和品质的前提;旗叶的长、宽和面积对产量均有促进作用,且旗叶宽较旗叶长对产量的影响更明显;旗叶宽与沉降值、面团稳定时间、面团形成时间和拉伸面积呈显著或极显著负相关,且较旗叶长对品质的影响更明显。(2)高秆品种,穗下第一节长/穗下第二节长与产量呈负相关,与品质呈正相关;矮秆品种,穗下第一节长/穗下第二节长与产量呈正相关,与品质呈负相关。无论是高秆还是矮秆,穗下第一节直径均与产量呈正相关,且在矮秆中的作用更显著;穗下第一节直径与籽粒蛋白质含量,湿面筋含量呈正相关,与沉降值、面团稳定时间和面团形成时间呈负相关。(3)粒厚对产量的作用最大,粒宽与粒长次之;粒长、粒宽和粒厚与小穗数、穗粒质量和千粒质量均为正相关;粒宽、粒厚与穗长和穗粒数呈负相关,且粒厚的负作用更大;粒长与籽粒容重呈极显著负相关,较粒宽和粒厚对籽粒容重的影响更明显;粒宽与籽粒蛋白质含量、湿面筋含量、沉降值、面团稳定时间和面团形成时间呈显著或极显著负相关,较粒厚对品质的负作用更大;粒长与除容重外的其他品质特性均呈显著正相关。小麦主要库、流、源器官与产量和品质间存在较为复杂的关系,通过协调各因素间的关系,可以达到源足、库大和流畅的要求,从而实现优质高产的育种目标。
- 要燕杰高翔李晓燕吴丹陈其皎董剑赵万春陈良国石引刚
- 关键词：小麦
- 小麦HMW-GS毛细管电泳标准图谱的构建
- 2014年
- 用毛细管电泳技术对普通小麦品种Glu-1位点高分子量谷蛋白亚基变异进行分析,探讨该技术对高分子量谷蛋白亚基分离的分辨率和重复性,并构建15个不同常见亚基的标准图谱,试验结果增加1Dx3、1Dx4、1Bx13、1Bx14、1By15、1By16六个亚基的标准出峰时间并进行排序。对毛细管电泳图谱与SDS-PAGE进行比较。结果表明,毛细管电泳的出峰顺序与SDS-PAGE略有不同,使用该技术能简便迅速鉴定小麦高分子量谷蛋白优质亚基,比SDS-PAGE鉴定结果更为快捷灵敏,能够高效快速测定大量不同品种的高分子量谷蛋白亚基。
- 李艳阳李晓燕董剑陈其皎赵万春高翔李学军孟敏石引刚陈良国
- 关键词：小麦高分子量谷蛋白亚基毛细管电泳
- 小麦品质指标与面团流变学特性的相关和多元回归分析被引量：12
- 2013年
- 选取96份小麦品种(系),测定样品的品质指标和粉质拉伸特性指标。相关分析表明:千粒质量与面团稳定时间呈显著负相关,与延伸度呈极显著正相关,与其他流变学指标相关不显著;容重与面团稳定时间呈负相关,与面团形成时间呈正相关,均未达到显著标准,而与其他流变学特性指标相关不显著;蛋白质含量、湿面筋含量和沉降值品质指标与面团稳定时间、形成时间、延伸度、最大抗延阻力和拉伸面积流变学特性指标均呈极显著正相关。分别以面团稳定时间、形成时间、延伸度、最大抗延阻力、拉伸面积为因变量,以千粒质量、容重、蛋白质含量、湿面筋含量、沉降值为自变量,进行多元回归分析。回归分析表明:千粒质量与面团稳定时间达极显著负相关,与延伸度、拉伸面积达极显著正相关;容重与面团形成时间、延伸度和拉伸面积达极显著正相关;蛋白质含量与面团稳定时间、形成时间、延伸度和拉伸面积达极显著正相关;湿面筋含量与稳定时间达极显著正相关;沉降值与面团形成时间、延伸度、最大抗延阻力和拉伸面积均达极显著正相关。
- 要燕杰高翔李晓燕吴丹陈其皎董剑赵万春陈良国石引刚李学军
- 关键词：小麦品质指标流变学特性
