目的探讨新生大鼠长时间吸入七氟烷是否导致注意缺陷多动障碍(attention-deficit/hyperactivity disorder,ADHD)相关的反常活动和记忆损害。方法将出生后5 d(postnatal day 5,P5)的SD大鼠随机分为七氟烷组和对照组,分别采用吸入3%的七氟烷和吸入相同流量纯氧2 h、4 h建立七氟烷吸入麻醉模型及处理对照组。采用旷场实验(open field test,OFT)、5项选择连续反应时间任务实验(5-choice serial reaction time task,5-CSRTT)、场景恐惧(fear-conditioning,FC)实验、水迷宫(morris water maze,MWM)实验评估青少年期大鼠(~P25)和成年大鼠(~P65)的认知、记忆、焦虑及ADHD相关行为等变化。结果在OFT中,七氟烷2 h、4 h组大鼠P21、P61活动水平和探索行为指标与对照组的差异均无统计学意义;5-CSRTT实验结果显示,七氟烷组在P25和P65时ADHD相关行为(不成熟反应次数、正确率、遗漏率)与对照组比较,差异也无统计学意义;在FC实验中,与对照组相比,七氟烷4 h暴露组大鼠僵直时间缩短,僵直潜伏期时间延长(P=0.029);MWM实验结果显示,与对照组相比,七氟烷4 h组大鼠训练过程中逃逸潜伏期在第二天和第三天延长(P<0.05),七氟烷组平均游泳速度在P69和P76时差异无统计学意义,七氟烷4 h组的目标象限停留时间缩短(P=0.039),目标象限移动距离百分比降低(P=0.048)。结论新生大鼠七氟烷吸入麻醉4 h后,可致记忆损害但并未增加发生ADHD相关反常活动的风险。
目的探讨甲苯噻嗪(xylazine,Xyl)通过抑制超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated,HCN)电流产生镇痛作用的机制。方法对HCN亚型通道1(HCN1)基因敲除小鼠(HCN1-/-)及HCN1野生型小鼠(HCN1+/+)分别腹腔注射生理盐水及Xyl(10、20、30和40mg/kg),通过进行机械痛觉测试及甩尾试验方法检测Xyl的镇痛效果,计算出最大镇痛效应百分比(percent maximum possible effect,%MPE);HEK 293细胞转染HCN1质粒和HCN亚型通道2(HCN2)质粒,分为对照组及不同浓度Xyl(12.5、25、50和100μmol/L)实验组,利用全细胞膜片钳记录表达HCN1和HCN2离子通道的HEK 293细胞超极化激活电流(hyperpolarization-activated currents,Ih),计算Xyl对Ih的抑制率。结果HCN1+/+小鼠和HCN1-/-小鼠注射Xyl后对机械痛觉刺激和热辐射刺激反应的%MPE均为随着Xyl质量浓度增加而加大,当Xyl质量浓度为30mg/kg及40mg/kg时,HCN1-/-小鼠机械痛觉刺激测试的%MPE为(62.06±14.72)%和(69.92±16.09)%;甩尾试验%MPE为(52.50±1.97)%和(64.74±6.34)%。HCN1+/+小鼠机械痛觉刺激测试的%MPE为(75.47±8.06)%和(86.35±11.31)%;甩尾试验%MPE为(57.83±4.82)%和(74.98±9.35)%,等量Xyl对HCN1+/+小鼠与HCN1-/-小鼠的镇痛作用(机械痛觉刺激和甩尾试验)差异有统计学意义(P<0.05)。全细胞膜片钳试验结果显示,Xyl对HCN1及HCN2离子通道电流均产生了抑制作用,Xyl(12.5～100μmol/L)对HCN1的Ih的抑制率为(24.62±23.62)%～(62.40±15.48)%;HCN1的半数激活电压(V1/2)为:(-79.58±1.56)mV～(-98.95±3.57)mV。Xyl对HCN2的Ih的抑制率为(29.19±17.82)%～(80.02±6.64)%;HCN2的V1/2为:(-102.17±1.36)mV～(-117.48±2.38)mV。结论 Xyl对HCN1+/+小鼠的镇痛效果比HCN1-/-小鼠更好。Xyl可能是通过抑制HCN离子通道电流,从而产生镇痛作用。
