吕佳
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：南京医科大学附属淮安第一医院更多>>
- 发文基金：江苏省医学重点人才培养基金江苏省社会发展科技计划南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EZH2基因沉默对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡影响的研究被引量：9
- 2012年
- 目的:研究RNA干扰技术抑制zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)的表达对人胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响。方法:构建靶向EZH2基因的shRNA质粒并转染至U251细胞中,采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测EZH2mRNA和蛋白的表达情况,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验和Annexin V-FITC/PI流式细胞术实验观察转染后U251细胞增殖和凋亡情况。结果:靶向EZH2基因的shRNA质粒成功抑制了U251细胞EZH2基因的表达,mRNA和蛋白表达抑制率分别为56.00%和88.73%;转染shRNA-EZH2后,U251细胞的生长受到明显抑制(P<0.01),在转染96h后,生长抑制率达35.79%;转染48h后,U251细胞早、晚期凋亡率分别为(26.59±0.83)%和(38.63±0.80)%,较阴性质粒组和空白对照组均增加,以晚期明显,差异有统计学意义,P<0.01。结论:EZH2基因的沉默能有效抑制胶质瘤U251细胞的增殖、促进其凋亡,提示EZH2可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点。
- 吕佳孙晓阳丁涟沭
- 关键词：RNA干扰胶质瘤增殖凋亡
- EZH2靶向的shRNA质粒的构建和有效靶序列的筛选
- 2012年
- 目的:构建并筛选靶向zeste基因增强子人类同源物2(Enhancer of zeste homologue 2,EZH2)的短发卡RNA(short hairpinRNA,shRNA)的质粒表达载体。方法:设计并合成针对EZH2基因的带有小发夹结构的DNA片段并克隆至质粒pGPU6/GFP/Neo中,经酶切和测序分析后转染入胶质瘤U251细胞,分别应用实时荧光定量PCR和Western bloting在mRNA和蛋白质水平观察其对EZH2基因表达的沉默效果。结果:重组质粒构建成功,并成功转染入胶质瘤U251细胞,转染效率大约为70%。其中,以靶向hEZH2-715序列的质粒抑制效果最好,其对U251细胞EZH2 mRNA和protein抑制率分别为55%和89%。结论:成功构建了能高效抑制EZH2基因表达shRNA的重组质粒,为下一步探索EZH2在胶质瘤细胞中的生物学作用奠定了基础。
- 吕佳孙晓阳丁涟沭金孝东卜向飞卞爱苗蒋健
- 关键词：RNA干扰质粒胶质瘤
- EZH2基因与肿瘤关系的研究进展被引量：6
- 2012年
- 肿瘤的发生是一个多因素、多阶段的演进过程,涉及癌基因、抑癌基因、DNA损伤修复基因等多种基因的突变及其表观遗传改变。近年来研究[1,2]发现,表观遗传调控因子PcG蛋白表达异常与肿瘤的发生、发展密切相关,而其核心成分果蝇Zeste基因增强子人类同源物2（EZH2）与肿瘤的关系尤其受到关注。EZH2在人类多种恶性肿瘤中表达增高,并与肿瘤的进展和预后密切相关,是肿瘤治疗的潜在靶点。因此,深入研究EZH2在肿瘤发生、发展中的作用及其机制,对开发有关EZH2的靶向药物,在肿瘤治疗上能否取得突破将具有重要意义。现对EZH2基因与肿瘤关系的研究进展综述如下。
- 吕佳孙晓阳丁涟沭
- 关键词：EZH2基因恶性肿瘤DNA损伤修复基因蛋白表达异常抑癌基因表观遗传
