刘淼
- 作品数：10 被引量：19H指数：3
- 供职机构：中国海洋大学水产学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划教育部重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 饥饿对金鱼卵巢型和脑型芳香化酶基因表达的影响研究
- 2011年
- 采用RT-PCR技术,研究了金鱼性腺型芳香化酶基因(CYP19A)和脑型芳香化酶基因(CYP19B)的表达对饥饿胁迫的响应机制.研究结果表明:正常投喂的雌性金鱼中CYP19A基因mRNA在卵巢、肝脏、肾脏、肌肉、鳃、头肾、脾脏、脑、肠和心脏10个组织均有表达,表达量呈现递减趋势;饥饿胁迫后,CYP19A基因mRNA在脑和卵巢中表达的变化规律基本一致,即饥饿5d时表达量显著降低(P<0.05),随后表达水平维持稳定.正常投喂的雌性金鱼CYP19B基因mRNA在脑、头肾、性腺、脾、肌肉和心脏6个组织中表达呈现递减趋势;CYP19B基因mRNA在脑和卵巢中的表达量,在饥饿5d时表达量显著降低(P<0.05),随后表达水平维持稳定.这些结果说明,雌性金鱼在饥饿条件下,性激素合成关键酶基因在脑和卵巢中的表达量显著降低,可能影响卵巢发育。
- 温海深王宇龙姜龙李吉方何峰刘淼
- 关键词：金鱼饥饿胁迫
- 半滑舌鳎Vasa基因cDNA克隆及其在繁殖周期的表达被引量：7
- 2012年
- 通过简并引物和RACE技术分离得到了半滑舌鳎Vasa基因的cDNA序列,其全长为2 602 bp,编码包含722个氨基酸残基的蛋白质。半滑舌鳎Vasa在N末端含有5个RGG重复和10个RG重复,具备DEAD-box家族特有的8个保守基序,与东方蓝旗鲔的同源性最高(91%)。利用RT-PCR技术研究了csVasa在性成熟半滑舌鳎中的表达模式。组织分布研究发现,Vasa在半滑舌鳎的卵巢和精巢中表达丰富,心脏中有微量表达;繁殖周期中,卵巢中Vasa的表达量在初级卵黄期和囊泡期要明显高于核周期和退化吸收期;精巢中,Vasa在精子细胞增殖期的表达量要显著高于精子成熟期和精母细胞增殖期。结果表明,Vasa可能在半滑舌鳎的配子发生中起重要作用。
- 张远青温海深何峰李吉方史丹胡健刘淼母伟杰马瑞芹
- 关键词：半滑舌鳎VASAMRNA表达繁殖周期
- 黄颡鱼促黄体激素受体基因克隆及在雌鱼繁殖周期中的表达被引量：1
- 2011年
- 通过简并引物扩增及SmartTM Race技术,首次克隆了黄颡鱼促黄体激素受体(LHR)基因cDNA全长序列。该基因全长2 524 bp,编码701aa,含有属于糖蛋白激素受体(GpHR)家族的典型跨膜螺旋结构区域(TM helix)。9个富含亮氨酸的重复性序列(LRRs);4个潜在的N-端糖基化位点:29NFTC,82NVSR,203NGSR,548NLTV;24个Ser,6个Thr和5个Tyr磷酸化位点。同时400S为潜在的PKC位点。通过RT-PCR分析组织表达,卵巢繁殖周期中卵巢和脑的表达水平并结合血浆中E2含量的变化,发现LHR在卵巢中大量表达,其次是脑、肾脏、心脏、肝脏和肠存在少量或微量的表达;在卵巢繁殖周期中,卵巢LHR表达从Ⅲ期-Ⅴ期处于较高水平,Ⅴ期达到最高峰,随后下降到最低值;而脑的表达高峰出现在Ⅳ期,与血浆中E2变化相一致。推测卵巢和脑中LHR基因参与卵黄的生成,调控卵母细胞的成熟和排卵。
- 刘淼温海深何峰李吉方马瑞芹胡健母伟杰张远青祁保霞
- 关键词：黄颡鱼基因克隆
- 雄性黄颡鱼芳香化酶基因mRNA在性成熟期组织中表达分析被引量：3
- 2011年
- 在水温分别为20(常温对照组)、25、30℃条件下,采用RT-PCR方法,研究性腺成熟期雄性黄颡鱼组织中P450芳香化酶(P450aromA和P450aromB)的mRNA表达水平,同时测定性腺成熟系数(GSI)、肝重指数(HSI)、肥满度(CF)和血浆睾酮(T),雌二醇(E2)含量。结果表明,P450aromA在性腺发育成熟期雄性黄颡鱼心脏、肝、脾、胃、肾脏、精巢、鳃、脑、头肾、肠管组织中均无表达,P450aromB只在脑和肠中有表达,在脑中表达量高于肠,表达量随着水温升高而显著下降;各组实验鱼血浆T和E2含量与芳香化酶基因表达量存在相关关系。该实验结果表明,P450aromA可能与精子发生相关,可能不参与黄颡鱼精子排放过程;P450aromB在雄鱼脑中高度表达,可能参与性腺成熟期精子活力保持与排放过程,且应激温度越高,对性腺成熟期精子活力保持与排放过程影响越大。
- 温海深刘淼祁保霞何峰李吉方史丹马瑞芹胡建母伟杰张远青
- 关键词：黄颡鱼P450AROM睾酮
- 大菱鲆2种类胰岛素样生长因子结合蛋白基因克隆及在成鱼和早期发育期中的表达被引量：4
- 2012年
- 类胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)在调节IGF的生物学功能上起着重要的作用,利用简并引物扩增及RACE克隆技术,首次克隆得到大菱鲆IGFBP-1,-2基因cDNA全长序列。两个基因氨基酸序列都分为保守的N端和C端以及高度特异的L区域3个部分,其中N端和C端共包含18个半胱氨酸残基,N端存在一段保守的(GCGCCXXC)结构,C端存在一段保守的(CWCV)结构,这些结构在与IGF相互作用以及调节与IGF结合的亲和性和稳定性起重要作用。组织表达分析表明,igfbp-1主要在肝脏及脾中大量表达,在其他组织中表达量较少,igfbp-2除在肌肉中没有检测到表达外,在其他组织中均有表达,其中肝脏脑、心、肾、肠中表达量较高。广泛的组织表达模式表明IGFBP是通过自分泌和旁分泌来调节IGF的功能。对于胚胎发育期表达分析表明,ig-fbp-1在整个发育期均检测到表达,igfbp-2在胚体期开始有表达,结果表明igfbp-1和igfbp-2在胚胎发育过程中的细胞生长以及组织器官分化都起着重要的生理学作用。
- 胡健温海深关健官曙光何峰李吉方史丹马瑞芹刘淼母伟杰张远青
- 关键词：大菱鲆基因克隆MRNA表达
- Sox9基因在黄颡鱼卵巢发育周期的表达及对热应激的响应被引量：3
- 2012年
- 采用半定量PCR的方法,分别从时空表达、温度应激调控和血清雌二醇(Estradiol-17β,E2)水平3个方面,共同研究雌性黄颡鱼Sox9基因的功能。结果表明,Sox9a1基因在雌性黄颡鱼各组织中存在广泛的表达,而Sox9a2则在脑和卵巢中有高表达(脑>卵巢),胃中表达微弱。在卵巢年周期发育中,卵巢中Sox9a1在Ⅲ期时达到高峰,Sox9a2则在Ⅴ期时达到峰值;脑中Sox9a1和Sox9a2表达的最大值均在Ⅱ期,后随着卵巢的发育表达水平显著下降。在热应激调控试验中,卵巢中Sox9a1虽然对热应激存在响应,但并没有出现E2相一致的变化趋势,而Sox9a2的变化趋势与血浆中E2相同。虽然脑中Sox9a1和Sox9a2在卵巢年周期发育的表达变化出现下降的趋势,但在热应激条件下,脑中Sox9a1和Sox9a2在Ⅱ期与E2的变化相反,而Ⅲ期到Ⅵ期与E2的变化相一致。该实验结果表明,卵巢中Sox9a1可能不参与卵巢的年周期发育,Sox9a2则参与卵巢发育的调控和E2的合成;在脑中,我们推测热应激可能改变了Sox9与雌激素的负调控关系,但其机理需要更深入的研究。
- 刘淼温海深何峰李吉方胡建张远青马瑞芹母伟杰祁保霞
- 关键词：SOX9雌二醇热应激
- 鲇鱼和黄颡鱼繁殖生理及其调控
- 鲇鱼(Silurus asotus)又称本地鲇鱼、土鲇，与南方大口鲇和怀头鲇相比，它地域分布广泛，个体较小，生长较慢，但肉质优良，既可以作为经济鱼类养殖，也可以作为杂交鲇制种的亲本。本文主要研究了鲇鱼生殖生理与苗种繁育、...
- Wen Haishen温海深Liu Miao刘淼
- 关键词：鲇鱼黄颡鱼繁殖性能代谢调控
- 黄颡鱼促卵泡激素受体基因的克隆及其在雌鱼生殖周期中的表达
- 2012年
- 为研究黄颡鱼促卵泡激素受体(FSHR)基因的克隆以及该基因在卵巢发育周期中的表达情况,实验首先采用SmartTMRace技术,获得了黄颡鱼促卵泡激素受体基因cDNA全长序列,该基因全长2 340 bp,编码661aa,具有G蛋白偶联受体超家族(G protein-coupled receptor,GPCR)的7个跨膜螺旋区(transmembrane domain)。经分析发现,得到的FSHR基因序列具有9个富含亮氨酸的重复性序列(LRRs);5个潜在的N-端糖基化位点;蛋白激酶C(proteinkinase C,PKC)磷酸化位点(403Y)位于第一个包外环,C-末端(C-terminal domain)G蛋白偶联区域,存在3个蛋白激酶C磷酸化位点(634S,643S,632T)。这些区域可能与FSHR的功能有密切关系。RT-PCR发现,FSHR基因在卵巢和脑中大量表达,在其他组织中均存在少量或微量的表达;在繁殖周期中,卵巢FSHR基因表达从Ⅲ期～Ⅳ期处于较高水平,在Ⅵ期时下降。研究推测,卵巢中FSHR基因参与黄颡鱼卵母细胞成熟及卵黄蛋白的积累过程。
- 刘淼温海深何峰李吉方
- 关键词：黄颡鱼基因克隆
- 黄颡黄生殖相关基因的克隆、表达及对温度的响应
- 本论文以雌性黄颡鱼为研究对象,运用组织学、内分泌学方法和分子生物学方法,克隆了与其生殖相关的促性腺激素受体、P450c17I、芳香化酶和Sox9基因,并对时空表达和热应激响应进行了研究和分析。 1促性腺激素受体基因克隆...
- 刘淼
- 关键词：黄颡鱼基因克隆
- 黄颡鱼生殖相关基因的克隆、表达及对温度的响应
- 本论文以雌性黄颡鱼为研究对象，运用组织学、内分泌学方法和分子生物学方法，克隆了与其生殖相关的促性腺激素受体、P450c17I、芳香化酶和Sox9基因，并对时空表达和热应激响应进行了研究和分析。 1促性腺激素受体基因克隆与...
- 刘淼
- 关键词：黄颡鱼芳香化酶
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