宋培培
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：安徽农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 草莓镶脉病毒(SVBV)启动子的克隆及序列分析被引量：1
- 2011年
- 【目的】对草莓镶脉病毒(SVBV)启动子进行序列测定和分析,为进一步研究该启动子稳定表达活性、表达类型及驱动外源基因稳定表达提供理论依据。【方法】用CTAB法从感染SVBV的草莓叶片中提取总DNA,设计特异性引物扩增SVBV启动子,克隆并测序。将SVBV启动子与花椰菜花叶病毒属其他成员的启动子核苷酸序列进行比较,并构建其系统关系树,再用PlantCARE软件分析SVBV启动子序列中的各个作用元件。【结果】获得全长为1017 bp的SVBV启动子。序列比列表明,本研究构建的中国SVBV启动子与美国SVBV启动子序列相似性最高,达77.29%。从构建的系统关系树可以看出,中国SVBV启动子与美国SVBV启动子单独聚成一个亚分支,说明来源于草莓的2个SVBV启动子亲缘关系最近。另外,SVBV启动子和花椰菜花叶病毒(CaMV)启动子亲缘关系虽然相对较近,但二者序列相似性较低,说明SVBV启动子与CaMV 35 S启动子的结构差异较大。进一步分析表明,SVBV启动子除了具有一般植物启动子的典型作用元件TATA-box和CAAT-box外,还具有一些与组织特异性表达或诱导表达相关的调节因子。【结论】SVBV启动子具有多种转录顺式作用元件,可能是一个在双子叶植物中具有较强驱动活性的组成型启动子。
- 倪方锐李瑞李爽贾琳蒋磊宋培培江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒启动子克隆
- 水稻条纹病毒安徽分离物CP基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2010年
- 采集安徽庐江水稻条纹叶枯病感病稻株,提取病叶总RNA。设计特异性引物进行RT-PCR扩增,获得水稻条纹病毒安徽分离物(RSV-AH)的RNA3部分片段,克隆并测序。序列分析表明,该片段全长1 051个核苷酸,其中包含的CP基因全长969个核苷酸,编码322个氨基酸。将RSV安徽分离物CP基因(AH-CP)与其它来源的RSVCP基因进行核甘酸序列相似性比较,结果表明,安徽庐江的RSVCP基因与江苏洪泽的RSVCP基因序列相似性最高,达99.3%。进一步构建RSVCP基因系统关系树,发现安徽庐江的RSVCP基因同样与江苏洪泽的RSVCP基因亲缘关系最近。
- 丁菲檀根甲贾琳宋培培江彤
- 关键词：水稻条纹病毒CP基因克隆
- 草莓镶脉病毒(SVBV)CP基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2009年
- 用CTAB法从感染草莓镶脉病毒(SVBV)的草莓叶片中提取总DNA,设计3对特异性引物扩增SVBVCP基因的3个片段,分别克隆并测序。经序列拼接得到SVBVCP基因完整序列,全长1407nts,编码468个aa。将它与美国报道的SVBV(NC001725)以及花椰菜花叶病毒属其它成员的CP基因相比较,结果表明,SVBVCP基因与SVBV(NC001725)CP基因序列相似性最高,达83.4%;而与花椰菜花叶病毒属其它成员的CP基因序列相似性均较低,仅为27.1%～33.2%。构建SVBV及其同属其它成员CP基因的系统关系树,结果显示中国SVBV与SVBV(NC001725)单独形成一个分支,而与其同属其它成员的亲缘关系均较远。
- 李爽李瑞宋培培江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒CP基因克隆
- 沉默2b基因获得抗黄瓜花叶病毒(CMV)的转基因烟草
- 2019年
- 【目的】本研究利用dsRNA技术沉默2b基因,获得烟草品种云烟85的T_1代转基因抗CMV株系。【方法】构建含有CMV 2b部分序列反向重复的植物表达载体pBIN-2b(r)-In-2b(i),以农杆菌介导的叶盘法转化普通烟草(Nicotiana tabacum)品种云烟85。【结果】抗性筛选获得112株T_0代转基因阳性植株,接种CMV进行抗病性鉴定,发现有46株T_0代转基因植株表现为抗病,其他66株表现为感病。Tas-ELISA检测表明,T_0代抗病烟株的病毒积累量显著低于感病烟株。选取10个T_0代抗病株系繁殖,接种CMV鉴定T_1代抗病性,发现部分T_1代烟株发生一定比例的抗感分离,T_1代抗性株率为46.7%～100%。Real-time PCR检测T_1代烟株,发现T_1代抗病烟株CMV 2b基因RNA积累水平显著低于感病烟株。【结论】基于以上策略及实验,获得抗CMV转基因烟草株系。
- 芮鹏环宋培培蒋磊蒋磊
- 关键词：黄瓜花叶病毒沉默
- dsRNA介导的烟草抗黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯Y病毒(PVY)研究
- RNA沉默是植物体内固有的一种抗病毒防卫反应，而大多数植物病毒编码的RNA沉默抑制子可以克服这种寄主的防卫反应。本研究利用转录后基因沉默原理，分别构建含沉默抑制子CMV2b基因、PVY HC-Pro基因部分片断以及融合2...
- 宋培培
- 关键词：马铃薯Y病毒
- 沉默抑制子CMV 2b基因的克隆及其反向重复植物表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 从安徽亳州采集表现明显CMV症状的烟草样本,取ELISA检测阳性反应最强的样本提取总RNA。设计特异性引物扩增CMV RNA2部分片段,克隆并测序。其中包含的2b基因全长336个核苷酸,编码111个氨基酸。将来源于安徽烟草的CMV 2b基因与其它CMV 2b基因进行序列比对,结果表明,来源于安徽烟草的CMV2b基因与来源于韩国的2b基因AF033667的核苷酸序列相似性最高,达98.8%。构建2b基因系统关系树,也表明来源于安徽烟草的CMV 2b基因与AF033667亲缘关系最近。以安徽CMV 2b为模板,分别扩增大小约为300 bp的正向片段CMV 2b(r)和反向片段CMV 2b(i)。先后将反向片段CMV 2b(i)和正向片段CMV 2b(r)分别插入载体pSK-In所含intron两侧,获得重组质粒pSK-2b(r)-In-2b(i)。再将含intron的正反向片段插入pBIN438,最终得到含CMV 2b部分序列反向重复的植物表达载体pBIN-2b(r)-In-2b(i)。
- 宋培培李爽檀根甲贾琳丁菲江彤
- 关键词：CMV
