黄杰
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所更多>>
- 发文基金：福建省卫生厅医学创新课题福建省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脂联素基因的克隆构建及其序列分析
- 2009年
- 背景:脂联素已经成为缺血性疾病基因治疗的新靶点,而成功进行脂联素基因治疗的关键是脂联素基因的克隆。基因克隆主要有定向克隆法和T-A克隆法,定向克隆法操作较复杂;而T-A克隆法操作简便,成功率高。目的:应用T-A克隆法克隆人脂联素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对。设计、时间及地点:基因水平的验证实验,于2006-06/2008-12在福建医科大学附属第一医院高血压研究所及福建中医学院中西医结合研究院完成。材料:脂肪组织取自福建医科大学第一附属医院外科患者术中切除的大网膜脂肪垫,液氮中冻存。Trizol为Invitrogen公司产品;M-MLV,Ge lExtract Kit为PROMEGA公司产品;Taq酶为TIANGEN公司产品;限制性内切酶BamHⅠ,SalⅠ,pMD18-T载体为TAKARA公司产品。方法:从人大网膜脂肪组织提取总RNA,经反转录-聚合酶链反应扩增出人脂联素编码区基因,再将人脂联素基因编码区克隆入载体pMD18-T中,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对。主要观察指标:人脂联素克隆质粒酶切鉴定结果,人脂联素基因克隆序列与GenBank比对结果。结果:扩增得到人脂联素基因编码区,获得人脂联素的正向和反向克隆,与GenBank中人脂联素基因编码区序列比对均为完全一致。结论:成功地克隆出人脂联素基因编码区。
- 谢良地黄杰
- 关键词：脂联素克隆反转录聚合酶链反应
- 代谢综合征与脑卒中被引量：6
- 2007年
- 代谢综合征（MS）患者是具有多重心脑血管病危险因素的高风险病人。MS与脑卒中密切相关，是独立于传统心脑血管危险因子之外的脑卒中危险因子。MS患者脑卒中风险和死亡率分别是无MS的3倍和5～6倍。胰岛素抵抗可能是联系MS与脑卒中的共同桥梁。控制体质量、调整情绪是预防MS的重要措施，综合治疗是防治MS脑卒中的基本原则，包括降糖、调脂、降压、减肥、抗血小板等。
- 黄杰谢良地
- 关键词：代谢综合征脑卒中心脑血管病胰岛素抵抗
- 人脂肪组织基质血管组分的分离培养被引量：6
- 2008年
- 庄伟谢良地黄杰许昌声
- 关键词：脂肪组织细胞外基质细胞
- 人脂联素基因慢病毒载体在293 T细胞中的表达及意义被引量：3
- 2008年
- 目的构建携带人脂联素(human apM1,hapM1)基因的慢病毒载体,并观察其在293 T细胞中的表达及意义。方法将hapM1的编码区(CDS区)从克隆载体上亚克隆到慢病毒载体上,构建重组慢病毒载体质粒。在脂质体介导下与包装质粒HELPER、包膜质粒VSVG共转染293 T细胞包装生产慢病毒。慢病毒感染293 T细胞后,RT-PCR和Westernblot法检测在293 T细胞中hapM1基因的表达。采用抑制血管平滑肌细胞增殖实验,检测表达产物的生物学活性。结果hapM1基因经测序后与GenBank报道序列完全一致。重组慢病毒载体质粒PNL-hapM1-IRES2-EGFP经鉴定正确。三质粒共转染293 T细胞成功,收集、浓缩病毒后测定其滴度为2.0×105TU·L-1。感染293 T细胞后RT-PCR、Western blot检测hapM1组细胞有hapM1蛋白表达,其余两组(Mock-293 T组、293 T组)均无表达。表达产物hapM1蛋白能够抑制血管平滑肌细胞的增殖。结论成功构建带有hapM1基因慢病毒载体,并且能够在293 T细胞中表达具有生物学活性的hapM1蛋白。
- 黄杰谢良地
- 关键词：脂联素慢病毒载体T细胞血管平滑肌细胞
