黄文胜
- 作品数：4 被引量：58H指数：3
- 供职机构：中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 葡萄卷叶伴随病毒ⅢCP基因在E.coli中的表达被引量：3
- 2001年
- 将葡萄卷叶伴随病毒 的 CP基因克隆到表达载体 p ET- 30 a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1,筛选得到阳性克隆 GB- 1,用 IPTG诱导使其表达。SDS- PAGE电泳分析表明 ,该 CP基因在大肠杆菌 BL2 1中得到大量表达。用该病毒的 CP抗血清通过间接 EL
- 赵冬兰朱水芳张满良张成良黄文胜
- 关键词：CP基因基因表达基因克隆
- RT-PCR检测李坏死环斑病毒的研究
- ＜正＞ 为了从植物组织中快速检测李坏死坏斑病毒（Prunus necrotic ringspot virus, PNRSV）,根据该病毒RNA 3序列设计引物,对感病和健康组织总RNA进行RT—PCR,结果从感病组织中扩...
- 孔宝华陈海如常胜军朱水芳黄文胜刘进元
- 文献传递
- RT-PCR检测李坏死环斑病毒的研究被引量：39
- 2000年
- 为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒 (PNRSV) ,根据该病毒RNA 3序列设计引物 ,对感病和健康组织总RNA进行RT PCR ,结果从感病组织中扩增出了大约 45 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。将此PCR产物连接到 pGEM T easy载体 ,转化大肠杆菌DH5 5α菌株 ,得到了含有目的片段的重组子 ,并采用双脱氧终止法进行序列分析 ,结果与美国报道的李坏死环斑病毒RNA3序列对应部分核苷酸基本一致 (其同源性达 93.6 %) ,这表明应用RT PCR来检测李坏死环斑病毒是可行的 ;PCR产物克隆作为RT PCR反应的阳性对照解决了检疫对象不能扩散的问题 ,从而建立了RT
- 孔宝华陈海如常胜军朱水芳黄文胜刘进元
- 关键词：李坏死环斑病毒RT-PCR
- 间接免疫荧光显微术检测泡桐丛枝病原MLO的研究被引量：16
- 1996年
- 以感染类菌原体ＭＬＯ的泡桐组培苗为病原繁殖材料，采用差速离心和Ｐｅｒｃｏｌｌ不连续密度梯度离心来提纯ＭＬＯ作为免疫抗原制备兔抗血清。抗血清经健康汁液吸收后，作为第一抗体，用异硫代氰酸荧光素ＦＩＦＣ标记的羊抗兔免疫球蛋白作为第二抗体，进行间接免疫荧光显微镜检查染病组织中的ＭＬＯ特异性荧光。经与ＤＡＰＩ染色技术比较，找出了适宜的徒手切片和减少非特异性反应的途径。此技术具有灵敏度高、特异性强和测定简便等特点。适用于ＭＬＯ组织定位、组培苗脱毒效果评估、病原株系鉴定和病害检疫等。
- 田国忠张锡津朱水方张成良罗飞黄文胜
- 关键词：泡桐间接免疫荧光显微术
