刘立 作品数:39 被引量:102 H指数:6 供职机构: 浙江理工大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 浙江省科技厅重点资助项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 文化科学 化学工程 更多>>
晚期启动子靶向性调控溶瘤腺病毒pCN305载体及其构建方法与应用 本发明公开了一种晚期启动子靶向性调控溶瘤腺病毒pCN305载体及其构建方法与应用;该载体是在具有靶向性的pCN103载体的基础上加以构建,通过引入内部核糖体进入位点IRES和多克隆位点,利用病毒自身的晚期启动子来调控表达... 钱程 刘立 姜威 崔强 蔡荣文献传递 延胡索生物碱的提取及其抗肝肿瘤活性研究 被引量:13 2009年 分离延胡索生物碱并测定其对肝癌细胞SMMC-7721的体外细胞毒活性。以30%乙醇为溶媒利用微波法提取延胡索中生物碱类化合物,醇提物经过乙醚、NaOH萃取,大孔树脂、硅胶进一步纯化,同时用化学检识法进行定性鉴别,得到水溶性生物碱、脂溶酚性生物碱和脂溶非酚性生物碱3部分。利用MTT方法研究各部分的细胞毒活性。结果表明延胡索脂溶非酚性生物碱组分肝肿瘤细胞杀伤活性最强,对SMMC-7721的生长抑制活性最高,IC50约为35μg/mL。 桑晓媛 张磊 刘立 钱程 赵辅昆 许传莲关键词:延胡索 生物碱 SMMC-7721 细胞毒活性 PHA-767491联合IL-24基因对肝癌细胞的杀伤研究 被引量:2 2010年 利用最新发现的抗癌新药PHA-767491联合肿瘤基因治疗中最常用的杀伤基因IL-24共同处理肝癌细胞Bel-7404,采用20MOI携带IL-24基因的非复制型病毒Ad-IL-24联合不同浓度的PHA-767491对肝癌细胞Bel-7404进行治疗研究。western blot实验结果表明:PHA-767491对IL-24的表达无明显抑制作用;MTT和Ho-ceast33342染色实验表明二者联合对Bel-7404细胞表现出了较高协同杀伤作用。 李伟 张静 骆菁菁 胡徐庞 杨耿兵 王刚 娄文加 钱程 刘立关键词:IL-24 BEL-7404 稳定下调SIRT1基因表达的肝癌细胞系的构建 2011年 SIRT1(silent information regulator 1)与多种肿瘤的发病过程关系密切,但是其在肝癌中的作用尚不明确。为了研究SIRT1与肝癌的关系,通过构建慢病毒载体,病毒转染和包装,嘌呤霉素的筛选等实验方法,成功构建能稳定下调SIRT1基因表达的肝癌细胞系Hep3B和PLC/PRF/5,为后期进一步研究SIRT1在肝癌发病过程中的功能奠定了基础。 张璇 刘佳 马蕾娜 胡徐庞 刘立 钱程关键词:SIRT1 嘌呤霉素 慢病毒载体 肝癌细胞系 真核表达Hsa-miR-1基因及其检测方法的建立 被引量:1 2011年 获得Hsa-miR-1的方法主要由人工合成,需耗费很高的成本与时间。文章通过将Hsa-miR-1前体部分连接至pcDNA3.0,可实现Hsa-miR-1基因的高表达。构建含有Hsa-miR-1基因表达前体的表达载体pcDNA-Hsa-miR-1和含有与Hsa-miR-1基因完全互补序列的检测载体pEGFP-C1-CM1。通过共转染pcDNA-Hsa-miR-1和pEGFP-C1-CM1检测Hsa-miR-1基因的表达,并采用Taqman探针法定量检测Hsa-miR-1基因表达水平,成功构建了可高效表达Hsa-miR-1基因的真核生物质粒pcDNA-Hsa-miR-1,并首次建立起Hsa-miR-1基因的检测系统pEGFP-C1-CM1,该检测系统的建立将为今后Hsa-miR-1在肿瘤细胞中的研究提供准确、快捷的检测方法。 胡徐庞 李伟 曹跃芬 张璇 黄青红 徐科 杨耿兵 魏旭斌 钱程 刘立双靶向溶瘤腺病毒联合奥沙利铂对肿瘤细胞凋亡的研究 2011年 研究化疗药物奥沙利铂(Oxaliplatin)联合AdCN205-IL-24对人结肠癌细胞的体外杀伤作用。实验采用MTT法检测肿瘤特异性增殖腺病毒AdCN205-IL-24联合奥沙利铂对两种肿瘤细胞以及正常细胞增殖的抑制作用;Hoechest33342染色,在荧光显微镜对病毒联合化疗诱导的肿瘤细胞凋亡进行形态学观察。结果表明:AdCN205-IL-24联合奥沙利铂处理4 d后对结肠癌细胞株HT-29和SW620的增殖抑制率达到23.17%和22.98%,并且联合化疗并未增加对人正常细胞株L-02的毒性。 杨耿兵 何倩 黄青红 胡徐庞 刘立 钱程 骆菁菁关键词:溶瘤腺病毒 奥沙利铂 结肠癌 RNA干扰抑制COX-2的重组腺病毒的构建及体外抗肿瘤活性 2010年 环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)是肿瘤治疗中的一个重要的靶向基因。可COX-2抑制剂因易引发肝损伤的副作用,影响了COX-2抑制剂在临床上的应用。本研究构建出运载小干扰RNA的重组腺病毒试图解决上述难题。实验结果显示:癌细胞系中的COX-2成功被抑制,同时活细胞计数实验结果表明COX-2在癌细胞中的抑制能促使癌细胞生长受到抑制,而正常细胞不受到影响,证明该载体系统能有效解决COX-2抑制剂易引发肝损伤的毒副作用,为其临床应用提供了坚实的基础。 陈青 娄文加 钱程 刘立关键词:RNA干扰 环氧化酶-2 腺病毒 三靶向嵌合型溶瘤腺病毒Ad5/F11载体的构建方法及其应用 本发明公开了一种三靶向嵌合型溶瘤腺病毒Ad5/F11载体的构建方法及其应用,该载体是以双靶向溶瘤腺病毒载体pCN103和pCN205做为基础,通过将5型腺病毒Ad5的骨架与人11型腺病毒Ad11的纤维蛋白fiber进行嵌... 钱程 刘立 张磊 杨智文献传递 免疫细胞联合腺病毒Ad205-IL-15对肝癌细胞的杀伤研究 2012年 在已有腺病毒Ad205-IL-15的基础上尝试与过继免疫细胞CIK、NK92等联合开展对肝癌细胞的杀伤性研究。首次通过荧光化学发光的原理构建出携带表达萤光素酶报告基因的肝癌细胞系Huh7-Luc、MHCC97H-Luc来检测细胞的存活率。结果表明:免疫细胞联合Ad205-IL-15对Huh7-Luc、MHCC97H-Luc两株肝癌细胞表现出了较高协同杀伤作用。证明将免疫细胞与腺病毒联合可以相互弥补各自治疗的不足之处,提高了抗肿瘤效果。同时,由于操作方便,荧光素酶报告基因测定法也为检测细胞存活率提供了新的技术手段。 徐科 胡贲 苏虹 胡徐庞 刘佳 杨智 刘立 钱程 魏旭斌关键词:CIK 过继免疫 荧光素酶报告基因 小RNA家族的新成员-piRNA 被引量:6 2008年 microRNA(miRNA)和small interfering RNA(siRNA)在真核生物生命活动的基本过程中发挥着重要的调节作用。随着对siRNA和miRNA研究的不断深入,最近科学家在研究大鼠雄性精子时发现哺乳动物睾丸内存在另一种新型的小RNA分子,该分子在精子发生过程中起着重要的生理调节作用,该种小分子RNA被命名为piRNA,在功能、分布和分子特征等方面piRNA较miRNA和siRNA存在着显著的不同,对piRNA深入研究有望揭示出机体内在的基因表达调节机制。 郭艳合 刘立 蔡荣 钱程关键词:PIRNA PIWI 精子发生