佘应龙
- 作品数：46 被引量：32H指数：4
- 供职机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技攻关计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 鸟苷酸结合蛋白5在制备抗病毒药物中的应用
- 本发明公开了人源蛋白鸟苷酸结合蛋白(GBP5)蛋白的抗病毒作用。本发明证实流感病人临床样本血液及咽拭子中高表达GBP5，且流感病毒感染上调GBP5在A549细胞和PBMC中的表达；用过表达质粒pCMV‑GBP5瞬时转染人...
- 朱应冯暕佘应龙
- 丙型肝炎病毒包膜蛋白E1在小鼠和家兔中免疫应答研究被引量：4
- 2002年
- 探讨丙型肝炎病毒包膜蛋白E1作为丙肝候选疫苗的可行性 用大肠杆菌表达的非糖基化HCV(丙型肝炎病毒 )E1包涵体蛋白免疫小鼠和家兔 ,分析该包涵体蛋白在小鼠和家兔中所引起的免疫应答及其安全性 该E1蛋白具有良好的免疫原性 ,能诱导小鼠和家兔产生针对E1的特异性体液免疫应答 小鼠CD+ 8T细胞数量在免疫后有明显升高 免疫小鼠未见明显的毒副作用 推测HCVE1这种包涵体结构可能有利于E1抗原的呈递 ,而HCVE1蛋白的糖基化并不是其免疫原性所必须的 .
- 徐进平叶林柏孟小林佘应龙吴正辉
- 关键词：丙型肝炎病毒丙肝疫苗小鼠家兔免疫应答免疫原性
- 不同复性条件对重组人组织纤溶酶原激活剂复性的影响被引量：2
- 2008年
- 大肠杆菌生产菌株诱导表达产生的无活性重组人组织纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen acti-vator,tPA)包涵体蛋白,溶解于尿素中变性后进行复性.通过单因子试验和正交试验考察了不同复性条件下透析复性对tPA包涵体蛋白复性效率的影响.结果表明蛋白质浓度、复性温度、pH值、复性介质、还原剂浓度对tPA的复性效果都有不同程度的影响,当0.5 g/L tPA包涵体蛋白溶解于pH 9.5的7 mol/L的尿素,加入5 mmol/Lβ-巯基乙醇,在20℃、pH 8.0的双蒸水条件下复性时,可以取得最高的复性效率(2.0×107IU/g).通过对稀释复性、透析复性和凝胶过滤层析复性3种方法比较,建立了适宜工业化生产tPA的复性方法.
- 吴正辉郜金荣佘应龙叶力叶林柏
- 关键词：包涵体复性正交试验
- 毕赤酵母表达的HBV全长Pres蛋白的分离纯化被引量：2
- 2005年
- 巴斯德毕赤酵母工程菌株GS115PreS经发酵在甲醇诱导下可高效表达分泌型全长PreS蛋白。Westernblot证明发酵液中存在着可溶性的分子量为48kD的PreS蛋白和蛋白质颗粒,蛋白质颗粒主要成分为48kD的全长Pres蛋白和28kD的S蛋白,电镜观察发现蛋白质颗粒直径为30nm。发酵液经过脱盐、浓缩处理后,上清液经DEAESFF阴离子交换柱得到纯化的PreS蛋白;超速离心和蔗糖密度梯度离心得到蛋白颗粒。该颗粒的主要组分为全长PreS蛋白(PreS1+PreS2+S),还有少量的主蛋白(S)。ELISA检测证明全长PreS蛋白和蛋白颗粒有着良好的抗原性,PN显示蛋白颗粒的抗原性比PreS蛋白的抗原性高。
- 韩雪叶林柏李宝宗佘应龙叶力郑竑高博郜金荣吴正辉
- 关键词：发酵分离纯化免疫原性
- 纤维连接蛋白抑制剂-四肽RGDS在制备抗EV71病毒药物的用途
- 本发明公开了一种纤维连接蛋白（FN）抑制剂‑四肽RGDS的抗EV71病毒作用。本发明证实使用FN抑制剂RGDS处理人横纹肌肉瘤细胞可以抑制EV71病毒的感染，进一步的研究表明FN抑制剂‑四肽RGDS是通过阻断病毒入侵到细...
- 朱应任盛佘应龙
- 文献传递
- HBV X基因的表达及在真核细胞中对内质网压力的作用被引量：1
- 2006年
- 运用PCR技术获得HBx基因,分别克隆到原核表达载体pET-his和真核表达载体pcDNA3.1(-)上。重组质粒pET-his-HBx转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达,利用Ni柱纯化后的蛋白免疫家兔,获得特异性的抗-HBx兔抗血清。重组质粒pcDNA3.1(-)-HBx分别转染HepG2和Hep3B细胞系后,经RT-PCR和Westernblot检测,证明HBx可以在这两种细胞系中表达。通过报告基因的表达研究了HBx对XBP1和GRP78启动子的激活活性,结果表明瞬时转染HBx的细胞系中,XBP1和GRP78启动子介导的荧光素酶活性比相应的对照细胞增加了3～7倍。通过RT-PCR分析证明,转染了HBx的细胞中XBP1mRNA发生了剪切。因此,可以初步推断HBx在HepG2和Hep3B细胞中的表达可以引起内质网压力反应,为进一步阐明HBx表达对内质网的影响和肝脏病原发生机制奠定了基础。
- 高博李宝宗韩涛叶林柏王薇曾莹春孔令保郑竑韩雪吴正辉佘应龙叶力
- 关键词：乙型肝炎病毒HBX蛋白
- TT病毒ORF_2在Cos7细胞中的表达及蛋白质定位
- 2004年
- 应用PCR方法从含有TTVirusORF2的质粒pET-His-TTV2中扩增出606bp的蛋白质编码区,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1中以表达成GFP-VP2融合蛋白。构建出的重组质粒pEGFPTTV2经过酶切分析和PCR鉴定。用脂质体介导法将pEGFPTTV2质粒DNA转染Cos7细胞,通过RT-PCR分析,证实细胞中存在ORF2基因的转录产物。用共聚焦显微镜结合PI染色技术研究TTVVP2蛋白在细胞中的分布情况。结果表明,TTVVP2分布在细胞质中和细胞核膜内侧。因此推测VP2作为一种非结构蛋白,功能可能是参与病毒DNA的复制或转录。
- 何燕叶林柏李礼廖庆姣特马力佘应龙叶力吴正辉
- 关键词：GFPVP2蛋白质定位
- 输血传播病毒(TTV)SANBAN分离株ORF2蛋白对NF-κB信号途径抑制的研究
- NF-κB信号途径对免疫反应有十分重要的作用,本研究着重针对 TTV (SANBAN 分离株)的 ORF2蛋白,研究其在 NF-κB信号途径中的作用。首先我们通过 Luciferase 实验发现,无论在 HeLa、Hep...
- 郑弦叶林柏曾莹春蔡维嘉赵鹏张毅娟朱生力宿丽娅吴正辉佘应龙
- 文献传递
- HCV核心蛋白诱导Cos-7细胞凋亡被引量：3
- 2003年
- 将丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(Core)基因的全长序列插入到真核表达载体pCDNA3 CMV启动子下游,构建真核表达载体pCDNA3-Core,用脂质体LipoVec^(TM)转染Cos-7细胞系进行瞬时表达;DNA转染24h后用免疫斑点试验检测在细胞中表达的Core蛋白;转染72h后用Hoechst染色和DNA Ladder检测Cos-7细胞的凋亡情况;荧光染色观察到了细胞凋亡核碎裂,琼脂糖凝胶电泳也呈现出180-200bp整数倍的梯形带,呈现典型的细胞凋亡特征。这些结果表明HCV Core蛋白的表达能引起Cos-7细胞凋亡,Core蛋白的这种功能可能在HCV的持续感染过程中起着一定的作用。
- 佘应龙叶林柏廖庆姣叶力郭泰林杨晓骏
- 关键词：HCV核心蛋白细胞凋亡丙型肝炎病毒
- 携带幽门螺杆菌的重组流感病毒、宿主细胞及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种携带幽门螺杆菌的重组流感病毒、宿主细胞及其制备方法与应用。本发明由幽门螺杆菌抗原或抗原优势表位整合入流感病毒基因组NS片段中组成的重组流感病毒。本发明的携带幽门螺杆菌的重组流感病毒可以在宿主细胞或鸡胚中稳...
- 朱应聂龙宇佘应龙刘实
- 文献传递
