史颖颖 作品数:21 被引量:45 H指数:4 供职机构: 江汉大学医学院 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
泡沫病毒LTR的研究进展 泡沫病毒的LTR是逆转录病毒中最长的。LTR不仅是病毒复制和整合所必需的,同时还具有启动子和基因转录调控的功能。它们可形成特殊的茎环结构,被相应的蛋白因子识别并结合。总之,LTR对于病毒基因的转录调控具有重要作用。 董兰兰 史颖颖 刘万红 何小华关键词:泡沫病毒 基因转录 蛋白因子 文献传递 熊果酸对脂多糖诱导的人髓系白血病单核细胞来源巨噬细胞炎性因子的调节作用 被引量:6 2021年 目的探讨熊果酸(UA)对脂多糖(LPS)诱导的人髓系白血病单核细胞(THP-1)来源巨噬细胞(Mφ)白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达调节和可能机制。方法对照组用佛波酯(PMA)处理THP-1细胞使其分化成巨噬细胞,模型组用脂多糖刺激THP-1源巨噬细胞建立炎症细胞模型,低、中、高浓度实验组在模型组的基础上分别加入5,10和20μmol·mL^(-1)熊果酸处理12 h,然后加入脂多糖处理6 h。以噻唑蓝比色法检测细胞活性,以流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)产生,以实时定量聚合酶链反应检测IL^(-1)β、IL-6和TNF-αmRNA水平,以蛋白质印迹法检测含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3),胱天蛋白酶-1(caspase-1),IL^(-1)β蛋白的表达。结果对照组和低、中、高浓度实验组的细胞凋亡率分别为(2.20±0.52)%,(2.40±0.26)%,(5.23±0.52)%和(11.27±1.03)%。对照组、模型组和低、中、高浓度实验组的IL^(-1)β基因相对表达量分别为1.02±0.14,16.46±2.99,14.22±0.50,7.41±0.79和2.20±0.57;IL-6基因相对表达量分别为1.08±0.28,17.61±5.55,4.42±0.41,2.14±0.23和1.56±0.37;TNF-α基因相对表达量分别为1.01±0.10,7.62±0.33,6.40±0.84,3.79±0.88和4.03±0.35;细胞ROS产生情况分别为(100.00±1.16)%,(131.70±4.41)%,(124.70±2.60)%,(107.30±1.45)%和(107.30±3.71)%;NLRP3蛋白表达的相对水平分别为1.18±0.01,1.31±0.02,1.20±0.02,0.94±0.01和0.97±0.01;caspase-1蛋白表达的相对水平分别为1.20±0.01,1.31±0.03,1.17±0.02,0.97±0.01和0.81±0.01;IL^(-1)β蛋白表达的相对水平分别为0.89±0.01,1.10±0.01,1.22±0.02,0.95±0.02和0.89±0.01;上述指标,模型组与对照组比较,中、高浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论熊果酸可能通过抑制ROS产生和NLRP3炎症小体的激活下调THP-1源巨噬细胞中炎性因子IL^(-1)β、IL-6和TNF-α的表达以发挥免疫调节的作用。 史颖颖 冯金梅 黄丽霞 刘永娟 施璐关键词:熊果酸 炎性细胞因子 科萨奇病毒A组16型的研究进展 手足口病主要发生于5岁及以下儿童,三岁及以下儿童发病率最高,以发热和手、足、口腔等部位出现皮疹,疱疹,溃疡为主要症状。CA16是最早发现的HFMD的病原体并于1958年被加拿大学者Robinson分离出来。并且手足口病主... 史颖颖 刘万红 何小华关键词:手足口病 儿童患者 临床病症 病菌感染 文献传递 2010-2011年恩施和武汉柯萨奇病毒A16型VP1基因特征分析 被引量:4 2017年 目的了解恩施和武汉地区手足口病(HFMD)的分子流行病学特征和病原体柯萨奇病毒A16型(CA16)VP1的基因特征。方法收集2010年4月至2011年8月来自于恩施和武汉地区的189例HFMD患儿咽拭子标本,接种病毒易感Vero细胞,对产生明显细胞病变效应的标本进行初筛和PCR鉴定;对阳性毒株VP1基因序列进行扩增,构建pMD18-T-VP1重组克隆,然后测定其VP1全长序列,通过MEGA5软件构建系统进化树进行系统进化分析,通过DNAstar软件对VP1保守表位的氨基酸序列保守性进行分析。结果手足口病患者以≤5岁婴幼儿为主,男性多于女性。从189例手足口病患儿咽拭子标本中分离到7株CA16,VP1序列进化分析显示均属于B1亚型。对VP1基因上的6个抗原表位进行分析,其中的3个区域呈现高度保守性,这些保守区可被用于疫苗研究。结论 CA16是2010-2011年恩施和武汉地区手足口病的重要病原体之一,属于B1基因型。 史颖颖 刘永娟 邱文洪 何小华 刘万红关键词:柯萨奇病毒A16型 手足口病 系统进化分析 医学免疫学课程思政育人体系的构建及其教学方法探究 被引量:1 2023年 课程思政是融合专业理论课中的德育元素与智育元素、发挥课堂协同育人作用的创新教育模式。医学生是国家未来医疗体系的栋梁之材,医学生的智育和德育素质直接关系国家大健康战略的实现情况。医学免疫学是一门重要的医学专业基础必修课,该文基于医学免疫学的学科特点以及医学生的人才培养目标,明确课程思政融入医学免疫学教学的重要性、融入途径和具体方法,以期培养医学生的家国情怀、人文素养、职业道德和科学精神。 史颖颖 施璐 孙宾莲 邱文洪关键词:医学免疫学 熊果酸对THP-1源巨噬细胞自噬相关蛋白的表达影响 2021年 研究熊果酸对THP-1源巨噬细胞中自噬相关蛋白表达影响。方法:将THP-1源巨噬细胞分为空白对照组,熊果酸处理组,熊果酸+3-甲基腺嘌呤(3-MA)三个处理组。应用MTT法检测不同浓度熊果酸(0、5、10、20、40μmol /L)对THP-1源巨噬细胞活性的影响; Western Blot 检测自噬相关蛋白LC3,P62,Beclin-1和Atg5的蛋白表达水平。进一步利用自噬抑制剂3-MA进行处理,检测熊果酸对自噬相关蛋白表达影响。结果:中低浓度(0、5、10、20μmol /L)熊果酸对THP-1源巨噬细胞没有明显影响,而高浓度(40μmol /L)熊果酸可以明显降低细胞活性(P<0.01)。与空白对照组相比,熊果酸处理组中LC3Ⅱ/Ⅰ,Beclin-1和Atg5蛋白表达明显增加,P62表达明显降低。与熊果酸处理组相比,熊果酸+3-MA处理组中LC3Ⅱ/Ⅰ,Beclin-1和Atg5蛋白表达显著降低,P62表达明显升高。结论:熊果酸可通过调节 LC3Ⅱ/Ⅰ,P62,Beclin-1及Atg5蛋白表达诱导细胞自噬。 陈仕同 胡波 沈铎 朱旷 史颖颖关键词:熊果酸 巨噬细胞 自噬 柯萨奇病毒A16型3C蛋白对人横纹肌肉瘤细胞凋亡的诱导作用及其机制 2021年 目的:探讨柯萨奇病毒A16型(CA16)3C蛋白对横纹肌肉瘤RD细胞凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养RD细胞,分为对照组(转染0.4µg空载体质粒pCMV-HA)、0.1μg pCMV-HA-3C组(转染0.1μg pCMV-HA-3C和0.3μg pCMV-HA)、0.2μg pCMV-HA-3C组(转染0.2μg pCMV-HA-3C和0.2μg pCMV-HA)、0.4μg pCMV-HA-3C组(转染0.4μg pCMV-HA-3C)和蛋白激酶B(AKT)激活剂SC79处理组(先用4 mg·L^(-1)SC79处理细胞4 h,然后转染0.2µg pCMV-HA-3C和0.2μg pCMV-HA)。MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组RD细胞中Bcl-2同源拮抗剂/杀伤剂(Bak)、Bcl-2相关的细胞死亡激动剂(Bad)和p53上调凋亡调节因子(PUMA)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组RD细胞中Bad、Bak、PUMA、聚ADP核糖聚合酶(PARP)、裂解聚ADP核糖聚合酶(cleaved-PARP)、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase-3)、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,0.4µg pCMV-HA-3C组细胞存活率明显降低(P<0.01)。与对照组比较,不同剂量pCMV-HA-3C组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与对照组比较,0.2µg pCMV-HA-3C组细胞中Bak、Bad和PUMA mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,不同剂量pCMV-HA-3C组细胞中cleaved-PARP和cleaved-caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。SC79处理实验中,与对照组比较,0.2μg pCMV-HA-3组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.05),p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与0.2μg pCMV-HA-3C组比较,SC79处理组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),p-AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:CA16型3C蛋白可能通过抑制AKT信号通路诱导RD细胞凋亡。 史颖颖 陈仕同 胡波 沈铎 朱旷 叶思玮 冯金梅关键词:柯萨奇病毒A16型 细胞凋亡 武汉重症手足口病EV-A71分离株全基因组特征分析 被引量:1 2022年 目的分析武汉重症肠道病毒A71型(Enterovirus A71,EV-A71)病毒株全基因组特征。方法自湖北武汉2例手足口病Ⅱ期患儿咽拭子中分离EV-A71,利用overlap-PCR扩增EV-A71全基因组的6个首尾重叠的基因片段,利用生物信息学软件DNAStar5.0、MEGA-Ⅹ和SimPlot3.5.1分析基因组特征。结果获得2株EV-A71分离株wh064和wh170的全基因组序列,二者核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.95%和99.86%。2株EV-A71病毒株属于C4a2亚型。系统进化分析和遗传距离计算发现,在P1区域,2株病毒株与C基因型EV-A71位于同一进化分支,遗传距离最小;在P2区域,2株病毒株与B基因型EV-A71和CVA16位于同一分支,与B基因型EV-A71之间遗传距离最小(C4亚型除外);在P3区域,2株病毒株与B3亚型EV-A71和CVA16位于同一分支,与B3亚型EV-A71和CVA16之间遗传距离较小。基因重组分析发现,2株分离株P1区域与C基因型EV-A71相似度最高,P2区域与B基因型EV-A71、CVA4、CVA5、CVA14和CVA16原型株的相似度高于C基因型EV-A71,P3区域与B3亚型EV-A71、CVA4、CVA14和CVA16原型株相似度高于其他病毒株,重组断点位于2A-2B连接处和3C处。此外,2株病毒株基因组中突变位点5’UTR-61T、VP1-27S(L)、VP1-98K和3D-396S亦存在于武汉其他重症和死亡病例EV-A71分离株。结论武汉2株EV-A71是重组病毒株,可能由C基因型和B3亚型EV-A71病毒株重组而来,亦或由C基因型EV-A71和CVA4、CVA14、CVA16重组而来。某些位点突变可能影响EV-A71毒力。 周井义 史颖颖 刘永娟关键词:全基因组 系统进化 基因重组 柯萨奇病毒A16型感染与细胞中长链非编码RNA表达的分析研究 史颖颖EV71病毒分子流行病学分析及其作用机制的初步研究 肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是儿童手足口病的主要致病原之一.自2007年以来,中国大陆反复发生EV71感染致手足口病的大规模爆发和流行.我们建立了分析中国大陆EV71衣壳蛋白VP1中潜在毒力位... 刘万红 刘永娟 张良禄 张凤凤 史颖颖 袁佩佩 涂会林 何小华