任丛莉 作品数:11 被引量:20 H指数:3 供职机构: 第二军医大学 更多>> 发文基金: 上海市科学技术发展基金 国家重点基础研究发展计划 上海市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
大鼠后三里针刺前后细胞外基质的差异性基因表达 被引量:5 2007年 目的:探讨穴位区针刺前后细胞外基质的差异性基因表达及其在针刺信号转导中的作用机制。方法:SD大鼠10只,分针刺组和针刺对照组2组,手法针刺大鼠“后三里”30 min,立即取材;针刺对照组也取左侧后三里相应区域的组织。所取组织经RNA提取及纯化后,采用Agilent大鼠cDNA芯片比较2组大鼠细胞外基质的差异性基因表达,对差异性表达的基因进一步采用实时定量PCR法验证。结果:大鼠后三里区针刺前后细胞外基质具有差异性表达的基因有4条,针刺前后的整合素无差异性基因表达。结论:针刺前后穴位区细胞外基质存在部分差异性表达基因,细胞外基质在针刺始动中的具体作用途径及机制还有待进一步研究。 张志英 党瑞山 张传森 李亮 任丛莉 陈尔瑜关键词:针刺 后三里 细胞外基质 骨髓神经组织定向干细胞的分离培养鉴定 被引量:4 2007年 目的:为临床中枢神经系统疾患的细胞移植及组织工程修复周围神经提供一种应用广泛、可来源于自体、无免疫排斥和伦理道德等问题的移植用种子细胞。方法:采用DMEM/F12(1∶1)无血清神经干细胞培养液,通过先贴壁、后悬浮的方法从大鼠骨髓中分离、培养单克隆生长的神经组织定向干细胞(neural tissue-committed stem cells,NTC-SCs),通过免疫细胞化学检测NTCSCs细胞球CXCR4和Nestin蛋白,以及细胞球自然分化后神经元β-TublinⅢ、MAP2ab以及神经胶质细胞CNPase、GFAP等蛋白的表达。结果:NTCSCs细胞球表达神经干细胞标志蛋白Nestin和组织定向干细胞标志蛋白CXCR4;NTCSCs细胞球在含15%胎牛血清的DMEM培养液中可自然分化,免疫荧光显示神经元和神经胶质蛋白β-TublinⅢ、MAP2ab、CNPase、GFAP等标志物阳性。结论:本研究提供了一种操作简便、成本低廉的NTCSCs的分离培养方法,NTCSCs作为种子细胞为脑、脊髓等神经系统疾患和创伤的修复和治疗提供了广阔的应用前景。 任丛莉 张志英 李亮 张传森 党瑞山关键词:骨髓 细胞分离 细胞培养技术 穴位区细胞外基质在针刺始动中的作用 被引量:3 2006年 目的探讨穴位区细胞外基质在针刺信号转导中的作用机制。方法SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为4组,每组10只,以大鼠热辐射甩尾实验的温度变化为观察指标。实验组大鼠“后三里”区注射人工合成的五肽甘氨酰-精氨酰-甘氨酰-天冬酰-酪氨酸GRGDY(G ly-Arg-G ly-Asp-Tyr)30 m in后再针刺,以大鼠基础痛阈组、“后三里”区注射0.9%NaC l组及针刺后三里组为对照。结果GRGDY注射后30 m in再针刺,大鼠甩尾的温度与针刺组相比未见明显改变。结论GRGDY未能阻断针刺效应,针刺效应的初始机制可能与细胞外基质与整合素特异性的结合位点RGD无关。 张志英 党瑞山 金建华 黄轩 任丛莉 李亮 陈尔瑜关键词:后三里 RGD 细胞外基质 整合素 一种骨髓神经组织定向干细胞的培养方法 本发明涉及生物组织工程技术领域,是一种制备神经修复移植用种子细胞——骨髓神经组织定向干细胞的培养方法。本发明只需少量骨髓,分离到骨髓单核细胞后经增殖培养,再用含2%B27、1%N2、20ng/ml bFGF、20ng/m... 张志英 张传森 任丛莉文献传递 一种骨髓神经组织定向干细胞的培养方法 本发明涉及生物组织工程技术领域,是一种制备神经修复移植用种子细胞——骨髓神经组织定向干细胞的培养方法。本发明只需少量骨髓,分离到骨髓单核细胞后经增殖培养,再用含2%B27、1%N2、20ng/ml bFGF、20ng/m... 张志英 张传森 任丛莉文献传递 骨髓中一类新细胞群——神经组织定向干细胞的确立(英文) 被引量:1 2008年 背景:骨髓间充质干细胞和造血干细胞具有分化为神经类细胞的潜能己得到共识。另有研究者认为骨髓中除骨髓间充质干细胞和造血干细胞以外,还寄居着CXCR4阳性的组织定向干细胞,包括骨骼肌、心、肝及神经组织定向干细胞。目的:实验拟进一步证实神经组织定向干细胞寄居于骨髓,并寻求确立神经组织定向干细胞分离、培养的新方法。设计:开放性实验。单位:解放军第二军医大学解剖学教研室。材料:所用成年清洁级SD大鼠由解放军第二军医大学动物中心提供。DMEM/F12,B27,N2均购自Invitrogen公司;bFGF源于CytoLab Ltd;EGF源于Invitrogen公司;Nestin、CXCR4,β-Tublin Ⅲ,神经胶质纤维酸性蛋白等一抗为Santa Cruz公司兔抗鼠多克隆抗体;MAP2ab(Clonell—5B),CNPase(Clone AP20)为NeoMarkers公司小鼠抗大鼠单克隆抗体;荧光(FITC,Cy3)标记试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;免疫组化试剂盒购自Vector Laboratories公司。NycoPrep^TM分离液(1.077A)购自Axis-Shield公司。方法:实验于2004-01/2006-12在解放军第二军医大学组织工程研究所完成。取SD大鼠双侧股骨及胫骨,冲洗骨髓腔,经NycoPrep^TM分离液分离单核细胞层,DMEM/F12(1:1)无血清神经干细胞培养液(内含2%B27,1%N2,20μg/L碱性成纤维细胞生长因子,20μg/L表皮生长因子,1×10^5U/L青霉素,100mg/L链霉素),通过先贴壁、后悬浮的方法从骨髓中分离、培养单克隆生长的神经组织定向干细胞。主要观察指标:通过免疫细胞化学法检测神经组织定向干细胞细胞球CXCR4和nesfin蛋白,以及细胞球自然分化后神经元以及神经胶质细胞的标志蛋白。结果:①神经组织定向干细胞细胞球表达神经干细胞标志蛋白nesfin和组织定向干细胞标志蛋白CXCR4。②神经组织定向干细胞细胞球在含15%胎牛血清的DMEM培养液� 张志英 任丛莉 张传森 李亮 党瑞山 孔征东关键词:骨髓 细胞培养 细胞移植 骨髓基质干细胞移植在脊髓损伤中的应用 被引量:3 2007年 李亮 张志英 任丛莉关键词:骨髓基质干细胞 干细胞移植 脊髓损伤 神经干细胞 胚胎干细胞 骨髓神经组织定向干细胞性组织工程化神经的构建 被引量:1 2009年 目的:为临床周围神经损伤的移植治疗提供生物化的神经移植替代物。方法:将骨髓神经组织定向干细胞(NTC-SCs)种植于犬坐骨神经脱细胞神经支架,构建组织工程化神经,桥接缺损的大鼠坐骨神经,检测所构建生物化组织工程神经中骨髓NTCSCs的增殖、分化及神经性基因表达,观察该神经移植到体内后的细胞增殖、分化及对神经缺损功能的修复。结果:由骨髓NTCSCs和异种脱细胞神经支架构建的生物化组织工程神经物理性状相似于神经移植体,骨髓NTCSCs在支架上增殖、迁移,并表达神经性基因及蛋白。该组织工程神经植入体内后,骨髓NTCSCs分化为少量神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞及大量S-100阳性细胞,并可修复缺损的坐骨神经功能。结论:骨髓NTCSCs和异种脱细胞神经支架构建的生物化组织工程神经相似于神经移植体,可应用于周围神经损伤修复中。 任丛莉 张志英 刘芳 张传森 李亮关键词:神经缺损 坐骨神经 骨髓神经组织定向干细胞性组织工程化神经移植修复坐骨神经损伤 被引量:2 2008年 目的:为临床周围神经损伤的组织工程化神经替代治疗提供可靠的实验依据。方法:采用体外成功构建的骨髓神经组织定向干细胞(NTCSCs)组织工程化神经,桥接缺损10mm的大鼠坐骨神经。通过术后行为学、神经功能指数分析(SFI)、神经电生理功能检查和HRP逆行追踪,以及对移植至支架的标记细胞在体内的存活、增殖及分化的形态学观察,综合评价损伤神经的功能恢复情况。结果:(1)SFI及神经电生理功能检查显示,NTCSCs组织工程化神经移植能明显促进神经传导功能及运动功能的恢复。(2)HRP逆行追踪结果显示NTCSCs组织工程化神经移植能明显促进神经纤维再生。(3)免疫荧光双标结果显示移植到体内的NTCSCs,从4周到12周,其细胞数显著增加,体内的NTCSCs细胞能分化成少量NSE阳性细胞,但大部分分化成S-100阳性细胞。结论:该骨髓神经组织定向干细胞性组织工程化神经能够有效的促进损伤坐骨神经的功能恢复。 任丛莉 张志英 张传森 刘芳 孙瑜 李瑞 张喜 李亮关键词:组织工程化神经 神经损伤 坐骨神经 骨髓神经组织定向干细胞性组织工程化神经的实验研究 目前,周围神经损伤缺乏理想的治疗方法,利用组织工程化神经进行替代治疗为该类疾病带来了希望,但是目前周围神经组织工程领域在种子细胞、支架材料和构建方法上都存在着不足。本研究从骨髓中分离并纯化了神经组织定向干细胞,并对其进行... 任丛莉关键词:细胞移植 种子细胞 周围神经损伤 文献传递