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刘炳玉: 作品数：71 被引量：209H指数：9; 供职机构：军事医学科学院国家生物医学分析中心更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生理学生物学化学工程更多>>

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质谱新方法与解析新技术及其在病原微生物蛋白质组研究中的应用: ＜正＞此研究项目的主要成果:①应用"准内标法"提高了PMF准确度和蛋白质鉴定的可靠性;②建立"序列对接法"改善了LC-MS/MS的鉴定效率和可靠性;③自建了多个特殊蛋白质数据库并将MASCOT本地化,具有创新性;④为国内...; 魏开华王杰王红霞王鸿丽刘炳玉杨松成张学敏; 文献传递

重组人纽兰格林二硫键分析被引量：1: 2008年; 目的:应用多种质谱技术确证重组人纽兰格林(rhNRGL)的一级结构及其二硫键定位。方法:(1)利用 Q—FT—MS 测定 rhNRGL 二硫键还原前后的精确相对分子质量,确定分子中二硫键数目;(2)应用 MALDI-TOF/TOF—MS 法测定 rhNRGL的 N 端序列;(3)用 ESI—MS/MS 法测定 rhNRGL 的 C 端序列;(4)通过 Trypsin 和 Glu—C2种蛋白酶进行酶解,获得肽质量指纹谱,确证其序列及定位3对二硫键。结果:(1)测定 rhNRGL 还原前后的精确相对分子质量,两者相差6.0516,确证其主成分形成了3对二硫健;(2)串联质谱法测定 rhNRGL 的 N 端序列的5个氨基酸和 C 端序列的11个氨基酸,均与理论序列一致;(3)2种酶切肽谱的序列覆盖率分别为82%和64%,分析确证主成分二硫键配对正确,但同时存在少量错配二硫键异构体。结论:以上结果表明,该样品的一级结构正确,主要二硫键模式为:1—3,2—4,5—6。多肽药物的二硫键分析常常需要多种质谱及样品制备技术联合。; 薛燕刘炳玉李萍王杰何昆王红霞魏开华; 关键词：二硫键多肽

RapiGest在蛋白质组学中的初步应用: 在基于电泳的蛋白质组学研究中,样品制备、双向电泳、图像分析、胶内酶切、质谱分析和数据库检索等步骤的效果决定了分析结果的成功率和可信度。胶内酶切的灵敏度和回收率则直接影响质谱数据质量、肽段匹配率及检索结果。银染灵敏度远高于...; 谷苗许彬刘炳玉刘锋王鸿丽魏开华; 文献传递

人肝癌细胞系HLE细胞表面抗原多肽的纳升电喷雾串联质谱从头测序分析被引量：5: 2006年; 肿瘤细胞表面的抗原多肽能够被细胞毒T淋巴细胞特异性识别而引起免疫应答,因此有可能用于研制基于多肽的抗肿瘤疫苗.用弱酸将人肝癌细胞系HLE 细胞表面抗原多肽和人正常肝细胞表面多肽洗脱后,经RP-HPLC分离,选择HLE细胞表面特异性多肽进行纳升电喷雾串联质谱（nanoESI-MS/MS）测序,共测定5个色谱峰中的20个多肽序列,分子量分布范围为1000～2000 Da.借助MasSeq软件分析出其中12个多肽的序列.经数据库查寻,其中的3个肽段分别来自钙调节蛋白、核蛋白S19和伴侣蛋白10.这些多肽的生物学功能及与肿瘤的关系值得深入研究.该研究表明nanoESI-MS/MS是测定微量混合多肽序列的最有效方法.; 王红霞李萍何家田周迈刘炳玉杨松成张学敏; 关键词：电喷雾串联质谱从头测序

电磁辐射致海马损伤的比较蛋白质组学研究被引量：10: 2006年; 目的研究三种不同频率电磁波辐照后海马组织蛋白质表达谱的差异。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)—质谱鉴定—生物信息学分析的比较蛋白质组学方法研究辐照后6 h海马组织总蛋白的差异,通过W estern blot和RT-PCR技术分别在蛋白和基因水平对差异蛋白质进一步检测验证。结果三种电磁辐射致海马蛋白质表达谱的变化基本相似。经图像分析共筛选到45个差异蛋白点,其中26个差异蛋白点得到了初步鉴定。对于信号转导相关差异蛋白raf激酶抑制蛋白(RKIP),W estern blot和RT-PCR进一步验证了2-DE结果。辐照后6 h RKIP蛋白及其mRNA表达均明显下调,各照射组未见明显差异。结论三种电磁辐射对海马的致伤机制具有相似性,其损伤程度呈频率依赖性。RKIP可能在辐射致海马损伤中发挥重要作用。; 左红艳王德文陈娟魏开华王水明彭瑞云高亚兵胡文华王鸿丽刘炳玉; 关键词：电磁辐射海马蛋白质组 RKIP

氨基酸与钠离子非共价键相互作用的电喷雾质谱研究: 实验研究中常常观察到钠离子与一些多肽或蛋白质有较强的非共价键结合能力,这种非共价键相互作用可能与生物的一些功能和活性有关。为了进一步了解这一结合作用,我们应用电喷雾质谱研究了常见的20种氨基酸与钠离子在溶液中的非共价键相...; 吴胜明杨松成王杰王鸿丽刘炳玉李爱玲何昆魏开华张学敏; 文献传递

晚发型阿尔茨海默病蛋白质组学中触珠蛋白的表达被引量：1: 2009年; 目的建立晚发型阿尔茨海默病(LOAD)蛋白质组学技术体系,寻找并鉴定与LOAD发生有关的生物标记物。方法选择8例经病理证实为LOAD患者的颞叶脑皮质为LOAD组,另选择5例尸体解剖为正常老年人颞叶脑皮质为对照组。分别采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,用图像分析软件进行比较分析、确定差异蛋白质点。将选取的差异蛋白质点进行胶内酶切,采用基质辅助激光解析-电离-飞行时间质谱及电喷雾电离串联质谱法进行质谱分析;搜索数据库鉴定蛋白质。结果分别获得两组脑组织双向电泳蛋白质组表达图谱,筛选并鉴定出表达有明显差异的蛋白质点11个,其中蛋白质点2触珠蛋白在LOAD组有明显上调。结论筛选并鉴定表达有明显差异的蛋白质点11个,可能成为具有临床诊断意义的LOAD潜在标记物,从而为阿尔茨海默病的早期诊断和治疗提供理论和实验依据。; 陈现红王鲁宁王鸿丽刘炳玉; 关键词：阿尔茨海默病蛋白质组学电泳凝胶

高效液相色谱法测定复方高效免疫增强胶囊中甘草酸的含量被引量：2: 1998年; 刘炳玉廖杰董方霆; 关键词：甘草酸单铵盐高效液相免疫增强液相色谱仪对照品

重组蛋白药物C末端不同长度氨基酸序列的质谱分析被引量：1: 2011年; 目的：基于本实验室已建立的溴化氰裂解蛋白质C末端方法结合优化后的质谱检测技术,对C末端长度分别为2~37个氨基酸,相对分子质量在200~5000的8个重组蛋白药物进行检测。方法：（1）针对重组蛋白药物的不同状态（SDS-PAGE、干粉或溶液）分别进行C末端胶内或溶液裂解;（2）质谱检测,正离子方式,雾化气为氮气,碰撞气体为氩气。源温80℃,锥孔电压50 V,MCP检测器电压为2.15 kV。结果：8个重组蛋白药物的C末端全部成功检测出,且基本为基峰。结论：建立的重组蛋白药物C末端测序联用方法应用于实际药物的检测具有很高的实用价值和学术意义。; 李萍赵永强薛燕刘锋刘炳玉何昆王红霞