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刘莉: 作品数：15 被引量：119H指数：7; 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划天津市自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程理学更多>>

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深黄被孢霉△~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及序列分析被引量：37: 2001年; γ－亚麻酸（ＧＬＡ，Ｃ１８：３△６，９，１２）是由△６－脂肪酸脱氢酶以亚油酸（ＬＡ，Ｃ１８：２△９，１２）为底物，在Ｃ６位脱氢形成的。由于在人体中，γ－亚麻酸是花生四烯酸、前列腺素类和白三烯类等生理活性物质的前体物，而深黄被孢霉是目前用于微生物发酵生产γ－亚麻酸的主要菌株。本文根据脂肪酸脱氢酶的保守区设计引物，利用反转录聚合酶链式反应从丝状真菌深黄被孢霉中克隆了编码△６－脂肪酸脱氢酶的ｃＤＮＡ，全长为１３７４个核苷酸，编码４５７个氨基酸，但与其他位点的脂肪酸脱氢酶不同的是， △６－脂肪酸脱氢酶在其序列的Ｎ端特有细胞色素ｂ５（Ｃｙｔｂ５）区。这是国际上对深黄被孢霉△６－脂肪酸脱氢酶基因的首次报道。; 李明春刘莉张丽胡国武邢来君; 关键词：深黄被孢霉 △^6-脂肪酸脱氢酶基因克隆真菌

深黄被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因烟草中的表达被引量：19: 2003年; γ 亚麻酸 (GLA)是人体和动物饮食中具有营养作用的重要的多烯不饱和脂肪酸 ,在大多数油料作物种子中不含有GLA ,而只含有其前体物亚油酸 ,只有少数油料植物种子中含有GLA ,如夜来香 (Oenotheraspp) ,琉璃苣(Boragoofficinalis)等。Δ6 脂肪酸脱氢酶可将亚油酸转化为γ 亚麻酸 ,为了能够在传统的油料作物种子中产生GLA ,我们将从深黄被孢霉中克隆的Δ6 脂肪酸脱氢酶基因 ,与植物表达载体pGA6 43连接 ,构建了重组质粒pGAMICL6 ,将其通过农杆菌介导法 ,导入模式植物烟草中。经PCR和Southern杂交分析表明该基因已导入并整合到烟草的基因组中 ,Northern杂交结果表明该基因在转基因烟草的mRNA水平上获得表达。对转基因植株进行脂肪酸分析 ,结果显示 ,GLA和十八碳四烯酸 (OTA)分别占总脂肪酸含量的 19 7%和 3 5 %。; 李明春刘莉胡国武邢来君; 关键词：烟草脂肪酸脱氢酶基因亚麻酸转基因植株深黄被孢霉

高山被孢霉ATCC16266Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达被引量：35: 2001年; Δ6 脂肪酸脱氢酶是形成γ 亚麻酸的关键酶。从含有高山被孢霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的重组质粒pT MACL6中 ,酶切出 1 4kb的目的片段 ,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体 pYES2 .0 ,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒 pYMAD6 ,用醋酸锂方法转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INCSc1中 ,在SC Ura合成培养基中 ,选择得到酿酒酵母工程株YMAD6。在合适的培养基及培养条件下 ,加入外源底物亚油酸 ,经半乳糖诱导后 ,收集菌体。通过GC MS对酵母工程株进行脂肪酸色谱分析 ,结果表明 ,产生了 31 6 %的γ 亚麻酸。这是迄今为止 ,国内外Δ6 脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中表达量最高的报道。; 刘莉李明春胡国武葛军张丽程志晖邢来君; 关键词：△^6-脂肪酸脱氢酶基因 Γ-亚麻酸酿酒酵母高山被孢霉

转基因烟草表达高山被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的研究被引量：9: 2004年; 将高山被孢霉ATCC16 2 6 6Δ6 脂肪酸脱氢酶 (D6D)基因亚克隆到植物表达载体pBI12 1中 ,构建了CaMV35S启动子驱动的植物表达载体pBMACL6。经根癌农杆菌LBA4 4 0 4的介导 ,采用叶盘法转化烟草Xanthi,得到一批转基因烟草植株。转基因植株的PCR和Southernblot分析表明 ,D6D基因已经整合到烟草基因组中。脂肪酸GC分析表明 ,与未转基因的烟草苗对照相比 ,转基因植株有D6D基因目标产物γ 亚麻酸的产生 ,说明高山被孢霉的D6D基因在烟草中得到了表达。; 李明春刘莉胡国武财音青格乐邢来君; 关键词：转基因烟草 Γ-亚麻酸油料作物

PLA、PPC和PHBV共混物的热性能、力学性能和生物降解性能研究: 不少研究者就PLA/PPC, PLA/PHB和PPC/PHBV等二元共混材料的热力学性能进行了研究。结果表明，二元共混物为部分相容的共混体系。二元共混物PLA/PPC生物降解性能不高，PLA/PHB脆性大而韧性不够，PP...; 陶剑胡丹刘莉刘娜宋存江王淑芳; 关键词：热性能力学性能生物降解性能

深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆: 深黄被孢霉(Mortirella isabellina)是毛霉目中具有重要经济价值的丝状真菌,因其产生γ亚麻酸(γ-Linolenic acid,GLA),而γ-亚麻酸作为人体必需的不饱和脂肪酸,对人体的激素调节及脂肪酸...; 邢来君李明春刘莉张丽; 文献传递

深黄被孢霉delta6-脱氢酶基因的定位、克隆和表达: 邢来君李明春胡国武金守光刘莉张丽; 1.课题来源与背景：本实验室在微生物发酵生产gama-亚麻酸的研究中，筛选到一株深黄被孢霉M6-22菌株，产油率达到菌体干重的60%，但因生产周期长，难于提高产量，拟利用分子生物学手段对其进行研究和改良菌株，于1999年...; 关键词：; 关键词：深黄被孢霉脂肪酸脱氢酶基因 Γ-亚麻酸

利用Bacillus licheniformis NK-03合成聚谷氨酸及其合成酶基因pgsBCA的克隆被引量：5: 2008年; 分离到一株能合成γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的细菌,通过16SrRNA 序列同源性分析、计算机微生物分类鉴定系统 BIOLOG-System 4.20等方法,确立该菌株为地衣芽孢杆菌,命名为 Bacillus licheniformis NK-03.该菌合成的γ-PGA 所含的 L-谷氨酸单体可高达98%,且重均分子量(M_w)为1360000.另外,利用 pXMJ19质粒将 B.licheniformis NK-03的7-PGA 合成酶基因 pgsBCA 克隆到了 Escherichia coli JM109中,使其成功表达合成了重均分子量为42 433的γ-PGA.同时,通过比较 B.licheniformis NK-03与已报道菌株 pgsBCA 基因编码氨基酸序列的同源性,发现基因簇中 pgsC 基因编码的氨基酸序列最为保守.; 金映虹刘静刘莉邓飞陶剑宋存江; 关键词：LICHENIFORMIS 立体构型

高山被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构分析及其功能的研究被引量：15: 2003年; 从高山被孢霉ATCC1 62 66总DNA中扩增出大小为 1 374bp和 1 947bp的两条特异片段 ,序列分析表明后者在细胞色素b5和组氨酸Ⅰ之间含有一大小为 5 73bp的内含子和两条分别为 1 97bp和 82 8bp的外显子。推导的氨基酸二级结构分析表明 ,该基因有两个长的跨膜疏水区和 3个组氨酸保守区。分别根据D6D内含子及组氨酸Ⅱ区、Ⅲ区的序列设计引物 ,制备不同的探针与高山被孢霉的基因组杂交 ,证明在其基因组中确实存在两个Δ6 脂肪酸脱氢酶基因 ,其中一个基因含有内含子。把不含有内含子的核基因MAGL6 1克隆到的酿酒酵母表达载体pYES2 0中 ,转化到酿酒酵母INVSc1中。对筛选得到的酵母工程菌株进行脂肪酸GC分析 ,检测到了γ 亚麻酸 ,说明克隆的D6D基因MAGL6 1能在酿酒酵母中进行功能性表达。; 李明春刘莉胡国武邢来君; 关键词：高山被孢霉 △^6-脂肪酸脱氢酶基因基因组内含子克隆