颜令
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PKCα活性在膀胱癌BIU-87细胞增殖中的作用及其机制
- 2009年
- 目的:探讨使用蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)特异性抑制剂Safingol抑制其活性后对膀胱癌BIU-87细胞增殖能力的影响。方法:应用PKCα抑制剂Safingol、PKCδ特异性抑制剂Rottlerin和PKC激活剂PMA(phorbol-12-myristate-13-acetate)处理人膀胱癌BIU-87细胞,通过MTT法检测细胞增殖能力,RT-PCR及Western印迹法检测立早基因c-fos和c-jun mRNA和蛋白的表达,FCM检验细胞周期的改变。结果:PKCα特异性抑制剂Safingol可明显抑制人膀胱癌BIU-87细胞的增殖并呈剂量依赖性;而PKCδ特异性抑制剂Rottlerin则无此作用,但能提高BIU-87细胞的增殖能力;PKC激活剂PMA则能明显增加BIU-87细胞的增殖能力;FCM检测结果显示,抑制PKCα的活性可使细胞阻滞于G0/G1期;RT-PCR及Western印迹法检测结果表明,c-fos与c-jun的表达与PKCα的活性相关。结论:抑制PKCα活性可明显抑制膀胱癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与抑制c-fos和c-jun的表达有关。
- 颜令罗春丽吴小候张巧琳欧俐苹王春远
- 关键词：膀胱肿瘤蛋白激酶CΑ细胞增殖细胞BIU-87
- PLCε调节肾细胞癌血管生成的作用机制被引量：3
- 2011年
- 目的探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在PLCε-NF-κB信号通路中影响肿瘤血管生成的作用机制。方法将PLCε-shRNA表达质粒pGenesil-PLCε转染人肾透明细胞癌786-0细胞株,沉默磷脂酶Cε(Phos-pholipase C epsilon,PLCε)基因的表达,采用RT-PCR及Western blot检测转染细胞中PLCε、NF-κB和VEGF基因mRNA及蛋白水平表达的变化;应用NF-κB特异性抑制剂BAY11-7082处理细胞后,采用MTT法检测BAY11-7082对786-0细胞增殖的抑制作用,RT-PCR和Westernblot检测VEGF基因mRNA和蛋白水平表达的变化。结果重组质粒pGenesil-PLCε可明显抑制PLCε基因mRNA和蛋白水平的表达,抑制率分别为71.43%和50.01%,并明显下调NF-κB和VEGF基因mRNA和蛋白水平的表达;BAY11-7082可明显抑制786-0细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性;应用BAY11-7082后,VEGF基因mRNA和蛋白的表达均被明显抑制。结论 PLCε可能通过抑制NF-κB基因的表达,从而抑制NF-κB依赖性基因VEGF的表达,进而影响肾细胞癌血管生成。
- 王春远罗春丽杨淑哲潘翠翠颜令张彦懿
- 关键词：磷脂酶C基因沉默血管内皮生长因子类
- PLCε shRNA质粒构建及功能鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的构建PLCε基因的shRNA表达载体及其功能鉴定。方法设计并合成针对PLCε基因mRNA的寡核苷酸序列,插入绿色荧光蛋白质粒真核表达载体pGenesil中构建重组载体pGenesil-PLCε。重组载体经酶切、测序鉴定后转染膀胱癌细胞,RT-PCR及Western blot检测对膀胱癌细胞株PLCε的抑制作用,流式细胞术(FCM)及MTT检测其对膀胱癌细胞株增殖活力影响。结果成功构建了针对2个PLCε基因的shRNA表达载体。RT-PCR、Western blot检测结果显示:2个重组质粒载体转染T24细胞株后对PLCεmRNA及对PLCε蛋白表达均有明显抑制,流式细胞术结果表明细胞阻滞于G0/G1期,MTT检测表明重组的载体质粒明显抑制T24细胞增殖活力。结论针对PLCε基因的shRNA能有效抑制膀胱癌T24细胞中PLCε基因的表达及膀胱癌细胞增殖。
- 郭永灿罗春丽颜令欧俐苹赵懿蔡晓钟
- 关键词：膀胱癌SHRNA
- 肝细胞黏附分子诱导肾癌786-0细胞系凋亡
- 2011年
- 目的探讨肝细胞黏附分子(HEPACAM)基因转染肾癌细胞对其凋亡的影响。方法将携带HEPACAM基因的重组质粒转染786-0细胞,RT-PCR鉴定HEPACAM基因在786-0中的表达;Hoechst染色结合荧光显微镜观察细胞形态改变;FCM检测细胞周期及细胞凋亡情况;Western印迹法检测BAX、BCL-2、Cyclin D1蛋白表达变化。结果上调HEPACAM基因表达可诱导786-0细胞凋亡,阻止细胞周期于G0/G1期,并可上调BAX及下调BCL-2和Cyclin D1蛋白水平表达。结论外源导入HEPACAM基因可诱导肾癌细胞凋亡并阻止细胞周期于G0/G1期。
- 张巧琳罗春丽颜令吴小候
- 关键词：肾癌细胞周期凋亡
- shRNA干扰介导PLCε基因表达下调对膀胱癌T24细胞生长的影响
- 2009年
- 目的:探讨shRNA干扰沉默PLCε基因对人膀胱癌T24细胞生长的影响。方法:体外构建PLCε基因的shRNA的重组质粒,Lipofectamine2000介导法转染T24细胞,采用RT-PCR方法检测特异性shRNA的重组质粒对PLCε基因沉默效果,转染后采用MTT法检测shRNA的重组质粒对细胞增殖的作用,免疫细胞化学染色法检测T24细胞PCNA的表达,电镜观察细胞超微结构的改变。结果:shRNA的重组质粒能有效下调PLCε基因的表达,抑制率为78.01%,与对照组比较其差异有统计学意义(P<0.01);细胞增殖活性受到明显抑制,与对照组比较其差异有统计学意义(P<0.01);细胞内PCNA含量明显低于空白对照组和阴性质粒组,其差异有统计学意义(P<0.01);细胞形态改变产生凋亡小体。结论:PLCε基因有望成为应用RNAi技术探索治疗膀胱癌潜在的靶基因。
- 罗春丽郭永灿赵懿欧俐苹颜令朴军吴小候
- 关键词：膀胱癌RNA干扰增殖细胞核抗原
- HepaCAM对肾癌786-0细胞Caspase-3活性和表达的影响被引量：1
- 2010年
- 探讨肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)在肾癌786-0细胞中不同表达水平对其凋亡及Caspase-3活性和表达的影响。将携带hepaCAM基因的重组质粒瞬时转染786-0细胞,RT-PCR鉴定hepaCAM基因在786-0中的表达;FCM检测细胞凋亡情况;分光光度计结合Western印迹法检测hepaCAM表达与Caspase-3活性及蛋白水平表达的关系。结果显示,上调hepaCAM基因表达能诱导肾癌786-0细胞凋亡,能上调Caspase-3活性及其蛋白水平且与hepaCAM表达水平呈正相关。上述结果表达,hepaCAM可能通过调节Caspase-3凋亡通路诱导肾癌786-0细胞凋亡。
- 张巧琳罗春丽颜令
- 关键词：肾癌凋亡CASPASE-3
- PLCε-PKCα信号通路对膀胱癌增殖的调控作用
- 第一部分
目的:探讨PKC亚型PKCα、PKCδ激活对膀胱癌细胞增殖活力的影响及机制。
方法:使用PKC的特异性抑制剂/(PKCα特异性抑制剂Safingol、PKCδ特异性抑制剂Rottlrei...
- 颜令
- 关键词：SHRNA膀胱癌增殖
- 文献传递
