高云
- 作品数：27 被引量：300H指数：11
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 应用改良阻断ELISA检测禽网状内皮组织增殖病血清抗体被引量：6
- 1997年
- 应用禽网状内皮组织增殖病病毒纯化抗原和抗ＲＥＶ单克隆抗体建立了改良阻断ＥＬＩＳＡ用于鸡血清中ＲＥＶ抗体检测，并对北京地区鸡群中随机采样的３６份血清样本进行了检测，阳性率为５．６％。与间接ＥＬＳＩＡ的检测结果进行了统计学比较，两种方法的阳性率无显著差异。结果表明本试验所建立的改良阻断ＥＬＩＳＡ可以用于鸡群ＲＥＶ感染的血清学调查。
- 杨汉春高云
- 关键词：禽网状内皮组织ELISA血清抗体
- PRRS病毒核衣壳蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：18
- 2001年
- 用表达非融合蛋白的原核表达载体 p BV2 2 0 ,通过 PCR技术的引物设计对猪繁殖与呼吸综合征( PRRS)病毒 BJ-4株核衣壳蛋白 ( N)基因起始密码子上游进行了改造和修饰 ,成功地构建了含有 PRRS病毒 N基因的原核重组表达载体 p BV-N。 p BV-N转化大肠杆菌 DH5α,温度诱导后菌体裂解物经 SDS-PAGE分析发现 ,在约 1 5 0 0 0处出现 1条诱导前后的 p BV2 2 0载体对照和诱导前的 p BV-N中均缺少的特异性的蛋白条带 ,分子量大小与 PRRS病毒 N蛋白相符 ,并随着诱导时间的延长而变化 ,在诱导后 4 h达到高峰。薄层扫描结果显示 ,重组 N蛋白表达量最多可占菌体总蛋白的 2 7.4 %。 Western-blotting检测 ,此 1 5 0 0 0的蛋白带可为 PRRS病毒 N蛋白的单克隆抗体所识别 ,表明该重组
- 高云杨汉春刘平黄陈声郭鑫韩军黄芳芳
- 关键词：PRRS病毒核衣壳蛋白原核表达PBV220猪繁殖与呼吸综合征PRRS
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒北京分离株的ORF7克隆与序列分析被引量：13
- 1999年
- 将北京地区猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ） 分离株ＢＪ２ 和ＢＪ４ 的ＯＲＦ ７ 及部分３’端非编码区（ ＵＴＲ） 的ＲＴＰＣＲ 扩增产物克隆连接于ｐ ＧＥＭＴｅａｓｙ 质粒载体上，重组质粒经ＥｃｏＲ Ⅰ酶切鉴定后进行了双链测序。测定的基因序列与欧美标准毒株已知序列比较发现，ＢＪ２ 和ＢＪ４ 株与美洲ＶＲ２３３２ 株非常接近，在其长度为５５５ ｂｐ 的ｃＤＮＡ 序列中，仅与ＶＲ２３３２ 株分别相差１ 和２ 个核苷酸，其中ＯＲＦ ７ 的核苷酸序列与ＶＲ２３３２ 株同源性分别高达１００ ％ 和９９ ．４６ ％ ，其推导的氨基酸序列与ＶＲ２３３２ 株同源性分别为１００ ％ 和９９ ．２５ ％ ，３’ＵＴＲ 则完全相同；而与欧洲ＬＶ 株则有明显差异，其核苷酸序列同源性仅为６８ ．００ ％ 和６７ ．００ ％ ，推测的氨基酸序列同源性仅有６５ ．００ ％ 和６４ ．００ ％ ，且ＢＪ２ 和ＢＪ４ 株与ＬＶ 株相比缺失了ＫＫＳＴＡＰＭ 和ＡＳＱＧ 两段氨基酸序列，而３’ＵＴＲ 则比ＬＶ 株多出３８ ｎｔ 的一段特征性核苷酸序列。序列分析结果表明，ＢＪ２ 和ＢＪ４ 株属于同一基因型，且具有ＶＲ２３３２
- 高云杨汉春任慧英
- 关键词：ORF7PRRSV
- 表达PRRSVE基因重组质粒在小鼠诱导的体液免疫应答被引量：2
- 2004年
- 利用 PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) BJ- 4株的 E基因进行修饰和改造 ,在 E基因上游加入 Kozak序列 ,扩增并克隆 E基因。将 E基因 c DNA亚克隆至真核表达载体 pc DNA3.1(+)中 ,构建了真核重组表达质粒 pc DNA- E。用pc DNA- E免疫小鼠 ,经免疫荧光抗体试验检测结果表明 ,重组质粒 pc DNA- E经 3次免疫后 ,所有小鼠血清抗体均为阳性 ,说明pc DNA- E在小鼠体内可诱导特异性的体液免疫应答反应。
- 高云杨汉春刘平黄陈声郭鑫韩军黄芳芳
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒E基因重组质粒体液免疫应答
- 综合考虑灌水质量和农机作业的田块规格集成研究
- 高云
- 关键词：石羊河流域农机作业灌水质量
- 正中下怀-华北一村落生育实践与性别意识转变
- 高云
- 关键词：男孩偏好计划生育
- 猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF 7基因的扩增、克隆及序列分析
- 根据猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)美洲型参考毒株ATCC VR-2332株ORF 7部分3'端非编码区(UTR)基因序列,设计合成了一对美洲型毒株特异性引物,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术成功地从6...
- 高云
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒基因型序列测定与分析
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染抑制猪瘟疫苗的免疫应答被引量：60
- 2001年
- 对 2 0日龄 SPF猪和 2 0日龄猪繁殖与呼吸综合征 ( PRRS)血清阳性猪 ,人工感染猪繁殖与呼吸综合征病毒 ( PRRSV)北京分离株 ( BJ-4 )后 4 8h接种猪瘟疫苗 ,利用 ELISA方法检测仔猪针对 PRRSV和猪瘟疫苗的体液免疫 ,利用 MTS法检测仔猪外周血单核细胞对有丝分裂原 Con A的刺激反应。结果表明 ,不论是SPF仔猪还是带有 PRRSV抗体的仔猪 ,在鼻内接种 PRRSV后 4 8h接种猪瘟疫苗 ,其对猪瘟疫苗的抗体反应显著低于对照组 ,对有丝分裂原 Con A的刺激反应也下降。由此说明 。
- 李华杨汉春黄芳芳刘平黄高云陈艳红
- 关键词：繁殖呼吸综合征病毒猪瘟疫苗免疫抑制
- 用反转录-聚合酶链反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究被引量：17
- 1999年
- 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）美洲型标准毒株（ＡＴＣＣＶＲ－２３３２）的ＯＲＦ６及部分ＯＲＦ７的序列，设计合成了一对引物２６３７４ＰＳ／２６３７５ＰＲ，用反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术对６株ＰＲＲＳＶ北京分离株进行了检测。结果该引物对６株病毒均能扩增出与预期大小相符的ＲＴＰＣＲ产物，并与ＡＴＣＣＶＲ２３３２株扩增产物的大小相当，而欧洲型标准毒株（ＬＶ株）未获扩增片段。进一步用限制性内切酶进行酶切分析，发现这６株病毒及ＡＴＣＣＶＲ－２３３２的ＰＣＲ产物皆出现相同的限制性酶切图谱，证实６株病毒均为ＰＲＲＳＶ。
- 任慧英杨汉春高云陈艳红
- 关键词：限制性酶切图谱PRRSVRT-PCR
- PRRSV感染SPF仔猪血液中细胞因子和一氧化氮的动态被引量：5
- 2001年
- 利用生物学和免疫学方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) BJ- 4株感染仔猪血清中 TNF-α的变化 ,结果显示 ,感染后 TNF- α水平明显上升 ,外周血单核细胞产生 Th1型细胞因子 IL- 2的能力增强。比色法检测仔猪感染后血浆中 NO的变化 ,发现 NO在病毒感染后略有增高。TNF- α升高可能使内皮细胞受到损伤 ,导致机体对其他病原体的易感性增强。 NO可反馈性地抑制巨噬细胞的功能和 T细胞增殖 ,使
- 李华杨汉春郑洁王彬刘平黄黄芳芳高云
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞因子TNF-ΑIL-2
