冯海娇
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:广西省自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MMS2在血管紧张素Ⅱ诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化过程中的作用
- 目的:建立有效的脂质体瞬时转染法,转染小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),沉默大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)内甲基磺酸敏感蛋白2(Methyl Me...
- 冯海娇
- 关键词:神经干细胞多巴胺能神经元血管紧张素IIRNA干扰
- 文献传递
- 瞬时转染siRNA抑制大鼠神经干细胞内MMS2基因的表达被引量:1
- 2011年
- 目的建立有效的脂质体瞬时转染法,转染小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),沉默大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)内甲基磺酸敏感蛋白2(Methyl Methanesulfonate Sensitive 2,MMS2)的表达。方法设计并化学合成针对MMS2基因的3对siRNA分子序列,采用阳离子脂质体法瞬时转染NSCs,运用实时荧光定量PCR检测NSCs内MMS2基因mRNA的表达。结果 MMS2-siRNA对大鼠NSCs内MMS2基因的沉默效果在转染后36 h达到最大抑制作用;3对特异性MMS2-siRNA序列均有效地抑制了MMS2基因的表达,沉默效率分别为siRNA_A(58±5)%、siRNA_B(64±6)%、siRNA_C(84±3)%,与空白对照组相比均存在显著性差异(P<0.05);siRNA_C沉默效率最高。结论靶向MMS2基因的siRNA分子片段可以有效地抑制NSCs内MMS2基因的表达,为后续相关研究提供实验方法。
- 冯海娇沈岳飞罗小丹罗彦妮
- 关键词:RNA干扰神经干细胞阳离子脂质体
- MMS2在血管紧张素II诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化过程中的作用被引量:1
- 2011年
- 目的探讨甲基磺酸敏感蛋白2(MMS2)在血管紧张素II(AII)诱导神经干细胞(NSCs)向多巴胺(DA)能神经元定向分化过程中的作用。方法体外分离培养新生鼠大脑来源的NSCs,通过巢蛋白免疫细胞化学方法对神经前体细胞进行鉴定;在此基础上,将第2代的NSCs按实验设计分成6组:A:对照组;B:All组;C:ATl受体拮抗剂ZD7155组;D:ATI受体拮抗剂ZD7155+AII组;E:AT2受体拮抗剂PD123319组;F:AT2受体拮抗剂PD123319+AII组。通过实时荧光定量PCR检测各组细胞MMS2及THmRNA的表达;转染MMS2基因的小干扰RNA(siRNA)片段到NSCs上沉默MMS2在NSCs的表达,再按以上分组将其诱导分化为DA能神经元,通过实时荧光定量PCR方法检测转染后诱导分化的各组细胞THmRNA的表达。结果体外分离培养的NSCs,在培养基中呈悬浮生长,神经球表达Nestin。实时荧光定量PCR法检测B组、D组细胞的MMS2及THmRNA的表达高于对照组,其差异有统计学意义(P〈0.05);C、E、F组细胞的MMS2及THmRNA的表达与对照组比较无统计学意义(P〉0.05),转染MMS2-siRNA后诱导分化的各组细胞间THmRNA的表达无统计学意义(P〉0.05)。结论AII通过AT2受体使MMS2在NSCs的表达升高并诱导NSCs向DA能神经元分化,MMS2在AII诱导NSCs向DA能神经元定向分化的过程中可能发挥重要作用。
- 沈岳飞冯海娇罗小丹张维雄罗彦妮范瑞芳
- 关键词:神经干细胞分化多巴胺能神经元血管紧张素II