刘金香
- 作品数:48 被引量:173H指数:8
- 供职机构:西南大学柑桔研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程经济管理更多>>
- 柑桔衰退病毒分离株分子特征初步研究被引量:10
- 2005年
- 柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)广泛分布于世界各柑桔产区,迄今已经摧毁了一亿株柑桔,目前仍然严重威胁着以酸橙作砧木的柑桔产区和对茎陷点型CTV敏感的葡萄柚、柚类和某些甜橙的安全。我国广泛分布着CTV的多种强毒株,随着近年来柑桔产业结构调整的深入,茎陷点型CTV对柚类和某些甜橙的危害正变得日益严峻。国外的经验表明,弱毒株交叉保护(MSCP) 是目前防治茎陷点型CTV最有效手段。 CTV属于长线形病毒属(Closterovirus),基因组为19 296个核苷酸组成的正义单链RNA,具有 12个开放读码框(ORF),可以编码17种蛋白质, 其中25 kDa和27
- 周彦周常勇王雪峰刘科宏刘金香唐科志
- 关键词:分离株柑桔衰退病毒CTV分子特征株系分化
- 发根农杆菌介导的柑橘黄龙病抗性快速评价体系优化及应用
- 2024年
- 【目的】黄龙病(Huanglongbing,HLB)是一种毁灭性柑橘病害,主要由韧皮部杆菌属亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)侵染引起。本研究旨在探究侵染初期CLas在柑橘毛状根中的增长规律,优化发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的黄龙病抗性快速评价体系并应用于抗菌肽的抗性评价。【方法】基于植物表达载体pGNGM1300,通过发根农杆菌K599介导的毛状根转化体系转化不同柑橘品种,筛选毛状根诱导快、转化率高的品种;接种CLas后,利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)对毛状根中的CLas进行定期检测,揭示其增长规律;在优化黄龙病抗性评价体系的基础上,通过CLas和相关基因的(RT-)qPCR、胼胝质含量检测、显微结构观察和症状观察等开展抗菌肽的黄龙病抗性评价。【结果】供试的11个柑橘品种中,香橼(Citrus medica)的毛状根诱导最快(15 d)、诱导率最高(73.75%),并且毛状根中转基因阳性率高(53.54%)。qPCR定期监测结果显示,在接种后第20—30天(days post inoculation,dpi),CLas开始在根中定殖;在30—50 dpi,CLas含量呈显著上升的趋势;CLas含量在60—120 dpi时略有波动,但与50 dpi时差异不显著。抗菌肽MaSAMP(stable antimicrobial peptide)、HBD-4(homo sapiens defensin beta 4)和CB(cecropin B)的抗性评价结果分析显示,在50—120 dpi,MaSAMP和CB表达植株中CLas含量均低于对照,且差异显著,除90 dpi外HBD-4表达植株中CLas含量也显著低于对照。3种抗菌肽表达植株中的胼胝质含量均显著低于对照(60 dpi),韧皮部细胞壁增厚不明显,未出现明显的淀粉粒和胼胝体沉积,并且均未发现根部死亡等现象(90 dpi)。【结论】揭示了侵染早期CLas在柑橘毛状根中的增长规律;优化了发根农杆菌介导的黄龙病抗性快速评价体系;明确转基因过表达抗菌肽MaSAMP、HBD-4和CB可显著抑制CLas的增殖,减少胼胝质沉积,减轻黄龙病症状,具有用于黄龙病�
- 曹鹏周金环王新亮李楚欣李佳欣姜培刘金香宋震
- 关键词:柑橘黄龙病抗菌肽发根农杆菌抗性评价
- 柑橘衰退病毒研究进展
- 柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)是对世界柑橘生产具有严重危害的重要病原物之一。主要通过嫁接和蚜虫在世界各柑橘产区广泛传播。我国广泛分布着CTV的各种强毒株和强力传媒褐色桔蚜,随着柚类和甜...
- 刘金香周常勇周彦宋震唐科志
- 关键词:柑橘衰退病毒分子生物学特性
- 文献传递
- 柑橘黄化脉明病毒和衰退病毒的二重RT-PCR检测体系的建立与应用
- 柑橘黄化脉明病毒(Citrusyellow vein clearing virus,CYVCV)和柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)均由昆虫传播,并常在田间混合感染。本研究选用CYVCV和...
- 赵恒燕关桂静王洪苏周常勇李中安刘金香
- 文献传递
- 第18届国际柑桔病毒学家组织者会议概况及巴西柑桔考察被引量:2
- 2011年
- 近年来,国际柑桔嫁接性传播病害发生为害加重,虫传病害分布区域不断扩大,新病害不断出现,国际柑桔产业面临着巨大的挑战,国际柑桔病毒学家组织者会议(International Organization of Citrus Virologists,IOCV)为各国柑桔病毒学家提供了交流合作的平台。
- 刘金香刘科宏李中安周常勇
- 关键词:柑桔产业病毒学发生为害
- 山楂叶螨抗药性及混配增效作用被引量:13
- 2004年
- 采用载玻片浸渍法测定了山西省忻州、晋中、运城地区山楂叶螨种群对9种杀螨剂的抗药性水平。测定结果表明:忻州地区种群对甲氰菊酯和三氯杀螨醇表现中抗,抗性指数 FR 分别为17.79和31.93倍,对水胺硫磷和毒死蜱表现低抗,FR 值分别为7.74和5.35倍;晋中地区种群对水胺硫磷、甲氰菊酯和三氯杀螨醇均表现中抗,FR 值为22.42~33.00倍,而运城地区种群对这3种药剂产生了高抗,FR 值分别为135.05、41.53和1714.01倍;运城地区种群对毒死蜱表现中抗,FR 值为34.49倍;晋中和运城地区种群对双甲脒表现低抗,FR 值分别为5.15和6.89倍;3个种群对阿维菌素、苯丁锡、三唑锡和四螨嗪仍相对敏感。混配增效作用测定结果表明,阿维菌素与甲氰菊酯1:20、1:10、1:5组合以及阿维菌素与三氯杀螨醇1:20、1:10组合均具有明显增效作用,共毒系数为189.63~363.30,其中阿维菌素与甲氰菊酯1:20和1:10组合以及阿维菌素与三氯杀螨醇1:20组合是比较理想的混配组合。
- 刘金香胡美英韩巨才刘慧平钟国华
- 关键词:山楂叶螨抗药性杀螨剂果树害虫
- 用于传毒分子机制研究的无毒褐色桔蚜饲养方法
- 本发明公开了一种用于传毒分子机制研究的无毒褐色桔蚜的饲养方法,包括利用无毒柑桔苗进行继代饲养得到无毒无翅褐色桔蚜,配制饲养液与灭菌,饲养室的制备及饲养。该方法通过调整无毒柑桔苗上无翅成蚜和下一代若蚜数,有效抑制了有翅成蚜...
- 刘金香周常勇李中安宋震李玲娣王永江
- 橘蚜传播率不同的柑橘衰退病毒分离株CPm的表达特性和分子特征被引量:3
- 2021年
- 柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)通过媒介昆虫传播必需要有病毒小外壳蛋白(minor coat protein,CPm)的参与。为解析褐色橘蚜传播率不同的CTV分离株CPm的分子特征和表达特性,通过克隆、测序获得其CPm基因序列,将对应的氨基酸序列运用DNAStar软件进行相似性和序列比对分析,并应用Western blot技术分析了3个传播率不同的中国CTV分离株CPm的表达特性。结果表明,低传播率的分离株CTLJ与其他分离株CPm氨基酸序列差异较大,同源性仅为93.3%~94.2%,氨基酸序列中有14个位点发生变异,其中9个位点是该分离株特有的。尤其有些位点的氨基酸极性和电荷发生了变化,引起了蛋白质二级结构的改变。然而,传播率不同的CTV分离株CPm的表达水平却无显著差异。这些结果揭示了CTV被褐色橘蚜传播的效率与其CPm的表达特性无关,可能与其氨基端序列变异有关。
- 刘金香王欢欢王洪苏周彦李中安周常勇
- 关键词:柑橘衰退病毒分子特征
- 一种检测褐色橘蚜体内CTV实时荧光定量RT-PCR的引物及其方法
- 本发明公开了一种检测褐色橘蚜体内CTV实时荧光定量RT-PCR的引物及其方法,利用实时定量引物专用设计软件Beacon Designer设计CTV特异性引物,摸索和优化实时荧光定量RT-PCR反应体系的条件参数等,建立一...
- 刘金香李玲娣周常勇李中安田晓
- 文献传递
- 柑橘黄化脉明病毒和衰退病毒的二重RT-PCR检测体系的建立与应用被引量:8
- 2017年
- 选用柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)和柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)两种病毒外壳蛋白保守序列及内参基因Ubiquitin的特异性引物,优化影响二重RT-PCR反应的Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度和退火温度,建立了针对两种病毒的一步法二重RT-PCR检测体系。二重RT-PCR获得CYVCV、CTV及Ubiquitin的特异性片段大小分别为614、373和194 bp,克隆测序和序列对比结果显示它们与已报道的病毒序列具有较高的同源性。该体系最低能从40 ng·μL^(-1)总核酸中检测出CYVCV,从4 ng·μL^(-1)总核酸中检测出CTV,其灵敏度与单一RT-PCR检测灵敏度一致。利用该体系对33份田间样品进行检测,CYVCV和CTV感染率分别为54.5%和66.7%,复合侵染率高达36.4%。该一步法二重RT-PCR技术体系可用于大量田间样品中CYVCV和CTV的快速同步检测。
- 赵恒燕关桂静周常勇于云奇王洪苏李中安刘金香
- 关键词:柑橘