韩飞
- 作品数：10 被引量：32H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级科研院所科技基础性工作专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 毕赤酵母表达阿片肽发酵条件的研究被引量：3
- 2005年
- 研究了由毕赤酵母胞内两步发酵法表达活性小分子阿片肽的条件。正交实验确定最佳生长条件为:甘油24g/L、酵母膏11g/L、蛋白胨22g/L、YNB20ml/L,初始pH5.0。菌体密度可达2.46;以单因素实验确定最佳表达条件为:起始菌体浓度2.44,初始pH6.25,每10h流加0.6%甲醇(v/v),表达时间96h。阿片肽250ml摇瓶产量由196mg/L提高至496mg/L。
- 李鹂施用晖乐国伟韩飞
- 关键词：阿片肽毕赤酵母发酵条件荧光检测
- 肽转运载体的分子特征被引量：9
- 2003年
- 动物体内的肽转运载体主要有两种,PepT1和PepT2.PepT1主要是肠肽转运载体,PepT2主要是肾脏肽转运载体.肽载体的分子结构特征主要有:(1)有12个假想的穿膜区,在9区和10区之间有一大的胞外环,且所有穿膜区内的序列都高度保留,胞外环上的序列保留的很少;(2)被编码的蛋白上有多个N-糖基化和蛋白激酶的识别位点,他们可能参与肽转运的调控;(3)PepT1上的His-57和PepT2上的His-87是最关键的组氨酸残基,他们可能是转运蛋白发挥吸收功能时最关键的结合位点;(4)不同动物肽转运蛋白的氨基酸范围在707到729之间,且不同动物相同器官肽转运载体的同源性高(大约80％),同种动物不同器官肽转运载体的同源性低(大约50％).了解肽载体的分子特征和组织分布,可以更好地理解肽吸收的分子机制并有利于今后肽类药物的研发.
- 韩飞施用晖乐国伟王立宽
- 关键词：分子特征蛋白激酶组氨酸残基肽类药物
- 牛乳酪蛋白中的生物活性肽及其生理功能被引量：1
- 2005年
- 酪蛋白中蕴含着许多具有生物活性的肽片段,这些活性肽经合适的蛋白酶分解后会被释放出来。确定这些活性肽的序列和生物功能是蛋白质科学和畜牧科学的研究热点之一。本文综述了牛乳酪蛋白中潜在的生物活性肽,并对它们的主要生理功能作了阐述。
- 韩飞乐国伟施用晖刘勇
- 关键词：酪蛋白活性肽生物功能
- 饲料营养成分与瘤胃丙酸产量回归模型被引量：2
- 2005年
- 本试验根据美国康乃尔净碳水化合物和蛋白质体系(CNCPS),分析测定了4类24种饲料的营养成分,利用体外批次培养技术测定了它们在体外培养一定时间后的丙酸产量,并由此建立了饲料中产丙酸的营养成分和瘤胃丙酸产量的回归方程。
- 韩飞刘勇孙海洲卢德勋
- 关键词：畜牧学饲料营养成分
- 依赖IL-5增殖的细胞株TF-1-9E3的驯化及验证
- 2023年
- 在IL-5靶点药物的发现阶段,为评价候选药物的阻断活性,需建立依赖IL-5增殖且信噪比高、重现性好的检测用细胞株。TF-1是人白血病细胞,其生长完全依赖IL-3或GM-CSF,而IL-5与IL-3和GM-CSF共用β(βc)受体,因此,研究以GM-CSF依赖的TF-1细胞株为来源,用IL-5替换TF-1细胞生长必需的生长因子GM-CSF,降低血清含量进行细胞驯化培养传代。通过35 d的细胞驯化及3~5次降血清传代培养,采用有限稀释法分离单克隆,一共得到14个单克隆细胞株。对14株细胞进行FACS检测,其中,有9个细胞株IL-5Rα表达量升高。对IL-5Rα过表达的细胞株进行IL-5增殖检测,结果表明,相比8%FBS得到的单克隆,6%FBS得到的单克隆对IL-5刺激更敏感。通过单因素优化实验,细胞增殖检测最优的细胞接种量为2×10^(4)个/孔,FBS含量为3%,血清品牌为Gibco。驯化后的细胞TF-1-9E3对IL-5的剂量-效应曲线的信噪比为3.19,Emax区间为2.15,可用于IL-5的生物学活性检测及IL-5与IL-5Rα的抗体阻断活性检测。
- 李诗洁代维燕王雪莲柯文锋韩飞韩飞刘畅白仲虎
- 关键词：IL-5增殖
- 一种新的阿片肽对小鼠脑和小肠组织阿片受体和肽转运载体基因的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:从转录水平研究一种新的外源阿片肽 YPFPGPIRYG经胃肠道途径对小鼠脑组织和小肠组织阿片受体和肽转运载体基因的影响．方法:24只小鼠随机分为阿片肽样品组n= 12)和对照组(n=12),在饮水中分别添加浓度为8×10-7mol/L的阿片肽样品YPFPGPIRYG 和双蒸水(空白对照组),小鼠连续饮用2 wk．提取受试小鼠脑组织和小肠组织的总RNA, RT-PCR检测μ阿片受体、δ阿片受体和肽转运载体PepT1 mRNA的变化情况．结果:小鼠的脑组织中同时有μ阿片受体和δ阿片受体mRNA的表达,但阿片肽组小鼠与对照组相比,脑组织中μ阿片受体和δ阿片受体 mRNA的丰度没有变化;小鼠的小肠中同时有μ阿片受体、δ阿片受体和肽转运载体PepT1 mRNA的表达,且阿片肽组小鼠小肠中的μ阿片受体和δ阿片受体mRNA的表达与对照组相比明显上调(P<0．05),而肽转运载体PepT1 mRNA的丰度与对照组相比没有差异．结论:小鼠组织中不同阿片受体的表达存在明显的组织特异性,阿片肽YPFPGPIRYG对小鼠的生理调节不是通过与中枢神经系统上的阿片受体结合发挥作用,其可能与小肠上的δ和μ阿片受体结合发挥作用．
- 韩飞施用晖乐国伟郑建良刘勇
- 关键词：小鼠小肠组织阿片受体基因转录
- β-casomorphin-7对小鼠的免疫调节作用(英文)
- 2005年
- 目的:通过体外和体内方法研究β-casomorphin-7对小鼠脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的作用.方法:利用脾细胞增殖试验和腹腔巨噬细胞中NO浓度的变化来研究体外不同的β-casomorphin-7浓度对脾脏淋巴细胞的增殖和腹腔巨噬细胞中NO浓度变化的影响,以及腹腔注射β-casomorphin-7和饮用β-casomorphin-7溶液对上述两个指标的影响.结果:体外试验表明,β-casomorphin-7在不同浓度对脾脏淋巴细胞的增殖显示了刺激和抑制的双向作用,而对NO的产生显示了明显的抑制作用(P＜0.01).体内试验表明,β-casomorphin-7通过腹腔注射和饮用两种给药方式对脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的作用是一致的.β-casomorphin-7显著地增强了脾淋巴细胞的增殖反应(P＜0.01),且抑制了腹腔巨噬细胞NO的产生.结论:当前的试验表明,β-casomorphin-7具有免疫调节作用,且小鼠在2～3周龄时,可吸收入血发挥免疫调节作用.
- 韩飞施用晖乐国伟刘勇刘建文
- 关键词：脾脏淋巴细胞巨噬细胞增殖一氧化氮
- 肽转运载体的分子特征及其分布被引量：7
- 2003年
- 动物体内的肽转运载体目前发现的至少有五种 ,其中研究最为广泛的是PepT1和PepT2。PepT1和PepT2都是依质子的寡肽转运载体 (POT)家族的成员。PepT1是低亲和力 /高容量的肽载体 ,PepT2是高亲和力 /低容量的肽载体。PepT1主要在消化道中表达 ,在肾脏中也有微弱的表达 ;PepT2主要在肾脏中表达。这些肽载体的分子结构特征主要有 :(1)有 12个假想的穿膜区 ,在9区和 10区之间有一大的胞外环 ,且所有穿膜区内的序列都高度保守 ,胞外环上的序列保守的很少 ;(2 )被编码的蛋白上有多个N 糖基化和蛋白激酶的识别位点 ,它们可能参与肽转运的调控 ;(3)PepT1上的His 5 7和PepT2上的His 87是最关键的组氨酸残基 ,它们可能是转运蛋白发挥吸收功能时最关键的结合位点 ;(4)不同动物肽转运蛋白的氨基酸范围在 70 7到 72 9之间 ,且不同动物相同器官肽转运载体的同源性高 (大约 80 % ) ,同种动物不同器官肽转运载体的同源性低 (大约5 0 % )。了解肽载体的分子特征和组织分布 。
- 韩飞乐国伟施用晖
- 关键词：分子特征细胞膜
- 一种新阿片肽的分离纯化被引量：7
- 2005年
- 报道了一种新阿片肽OP1的分离纯化。将重组毕赤酵母经适宜的生长和表达培养后,所得的发酵液经离心得无细胞上清液,上清液经超滤后过Sephadex G-10柱。将经Sephadex G-10柱所得具有阿片活性的粗组分用HPLC-MS分析,根据阿片肽N-端均有一个酪氨酸残基,且在肽链的第三或第四位上有一个芳香族氨基酸残基这一性质,依据分子量确定活性组分中可能存在的所有阿片肽,然后根据这些阿片肽的等电点,利用AKTA Purifier 100快速纯化系统的DEAE-阴离子交换纤维素柱将其进一步分离,活性组分再用Sephasil peptide C18反相高压液相柱分离得到活性组分OP1肽,鉴定纯度后测定其氨基酸组成。最后确定该肽的一级序列为YPFPGPIRYG,该阿片肽序列目前尚未见报道。
- 韩飞施用晖刘勇陈蕴乐国伟
- 关键词：阿片肽OP残基高压液相活性组分阴离子交换纤维
- 利用体外培养法建立饲料营养成分与瘤胃丙酸产量的回归模型被引量：3
- 2004年
- 根据美国康乃尔净碳水化合物和蛋白质体系 (CNCPS) ,分析测定了 4类 2 4种饲料的营养成分 ,利用体外批次培养技术测定了它们在体外培养一定时间后的丙酸产量 。
- 韩飞刘勇孙海洲卢德勋
- 关键词：饲料营养成分
