刘建生
- 作品数：61 被引量：99H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)诱导小鼠体液及细胞免疫应答被引量：1
- 2005年
- 目的评估甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗的免疫学效果。方法用甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)分别经腹腔免疫BALBc小鼠后,用ELISA法检测血清中抗HAVIgG、TNFα、IFNγ和IL2;用流式细胞仪对全血中T细胞亚群分类;3HTdR掺入法检测T淋巴细胞增殖。结果减毒活疫苗组在初免后诱导的体液和细胞免疫水平均低于灭活疫苗组,加强免疫后,与灭活疫苗相当。灭活疫苗组IFNγ的峰值出现时间较减毒活疫苗组晚,但水平较高。结论两种疫苗均可诱导体液和细胞免疫应答,减毒活疫苗进行加强免疫后可诱导更好的系统免疫应答。
- 徐冬蕾刘建生孟明耀庞伟马进王萍王晓辉陈统球侯宗柳
- 关键词：减毒活疫苗细胞免疫应答灭活疫苗体液肝炎甲型淋巴细胞增殖
- 人埃可病毒20型KM／EV20／2010分离株的全基因组序列分析
- 2015年
- 目的对人埃可病毒20型（EcH020）KM／EV20／2010分离株全基因组进行序列测定，并分析其分子变异和进化特点。方法设计针对KM／EV20／2010引物，提取病毒RNA，RT-PCR扩增和序列测定获得全基因序列。利用Mega4．1、RDP3和SimPlot3．5．1软件分析全基因序列。结果KM／EV20／2010病毒株基因组全长7395bp个核苷酸（nt），5’端和3’端分别为744nt和96nt的非编码区，5’和3’非编码区间为一个6549rlt长的开放阅读框，编码一个含2183个氨基酸的多聚蛋白，编码区内未见核苷酸的插入或缺失。与GenBank中现有唯-1株ECH020JVl-1原型株全基因组序列相比对，核苷酸同源性为80．1％，氨基酸同源性为96．7％；构建基于全长VP1基因序列的进化树图并进行基因分型分析，ECH020可分为6个基因型，中国分离株分属Ⅲ和Ⅳ基因型，其中KM／EV20／2010属于基因型Ⅳ，且6个基因型之间核苷酸的差异为9．4％-21．7％。基于全基因组序列的种系进化分析提示KM／EV20／2010分离株与ECH020原型株JV-1遗传距离很远，未与原型株JV-1聚簇分布，而与ECH030病毒株遗传距离较近。分析发现KM／EV20／2010序列在非结构区可能存在重组。结论中国ECH020可分为6个基因型，KM／EV20／2010分离株属于Ⅳ基因型。
- 潘玥邵聪文王晓辉朱艳菊陈俊英陈伟马绍辉刘建生
- 关键词：埃可病毒全基因组
- 甲型肝炎病毒(HAV)感染普通狨猴的病理学观察被引量：2
- 1999年
- 观察使用ＨＡＶ疫苗株和野毒株感染普通狨猴后引起的病理变化，并对病变作分级描述。结果显示，疫苗株感染的狨猴未见异常。
- 罗其胜王庆玲黄小琴刘建生曹逸云董德祥
- 关键词：HAV狨猴病理学
- 猴血SV40抗体和SV40 DNA携带关系分析
- 2003年
- 目的 检测 5 7份恒河猴血清及对应的猴血中抗SV4 0抗体、SV4 0DNA的携带情况 ,找出抗体滴度与DNA携带的相关关系。方法 用间接免疫荧光法检测猴血中SV4 0中和抗体 ,聚合酶链反应 (PCR)法检测SV4 0st抗原DNA的携带情况。结果 5 7份猴血清中 ,SV4 0抗体阳性率为 93% (5 3 5 7) ,抗体滴度最高为 1∶12 80 ,最低为 1∶10 ,GMT为 15 9.5 6 ,PCR检测猴血淋巴细胞SV4 0DNA阳性率为 2 4 .5 6 % (14 5 7) ,当抗体为 1 80以下时 ,病毒整合于血细胞 ,1∶80以上时 ,对st抗原基因的整合有抑制作用。结论 恒河猴SV4
- 刘馨刘建生徐冬蕾崔萍芳王庆龄侯宗柳
- 关键词：SV40抗体DNA聚合酶链反应荧光抗体技术肿瘤病毒
- 甲型肝炎灭活疫苗
- 本发明提供一种甲型肝炎灭活疫苗及其制备方法，将经过培养传代的甲肝病毒—吕8快株，先用胰酶消化收毒，缩小病毒体积，为储存及下一步工序提供一个容易控制的体积；再通过核酸酶消化，将细胞中的核酸消化成小分子，有效避免了核酸－甲型...
- 陈统球褚嘉祐侯宗柳刘建生邵聪文阳选祥
- 文献传递
- 阿司匹林诱导EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡被引量：1
- 2017年
- 目的探讨阿司匹林诱导EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡及其机制。方法 EB病毒转化的人B淋巴细胞经一定浓度的阿司匹林处理后,首先通过MTT法分析细胞的增殖情况;然后用光学显微镜和电子显微镜、PI染色和流式细胞术分析以及琼脂糖凝胶电泳等方法对细胞凋亡进行评价;最后,通过免疫印记法检测凋亡相关蛋白、mTOR信号通路和PU.1-Bim信号通路蛋白表达情况。结果阿司匹林能抑制EB病毒转化的人B淋巴细胞增殖。形态学和超微结构观察发现,阿司匹林处理的细胞固缩变小、数目减少、细胞核畸形、染色质边缘化和细胞质空泡化。阿司匹林处理导致细胞膜通透性增加、细胞存活率明显下降和细胞DNA的弥散现象。免疫印迹分析显示,阿司匹林处理抑制了细胞的mTOR信号和转录因子PU.1的表达水平,激活了细胞凋亡相关蛋白caspase-3、PARP和Bim。结论阿司匹林可能通过抑制EB病毒转化的人B淋巴细胞增殖和诱导细胞凋亡表现一定的抗淋巴瘤效应,mTOR信号途径和PU.1-Bim轴可能参与了阿司匹林抗肿瘤作用机制。
- 陶玉芬刘波李超李昕潼刘建生杨昭庆刘红旗
- 关键词：阿司匹林凋亡MTOR
- 猴源GII．17型诺如病毒基因组P结构域及其变体的原核表达、纯化和抗原性鉴定被引量：3
- 2016年
- 目的 表达、纯化和鉴定猴源GII.17型诺如病毒（NoV）基因组P结构域及其变体蛋白.方法 基于本实验室获得的猴源GII.17型NoV基因组P结构域的核苷酸序列,按大肠杆菌密码子使用的偏好性优化P结构域的核苷酸序列,人工合成相应的基因.以此基因为模板,通过PCR方法扩增得到P结构域的变体基因.采用无缝连接的方法将P结构域基因及其变体克隆到原核表达载体,进行蛋白诱导表达和纯化.最后,通过免疫印迹法和ELISA法分析表达蛋白的抗原性.结果 测序结果表明,P结构域及其变体成功地克隆至原核表达载体.SDS-PAGE分析显示,P结构域在原核细胞的超声裂解上清和沉淀中都有表达,而其变体主要表达于上清.免疫印迹和ELISA结果显示,表达纯化得到的P结构域及其变体蛋白具有很好的抗原性.表达的蛋白免疫小鼠制备的相应抗体ELSIA效价可达到1∶32000.结论 成功地表达了猴源GII.17 NoV基因组P结构域及其变体蛋白,并且通过免疫小鼠得到了相应的抗体,为后期检测试剂盒的研发、病毒鉴定和病毒受体结合实验奠定了基础.
- 刘波李超陶玉芬李昕潼刘建生和占龙刘红旗
- 关键词：抗原性
- SARS-CoV-2 S1-NTD蛋白在制备新冠肺炎的检测试剂中的应用
- 本发明属于血清学检测技术领域，具体涉及SARS‑CoV‑2S1‑NTD蛋白在制备新冠肺炎的检测试剂中的应用。本发明以SARS‑CoV‑2S1‑NTD蛋白为包被抗原对新冠肺炎进行检测，其灵敏度和特异性显著高于以SARS‑C...
- 刘红旗徐婧雯鲁帅尧丁开云禹文海陈泓宇杨云刘建生
- 恒河猴SV40检测方法的建立及病毒基因和血清分析
- 侯宗柳刘建生刘馨任丽虹李琦涵
- 由于脊髓灰质炎减毒活疫苗的使用，使我国消灭了脊髓灰质炎，而恒河猴肾组织是脊髓灰质炎减毒活疫苗生产的细胞基质，故恒河猴的质量对生产用细胞影响较大。由于恒河猴是SV40的易感宿主，尤其是在群体笼养的条件下，猴群间可相互传播，...
- 关键词：
- 关键词：恒河猴病毒基因
- 猴源GII.17型诺如病毒P结构域及其变体的目的蛋白
- 本发明公开猴源GII.17型诺如病毒P结构域及其变体的目的蛋白，按照大肠杆菌密码子使用的偏好性来设计VP1基因对应的核苷酸序列，通过人工方法合成相应的核苷酸序列，通过PCR得到其P结构域基因P‑RGD及变体基因P△R，然...
- 刘红旗刘波李超陶玉芬刘建生李昕潼
