孙艳
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：蚌埠医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肺腺癌细胞株A549中HIF-1α对survivin的表达调控被引量：4
- 2011年
- 背景与目的:survivin是一种重要的抗凋亡基因,在肿瘤组织中特异性高表达,并参与调控细胞周期和细胞凋亡,其高表达与肿瘤进展、药物抵抗以及预后关系密切。但survivin在肺癌中高表达的转录调控机制研究甚少。课题组前期研究成功构建含有survivin核心启动子的荧光报告载体pGL3-SVP230-luc,并发现核心启动子区存在缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的潜在位点。本研究拟通过免疫荧光双标记法、电泳迁移率实验(EMSA)、共转染等方法探讨缺氧条件下人肺腺癌细胞株A549中HIF-1α调控survivin转录的确切机制。方法:⑴运用免疫荧光双标记检测缺氧A549细胞中HIF-1α与survivin的表达;⑵HIF-1α表达质粒和HIF-1αsiRNA分别转染A549细胞,30 h后RT-PCR、Western blot和免疫荧光双标法检测survivin mRNA和蛋白表达;⑶pGL3-SVP230-luc(含有survivin核心启动子的荧光报告载体)与HIF-1α表达质粒和HIF-1αsiRNA分别共转染A549细胞,测定萤光素酶的表达活性;⑷EMSA分析HIF-1α与survivin核心启动子结合情况;(5)流式细胞术和MTT法检测细胞凋亡和增殖。结果:⑴HIF-1α与survivin共表达于A549细胞中;⑵转染HIF-1α表达质粒组survivin mRNA和蛋白表达水平显著上调,转染HIF-1αsiRNA组survivin mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);⑶HIF-1α表达质粒组pGL3-SVP230-luc相对活性分别为78.84,显著高于空质粒组及对照组(P<0.01),HIF-1αsiRNA组pGL3-SVP230-luc相对活性分别为28.84,显著低于空质粒组及对照组(P均<0.01);⑷HIF-1α与survivin核心启动子区转录起始点上游-19～-16 bp序列结合转录激活survivin;⑸流式细胞术和MTT检测结果显示,HIF-1αsiRNA组细胞凋亡显著增加,细胞抑制率明显升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P均<0.01)。结论:缺氧状态下A549细胞中survivin与HIF-1α存在共表达;HIF-1α可以通过survivin核心启动子区的结合位点激活survivin转录和表达;靶
- 李伟陈余清孙艳赵成岭王效静
- 关键词：缺氧诱导因子-1ΑSURVIVIN转录调节非小细胞肺癌
- 生存素与肿瘤信号转导通路之间的关系
- 2010年
- 生存素是凋亡抑制蛋白家族新成员，是细胞增殖和凋亡调控界面间的“结点”分子。生存素基因表达的肿瘤特异性使其成为目前恶性肿瘤诊断和治疗的新靶点。肿瘤细胞发生与正常细胞的信号通路异常有关，信号转导通路的活化参与细胞癌变、增殖、凋亡等多种生物学效应。本文就肿瘤中信号转导对生存素基因的表达调控机制的研究进展作一综述。
- 孙艳陈余清
- 关键词：生存素信号转导肿瘤
- 人肺腺癌细胞株A549中HIF-1α对survivin的调控及对其生物学作用
- 目的检测人肺腺癌细胞株A549中survivin启动子上存在HIF-1α结合位点,并验证HIF-1α对survivin因子的转录、翻译影响,及HIF-1α对A549增殖、凋亡及迁移的影响,探讨HIF-1α在非小细胞肺癌(...
- 舒红梅孙艳李伟赵成岭陈余清
- 文献传递
- 激励式护理干预在甲状腺癌手术患者中的应用效果被引量：6
- 2019年
- 目的:探讨激励式护理干预应用于甲状腺癌手术患者的效果。方法:随机将90例甲状腺癌手术患者分为对照组(45例)和观察组(45例),对照组患者仅实施常规护理,观察组患者接受激励式护理干预,比较两组患者的护理效果。结果:护理后,观察组患者的总健康状况(躯体功能、情绪功能、角色功能、社会功能、认知功能)明显高于对照组,且心理状况(焦虑评分、抑郁评分)、并发症发生率明显更低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:通过激励式护理干预可以有效改善甲状腺癌手术患者生存质量和心理状态,减少并发症。
- 孙艳
- 关键词：甲状腺癌心理状态
- 缺氧诱导因子-1α对A549细胞株中生存素表达及其生物学特性的影响
- 2014年
- 目的观察非小细胞肺癌细胞株A549中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对生存素转录的调控作用及对A549细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测生存素启动子序列与核蛋白结合的情况。EMSA实验分为阴性对照反应组、结合反应组、探针冷竞争反应组、突变探针的冷竞争反应组和特异性抗体反应组。应用脂质体将载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA HIF-1α质粒和阴性(错义链)、内参(β-肌动蛋白)微小RNA(miRNA)质粒转染A549细胞。转染分为未处理组(正常A549细胞)、HIF-1α沉默组(转染HIF-1αmiRNA质粒)、阴性对照组和内参组。杀稻瘟菌素筛选阳性克隆扩大培养;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法筛选出对A549细胞干扰效果最佳的miRNA HIF-1α干扰载体;常氧、缺氧条件下检测各组中HIF-1α、生存素在mRNA和蛋白水平的变化;用细胞计数法、流式细胞术和转移小室迁移试验检测各组细胞增殖、凋亡及迁移细胞数。结果 (1)γ-32P标记的生存素启动子序列-26^-9 bp与A549细胞核蛋白作用,该条带可与HIF-1α抗体结合产生特异性抗体结合条带;(2)常氧下HIF-1α沉默组的HIF-1α和生存素mRNA分别为0.313±0.051和0.060±0.008,明显低于未处理组的1.042±0.036和1.071±0.016(F=436.433,0.002,均P<0.05);HIF-1α和生存素的蛋白含量分别为0.559±0.051和0.051±0.003,未处理组分别是1.452±0.146和0.194±0.007,两组比较差异有统计学意义(F值为53.525和331.646,均P<0.05)。缺氧条件下HIF-1α沉默组中HIF-1α、生存素的mRNA和蛋白分别为0.604±0.040、0.394±0.018、0.997±0.026、0.172±0.006,明显受到抑制(mRNA的t值分别为7.809和-28.936,均P<0.01;蛋白的t值分别为13.523和-14.202,均P<0.01);常氧条件下,转染miRNA后A549细胞增殖(24 h为0.273±0.008)无明显变化,但迁移细胞数(30±6)比未处理组(121±17)减少;缺氧条件下,转染miRNA后,A549细胞生长速度(24 h为0.273±0
- 舒红梅赵成岭孙艳李伟陈余清
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基缺氧生存素
