周冬青
- 作品数：27 被引量：74H指数：5
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- 利用环介导等温扩增(LAMP)试剂盒建立一种新的检测石蜡包埋肝组织HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)的方法
- 周冬青刘成永王骥王春颖张克球刘加彬黄海滨候远沛成松王鑫
- 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA检测试剂盒
- 本实用新型公开了一种乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA，包括盒体(1)、位于盒体(1)内的衬垫(2)，所述衬垫(2)包括第一层衬垫，所述第一层衬垫上设有至少有8个容器孔(3)，所述容器孔(3)分别设置有：PSAD反应试剂1管...
- 周冬青张克球刘加彬王春颖王骥杨友国李瑞刘成永黄海滨成松季洪斌季昊坤
- 文献传递
- 环介导等温扩增(LAMP)试剂盒检测石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)被引量：1
- 2015年
- 目的建立一种检测石蜡包埋的肝组织中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的新方法,并探讨其应用价值和临床意义。方法提取30例慢性HBV感染患者的石蜡包埋肝组织中的DNA,采用质粒安全ATP依赖性DNA酶(plasmid-safe ATP-dependent DNase,PSAD)消化,去除非cccDNA后,加入引物及Bst DNA酶进行环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),将检测结果与临床实验室资料结合并进行分析,以判断其临床应用价值。结果 30例HBV感染患者中,有17例HBV cccDNA阳性,阳性检测率56.67%。其中肝癌5例、肝硬化4例、重型乙型肝炎5例、慢性乙型肝炎(轻-中度)3例。提示肝组织HBV cccDNA阳性可能与疾病进展密切相关,与血清HBV cccDNA阳性有一定的相关性,与乙型肝炎病毒血清免疫标志物以及肝功能状况无明显相关。结论 LAMP法能检测到石蜡包埋肝组织中的HBV cccDNA,结合临床实验室资料,对判断抗病毒药物疗效及研究乙型肝炎致病机制具有一定的意义。
- 周冬青刘成永王骥王春颖张克球刘加彬黄海滨候远沛成松王鑫
- 肝组织钠离子牛磺胆酸协同转运蛋白表达与乙肝患者HBVDNA含量及肝组织病理学改变的相关性研究
- 2022年
- 研究肝组织钠离子牛磺胆酸协同转运蛋白(SLC10A1)、SLC10A2与肝组织HBVDNA含量的相关性,以及NTCP与肝组织病理学改变的相关性,方法:采用免疫组化方法检测乙型肝炎病毒(hepatitis B virus HBV)感染者的肝组织中NTCP(SLC10A1)及SLC10A2的表达及ELISA方法检测血液中SLC10A1、SLC10A2水平,利用荧光定量PCR方法检测HBV感染者肝组织及血清中的HBV DNA含量,结合临床及实验室资料,研究NTCP与肝组织HBV DNA含量的相关性,以及NTCP与肝组织病理学改变的有无关联性。结果:1.89例患者免疫组化检测NTCP(SLC10A1)、SLC10A2表达均为阳性,其中SLC10A1多在细胞膜和细胞浆表达,阳性程度(+,++,+++,++++)不等;SLC10A2多在细胞浆和细胞核表达,P>0.05,无统计学意义。3.将血清学检测NTCP(SLC10A1)、SLC10A2结果与血清HBV DNA含量(以2×105IU/ml、1×107IU/ml为界分组)比较,结果显示血清学检测NTCP(SLC10A1)及SLC10A2有统计学意义。4.肝组织NTCP不同阳性组之间的炎症G进行比较,无统计学意义。肝组织NTCP不同阳性组之间的纤维化程度S进行比较,无统计学意义。结论:NTCP(SLC10A1)在肝组织中的表达与乙肝患者肝组织HBV DNA含量有一定的相关性,血清中含量与血清HBV DNA含量有部分相关性,本研究再次证实NTCP(SLC10A1)不但与胆汁转运相关。血清中SLC10A2含量与血清HBV DNA含量有部分相关性;SLC10A2在肝组织中的表达与肝组织HBV DNA含量无密切相关性,说明SLC10A2不是HBV感染的功能性受体。
- 高玉金周冬青王春颖
- 实时荧光核酸恒温扩增检测技术在胸腔积液结核分枝杆菌检测中的应用被引量：5
- 2015年
- 目的评估采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)快速检测结核性胸膜炎患者胸腔积液中的结核分枝杆菌(MTB)的临床应用价值。方法收集90例确诊结核性胸膜炎患者胸腔积液标本和52例非结核性胸膜炎患者胸腔积液标本,分别采用罗氏培养法、SAT和DNA荧光定量扩增法检测MTB,并通过与罗氏培养法比较,分析SAT的灵敏度、特异度及临床应用价值。结果以罗氏培养法为标准,则SAT的灵敏度、特异度和约登指数分别为90.9%、72.1%、0.630。在临床确诊的结核性胸膜炎患者中,罗氏培养法和SAT检测胸腔积液标本的阳性检出率分别为24.4%、43.3%,差异有统计学意义(χ2=7.166 3,P=0.001 4)。结论 SAT检测胸腔积液标本中的MTB,具有快速、灵敏度和特异度较高的优点,可提高胸腔积液标本中MTB的检出率并减少误诊和漏诊的发生。
- 成松刘成永周冬青侯远沛
- 关键词：胸膜炎结核分枝杆菌核酸扩增技术
- RNA恒温扩增实时荧光检测技术在检测脑脊液中结核分枝杆菌的应用被引量：15
- 2017年
- 目的评估用RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT-TB)快速检测脑脊液中结核分枝杆菌(MTB)的临床应用价值。方法采集来我院接受检查的高度疑似儿童结核性脑膜炎患儿96例(A组),非结核性脑膜炎儿童78例(B组),分别采用夹层杯离心集菌法、罗氏培养法、SAT-TB和MTB DNA荧光定量扩增法(TB DNA)同时检测,比较筛检指标及临床应用价值。结果 A组脑脊液检测中罗氏培养法、TB DNA和SAT-TB法检测阳性率分别为40.63%、39.58%、42.71%,三者差异无统计学意义(X^2=0.20,P>0.05);以罗氏培养法作为金标准,SAT-TB法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确指数、误诊率、漏诊率、诊断符合率分别为92.31%、91.23%、87.80%、94.55%、0.84%、8.77%、7.69%和91.67%;TB DNA法的各项指标分别为66.67%、78.95%、68.42%、77.59%、0.46%、21.05%、33.33%和73.96%。结论 SAT-TB检测脑脊液标本中的MTB,具有快速、敏感度和特异度较高等优点,可提高脑脊液标本中MTB的检出率,从而提高儿童结核性脑膜炎的诊断水平。
- 张海晴黄海滨王春颖刘成永胡永领侯远沛成松周冬青
- 关键词：脑脊液结核分枝杆菌核酸扩增技术
- 结核分枝杆菌潜伏性感染诊断的潜在标志物蛋白研究
- 2021年
- 目的比较结核分枝杆菌标准株与休眠株蛋白质组差异表达情况,探讨结核潜伏性感染相关的诊断标志物。方法选取结核分枝杆菌标准株H37Rv和由标准株诱导的潜伏性感染菌株模型(休眠株)的样本,每个样本各培养3皿。对2组样本中的菌株进行裂解并抽提蛋白,进行同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)检测与分析,获得标准株与休眠菌株中相关蛋白质组的表达数据,并利用蛋白富集、信号通路分析等生物信息学技术将差异蛋白进行分类,进一步确定参与能量代谢通路的相关蛋白。结果所检测的187个蛋白质中,64个蛋白质具有差异性表达,其中40个蛋白质表达上调,24个蛋白质表达下调。P9WPC9蛋白在休眠菌株与标准株中表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论P9WPC9蛋白主要参与细菌的能量代谢通路,可能成为结核潜伏性感染的潜在诊断标志物。
- 张海晴张雪迪刘成永周冬青魏素梅贾彤张礼茂郭岩李莉黄海滨
- 关键词：结核分枝杆菌蛋白质组学诊断标志物
- GeneXpert MTB/RIF系统在结核性胸膜炎快速诊断中应用价值被引量：10
- 2016年
- 为提高结核性胸膜炎的诊断效率,我院于2014年4～7月对60例结核性胸膜炎患者使用美国生产Gene Xpert MTB/RIF系统检查结核分枝杆菌,取得较高检出率,报告如下。
- 张海晴刘成永周冬青王春颖黄海滨贾彤张礼茂郭岩成松
- 关键词：临床诊疗指南耐药结核
- 一种LAMP法检测石蜡包埋肝组织中HBV cccDNA的引物和试剂盒
- 本发明公开了一种LAMP法检测石蜡包埋肝组织中HBV cccDNA的引物及试剂盒，方法包括(1)先利用PSAD酶消化rcDNA，提高检测的特异性。(2)再用Bst酶环介导扩增cccDNA，该酶特异性较高，扩增效率也较高，...
- 周冬青王春颖刘成永王骥张克球刘加彬杨友国李瑞黄海滨成松季昊坤
- 文献传递
- 徐州地区乙型肝炎病毒基因型与肝组织学改变的关系被引量：3
- 2008年
- 目的研究徐州地区HBV基因型与肝组织学改变的关系。方法采用DNA测序技术进行HBV基因分型,并结合其ALT、TBil、HBeAg和HBV DNA定量值及肝组织病理学检查结果,分析HBV基因型与肝损害的关系。结果检测222例慢性乙型肝炎(CHB)患者,徐州地区HBV基因型构成为B、C、BC混合型和D型分别占20.7%、73.0%、4.1%和2.3%。在CHB患者中B、C基因型在性别、年龄、肝功能和HBeAg的定量值及百分率均无显著差异(P>0.05),C型的HBV DNA定量值显著高于B型(P<0.05);C型基本核心启动子区(BCP)1762、1764变异率显著高于B型,P<0.01;C型的肝组织炎症评分和纤维化评分明显高于B型(P<0.05);B和C基因型中,单独1762、1764双突变者与无此类位点变异者和单独前C区1896变异者炎症评分相比较前者显著高于后两者(P<0.05)。结论不同HBV基因型变异位点不同,可能是造成不同的肝组织学改变的原因之一,C型可带来相对严重的肝组织学改变。HBV基因型及肝组织学检查有助于判断疾病的轻重及预后,可用于临床指导治疗。
- 王春颖杨友国王骥刘成永王海舰周冬青侯远沛
- 关键词：乙型肝炎病毒基因型肝组织学
