刘健华
- 作品数：84 被引量：512H指数：13
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 鸡源肠杆菌质粒介导喹诺酮类耐药基因检测被引量：11
- 2009年
- 【目的】对广东地区分离得到的鸡源肠杆菌进行质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因检测。【方法】采用纸片扩散法对84株鸡源肠杆菌临床分离株进行27种抗菌药物的敏感性测定。通过PCR检测质PMQR基因qnr、qepA和aac(6′)-Ib-cr。研究PMQR基因阳性菌株染色体gyrA、gyrB、parC、parE基因喹诺酮耐药决定突变区(QRDRs)的变异情况。【结果】84株鸡源肠杆菌对兽医临床常用的恩诺沙星、氟罗沙星、氨苄西林、复方新诺明、强力霉素以及利福平、链霉素、罗红霉素的耐药率很高,且为多重耐药;对氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、多粘菌素E和头孢氨苄的敏感性高。在84株鸡源肠杆菌中检测到1株同时携带qnrB和aac(6′)-Ib-cr基因的肺炎克雷伯氏杆菌GDK05,整个qnrB基因的阅读框架与GenBankTM中的qnrB6一致,同时GDK05在gyrA基因的QRDR出现83位S→I变异,gyrB、parC、parE基因的QRDRs没有检测到变异。【结论】广东地区集约化养殖场鸡源肠杆菌对兽医临床常用抗菌药物耐药严重。本研究首次在兽医临床上检测到1株同时携带qnrB6和aac(6′)-Ib-cr基因的鸡源肺炎克雷伯氏菌。PMQR机制的出现预示着喹诺酮类耐药很可能会在兽医临床上更加快速而广泛地传播。
- 岳磊蒋红霞刘健华廖晓萍李树娟陈雪影吴彩霞张小云刘雅红
- 关键词：肠杆菌质粒喹诺酮耐药
- 动物源大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究
- 受试菌株:从兽医临床分离的592株动物源性大肠杆菌中筛选出头孢唑啉耐药菌50株, 样品分离自广州、番禺、珠海等地的17个不同养殖场,来源动物为猪、鸡、鸭、鹅和鹧鸪。试验方法:测定了受试菌株对12种β-内酰胺类约物和13种...
- 魏述永陈杖榴刘健华曾振灵吕殿红
- 文献传递
- 低浓度恩诺沙星对离体恒化器模型中人体肠道菌群的影响被引量：2
- 2009年
- 【目的】应用离体恒化器模型评价低浓度恩诺沙星对人体肠道菌群的影响,为制定微生物学日允许摄入量(ADI)提供依据。【方法】四套接种人体肠道菌群的离体恒化器模型中连续添加0、0.2、2及20mg·L-1恩诺沙星8d,采用细菌培养计数和PCR-DGGE方法研究细菌数量、耐药性、菌群结构和定植抗力的变化。【结果】2及20mg·L-1恩诺沙星可抑制肠道总厌氧菌、总需氧菌和兼性厌氧菌、大肠杆菌、肠球菌的生长(P<0.05或P<0.01);0.2、2及20mg·L-1恩诺沙星均使总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌耐药百分率增加(P<0.05或P<0.01),停药7d后,总需氧和兼性厌氧菌、大肠杆菌耐药百分率呈下降趋势,但与对照组相比仍处于较高水平(P<0.01)。20mg·L-1恩诺沙星对肠道菌群结构的影响较大,使PCR-DGGE图谱发生明显变化,条带数、菌群多态性和相似性参数降低(P<0.05或P<0.01);2和20mg·L-1恩诺沙星可使肠道菌群对外源沙门氏菌的定植抗力明显下降。【结论】0.2mg·L-1恩诺沙星(相当于3.67μg·kg-1体重)可对离体恒化器模型中的人体肠道菌群耐药性产生显著影响,说明中国现行规定的恩诺沙星和环丙沙星的ADI(6.2μg·kg-1体重)可能会对人体肠道菌群产生影响,主要为选择出耐药需氧和兼性厌氧菌。
- 秦玉玲赵静静黄显会高延玲陈杖榴曾振灵刘健华
- 关键词：恩诺沙星安全评价
- CTX-M-1/9/1杂合酶活性位点远端的残基增强其催化活性
- 杂合酶CTX-M-64、CTX-M-123和CTX-M-132的氨基酸序列两端与CTX-M-1群的序列匹配,中间与CTX-M-9群的序列匹配.分析编码这些杂合酶的基因及其所在质粒发现,它们可能是由全球最流行的ESBLs基...
- 贺丹丹曾振灵刘健华
- 广东地区猪源大肠杆菌耐药性及其系统发育群的研究被引量：26
- 2014年
- 为分析广东地区猪源大肠杆菌耐药性及其系统进化背景,试验于2011年从患病猪分离出264株大肠杆菌,包括粪便源131株和肝源133株,采用琼脂稀释法测定18种抗菌药物的敏感性,多重PCR法确定系统进化关系,并对不同来源菌株的耐药性和系统进化背景进行分析比较。结果发现,大肠杆菌多重耐药现象严重,共存在128种耐药谱型。分离菌株对氨苄西林、复方新诺明、萘啶酸和四环素高度耐药,对黏菌素、头孢他啶和阿米卡星较敏感。种群进化分析结果表明,分离菌株主要分布在共生型的A组和B1组(91.66%),且不同来源菌株的种群进化分布差异不显著(P>0.05)。结合药敏试验结果发现,不同进化组别的分离菌株对特定抗菌药物的耐药性存在显著差异(P<0.05)。通过对大肠杆菌耐药性及其系统发育群进行综合分析,为兽医临床用药提供依据。
- 郭潇木杨铜贺丹丹饶丽丽刘健华曾振灵
- 关键词：大肠杆菌耐药性系统进化分析
- 有机农场鸡、猪源大肠杆菌耐药性研究被引量：12
- 2015年
- 为了解有机养殖模式下鸡、猪源大肠杆菌的耐药情况,2014年从广东从化某有机农场鸡、猪粪便中采集并分离出118株大肠杆菌,包括55株鸡源大肠杆菌和63株猪源大肠杆菌,采用琼脂稀释法测定大肠杆菌对18种抗菌药的敏感性。结果发现,同一有机农场中,鸡源大肠杆菌与猪源大肠杆菌在耐药种类及耐药率上均呈现相似规律,对头孢他啶、头孢喹肟、头孢噻肟、头孢西丁、阿米卡星、安普霉素、庆大霉素、新霉素、氟苯尼考、氯霉素、亚胺培南、环丙沙星、喹乙醇等较敏感（鸡0~21.8%,猪0~14.3%）,对氨苄西林、链霉素呈现轻度耐药（鸡29.1%~38.2%,猪23.8%~27.0%）,对复方新诺明、四环素、多西环素呈现较严重耐药（鸡45.5%、76.4%和72.7%,猪50.8%、81.0%和68.3%）。鸡源大肠杆菌中3耐及3耐以上的菌株占56.4%,猪源大肠杆菌占47.6%。结果表明有机养殖模式下鸡、猪源大肠杆菌耐药率相对较低,多重耐药现象存在但相对轻微,对个别临床常用抗菌药耐药率虽较严重但比常规养殖场低。由于目前国内大部分学者致力于研究常规养殖方式下细菌耐药情况,本研究很好地填补了有机养殖模式下畜禽大肠杆菌耐药性研究的空白。
- 植婵萍郭小婷姚旭郭泽文伍盛鋆易灵娴程帮照王骏俊刘健华
- 关键词：大肠杆菌耐药性多重耐药
- 食品动物源产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的流行状况调查被引量：13
- 2011年
- 本研究旨在了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌和CTX-M型耐药基因在食品动物的流行状况。对分离自养殖场的1273株大肠杆菌(健康动物源755株,患病动物源518株),采用双纸片协同试验筛选ESBLs阳性菌,并通过PCR法和基因测序鉴定阳性菌CTX-M型的基因型。1273株食品动物源大肠杆菌中筛选出产ESBLs阳性菌181株,阳性率为14.2%,其中患病动物阳性率比健康动物高,分别为19.9%和10.3%。151株(83.4%)产ESBLs大肠杆菌中检测到CTX-M型基因,占所有食品动物源大肠杆菌的11.8%,其中以CTX-M-9G为主,阳性率为79.5%(120/151),远高于CTX-M-1G的携带率25.8%(39/151),其中8株同时携带了CTX-M-1G和CTX-M-9G。产ESBLs的大肠杆菌在食品源动物中流行普遍,CTX-M是产ESBLs阳性菌中的主要流行基因型。
- 郑红青邓玉婷何良英杨铜姚琼芬田伟刘健华
- 关键词：食品动物大肠杆菌ESBLS
- 人体肠道菌群的离体恒化器模型的建立
- 连续培养技术可以用来建立体外模型以模拟正常菌群的生态系统;DGGE为进行肠道微生态研究的可靠分子生物学工具,可用于反映菌群结构的变化。本研究旨在我国率先建立人肠道菌群连续流动培养模型(离体恒化器模型),并用DGGE监测人...
- 高延玲陈杖榴刘健华曾振灵
- 文献传递
- 16S rRNA甲基化酶rmtB在猪肠道菌中的传播方式分析
- 2010年
- 为研究16S rRNA甲基化酶rmtB在猪肠道菌中的传播方式,用脉冲场凝胶电泳（PFGE）分别对来源于A、B猪场的48株rmtB阳性大肠埃希氏菌进行基因分型;用膜接合试验研究rmtB基因的水平传播方式;用微量稀释法对rmtB阳性菌及其接合子进行药敏试验。有45株rmtB阳性大肠埃希氏菌（45/48）能进行PFGE分型,可分为28种不同的PFGE基因型。其中来源于A猪场的20株菌可分为12种基因型,来源于B猪场的25株菌可分为16种基因型;46株rmtB阳性菌可以通过接合试验将rmtB基因及其介导的耐药性传递给受体菌E.coliC600和E.coli488 Rifr,接合频率从4.6×10-13-3.0×10-6不等,接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素6种二脱氧链霉胺类抗生素均高度耐药（MIC≥512μg/mL）。结果表明,rmtB基因位于接合性质粒上,该基因在两猪场的大肠埃希氏菌中既存在克隆传播,又存在水平传播,以水平传播为主。
- 陈琳张俊丰刘健华陈杖榴曾振灵
- 关键词：质粒
- 猪阴沟肠杆菌16SrRNA甲基化酶耐药基因分析被引量：6
- 2011年
- 【目的】分析猪阴沟肠杆菌GZL41B中4种质粒介导的16SrRNA甲基化酶耐药基因及其水平传播方式;【方法】采用PCR及序列分析方法检测鉴定猪阴沟肠杆菌中16SrRNA甲基化酶耐药基因。以大肠杆菌E.coli Rif+488(耐利福平)为受体菌进行接合试验研究16SrRNA甲基化酶耐药基因的水平传播方式。用微量稀释法测定原菌株及其接合子对18种抗菌药物的敏感性。用PCR及序列测定法分析比较来自同一猪腹泻直肠拭子阴沟肠杆菌GZL41B和大肠杆菌GZL41H的侧翼序列并对172株动物源大肠杆菌中16SrRNA甲基化酶耐药基因流行情况进行调查。【结果】从阴沟杆菌中成功扩增出目的片段,该片段经限制性内切酶HindⅢ酶切后,出现与预期的531 bp和194 bp相符的两段片段,序列测定结果证实该基因为rmtB,GenBank登录号为EF017943。以E.coli Rif+488(耐利福平)为受体菌,成功地获得了接合子,该接合子经鉴定为大肠杆菌。原菌株和接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素等4,6-二脱氧链霉胺类高度耐药,其MIC均≥256μg.mL-1。大肠杆菌GZL41H中,rmtB的上游为Tn3转座子的部分序列,下游为肠炎沙门氏菌基因岛SGI1上融合酶编码基因groEL/intI1的部分序列orf1,而来源相同的阴沟肠杆菌GZL41B未扩增到与大肠杆菌GZL41H相同的侧翼序列。172株动物源大肠杆菌中,25株菌(15%)检出rmtB,1株菌(0.6%)检出armA;【结论】16SrRNA甲基化酶耐药基因rmtB首次出现在猪阴沟肠杆菌中,该基因介导猪阴沟肠杆菌对4,6-二脱氧链霉胺类氨基糖苷抗生素的高度耐药,并能通过接合方式在不同种属细菌间进行传播。rmtB在阴沟肠杆菌和大肠杆菌中传播的遗传背景存在差异。动物源大肠杆菌中rmtB广泛流行。
- 陈琳刘健华张俊丰陈杖榴曾振灵魏冬霞黄东璋
- 关键词：阴沟肠杆菌16SRRNA甲基化酶耐药
