宋朝君 作品数:96 被引量:224 H指数:7 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 电子电信 更多>>
抗人TNF单克隆抗体对TNF诱导的NF-κB核转位的抑制作用 被引量:6 2004年 目的 :鉴定 3株抗人TNF单克隆抗体 (mAb)D2、E6和F6对TNF诱导的NF κB核转位的抑制作用。方法 :将不同浓度的 3株mAb及无关mAb分别与TNF溶液孵育后 ,加入到ECV30 4细胞培养液中。孵育 1h后收获细胞 ,从中提取核蛋白并测定其含量 ,用电泳迁移率变动分析 (EMSA)检测核提取液中NF κB的核转位。结果 :3株抗TNFmAb均可抑制TNF诱导的ECV30 4细胞中NF κB的核转位。其中mAbD2的抑制作用最强 ,其次为mAbF6和E6 ,无关对照抗体也有一定的非特异性反应。抑制作用与加入的mAb呈良好的剂量依赖关系 ,在 10mg/L和 0 .1mg/L条件下 ,mAbD2的抑制率分别为 94 .2 %和75 .1% ,mAbE6分别为 6 4 .9%和 2 8.6 % ,mAbF6分别为 70 .3%和 4 9.5 % ,无关对照抗体分别为 2 0 .0 %和 11.1%。结论 :mAbD2、E6和F6可特异性地抑制TNF诱导的NF κB核转位 。 朱参胜 欧阳为明 刘雪松 梁晓聪 宋朝君 金伯泉关键词:肿瘤坏死因子 单克隆抗体 NF-ΚB 夹心ELISA检测可溶型LAIR-1方法的建立及其应用的研究 被引量:11 2003年 为了探讨血清可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体 1 (sLAIR 1 )的水平与疾病的关系 ,用生物传感器鉴定了 3种抗LAIR 1分子胞膜外区mAb识别的表位 ,并应用 2种识别不同LAIR 1表位的mAb首次建立了检测sLAIR 1的夹心ELISA方法 ,其检测灵敏度达到 1 5 μg/L。以此方法检测了活化的人PBMC培养上清以及正常人和肾综合征出血热 (HFRS )患者血清中sLAIR 1的水平。在经PMA、PHA、LPS和抗CD3mAb活化的人PBMC细胞培养上清中检测到sLAIR 1。 2 4例正常人血清sLAIR 1的平均水平为 (6 2± 3 3) μg/L ,6 2例HFRS患者血清sLAIR 1的平均水平为 (4 7 2± 35 9) μg/L。证明体内和体外存在天然sLAIR 1。HFRS患者血清sLAIR 1水平明显升高。为进一步研究LAIR 薛江楠 欧阳为明 贾卫 谢鑫 刘京梅 宁双飞 户义 宋朝君 金伯泉关键词:MAB 夹心ELISA LAIR-1 HFRS 一种检测A型肉毒毒素的高灵敏度酶联免疫吸附法 被引量:3 2012年 目的:建立检测A型肉毒毒素的酶联免疫吸附法。方法:利用重组A型肉毒毒素重链羧基端片段作为免疫原和B淋巴细胞杂交瘤技术,获得了56株高亲和力的抗A型肉毒毒素单克隆抗体(mAb),建立了检测A型肉毒毒素的双mAb夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:该方法理论检测下限达到了8.34 pg/mL,检测天然A型肉毒毒素制剂时其实际检测下限可达0.78 LD50/mL,与其他型别的肉毒毒素均未见交叉反应。通过测定基质中的回收率,发现基质中的相关的蛋白对检测具有较大的影响。结论:该方法具有灵敏度高,特异性好,使用方便等优点,具有较高的的实用价值。 刘志佳 李永明 宋朝君 李娜 卢卫嘉 孙元杰 毛晓燕 杨琨 金伯泉关键词:A型肉毒毒素 酶联免疫吸附法 单克隆抗体 主动PBL方法在八年制《医学免疫学》教学中的应用与思考 被引量:20 2012年 八年制医学生的培养目标是培养临床医学博士。医学免疫学是与临床联系较为紧密的基础课之一,在教学中如何加强学生处理临床问题的逻辑思维能力和提高探讨临床表象之下深层次科学问题的科研思维水平,一直是免疫学教学的主要关注之一。PBL(Problem based learning,PBL)教学方法由美国的神经病学教授Barrows于1969年首创,是以问题为导向的教学方法,是以学生为中心的教育方式, 张赟 杨琨 陈丽华 宋朝君 方亮 李琦 庄然 金伯泉 温伟红 杨安钢关键词:《医学免疫学》 免疫学教学 逻辑思维能力 以问题为导向 以学生为中心 SADA,一种新的鉴定未知肿瘤/睾丸抗原的方法 研究背景:肿瘤/睾丸抗原(cancer/testis antigen,CTA)属肿瘤抗原的一类,迄今为止已命名了46个基因家族共编码91个不同的转录子。在正常组织中仅限制性表达于睾丸,其他正常组织不表达,而在某些肿瘤组织... 宋朝君 周幸春 王鑫 方亮 杨琨 金伯泉文献传递 抗T-2毒素单克隆抗体的制备与初步鉴定 被引量:3 2006年 目的制备和鉴定抗T-2毒素单克隆抗体。方法将T-2毒素与牛血清白蛋白(BSA)交联,制备T-2毒素与BSA交联物(T-2-BSA),以T-2-BSA免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,以HAT培养液筛选杂交瘤细胞,用有限稀释法进行克隆化。用筛选的阳性单克隆细胞株,按常规方法制备腹水,腹水用饱和硫酸铵沉淀后,用阴离子交换法纯化,获得纯化的单克隆抗体。采用ELISA鉴定抗体的亚类,并测定血清和腹水中抗体的效价。结果制备出T-2毒素与BSA交联物T-2-BSA,免疫小鼠血清的效价在1×10-6以上。获得1株能稳定分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞系,该抗体(T2mAb)属于IgG1亚类,轻链为κ链。腹水效价为1×10-6。ELISA法证明T2mAb可与T-2毒素发生特异性反应。结论成功制备出抗T-2毒素单克隆抗体,为建立测定食品、饲料和组织液中T-2毒素的免疫学方法打下了坚实的基础。 朱参胜 宋朝君 彭双清 李荣华 金伯泉关键词:T-2毒素 单克隆抗体 基于ZigBee协议的无线传感网路及应用 2010年 无线传感网络因其巨大的应用前景,已经引起了学术界的高度关注,成为科学界研究的热点问题之一。本文先对无线传感网路进行基本概述,接着介绍了ZigBee协议,最后以家用自动化的实例描述了基于ZigBee协议的无线传感网路及应用。 宋朝君 赵东风关键词:无线传感网络 抗丝氨酸磷酸化序列特异性单克隆抗体的制备 2007年 宋朝君 许晓光 庄然 王鑫 田莹 金伯泉关键词:蛋白质磷酸化 信号转导 单克隆抗体 小鼠抗兔IgG单克隆抗体的制备与应用 被引量:2 2008年 制备小鼠抗兔IgG的mAb,经标记HRP和FITC后,应用于ELISA、Western blot、免疫组织化学染色试验以及FCM。以正常兔IgG为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过常规B淋巴细胞融合技术,获得两株分泌抗兔IgG mAb的杂交瘤细胞株,间接ELISA腹水效价均达1×10-7,且亚类均为IgG1(κ)。抗体经鉴定、纯化后,以改良的过碘酸钠法标记HRP,本室常规方法标记FITC。FITC标记的2A1 mAb的F/P值为4.1,2F11的F/P值为2.7。HRP标记抗体的效价和工作浓度分别:2A1为1:25600和1:3200,2F11为1:102400和1:25600。在相同工作浓度条件下,ELISA、Western blot的实验结果,HRP标记的2F11 mAb明显优于商品化抗兔pAb,而且,2A1和2F11 mAb经标记后还可用于免疫组化和FCM,显示出很好的应用前景。 张葵 汪涛 李琦 庄然 宋朝君 李永明 金伯泉关键词:单克隆抗体 兔IGG 辣根过氧化物酶 抗3种标签蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量:5 2005年 目的:制备并鉴定抗GST、His×6及FLAG的单克隆抗体(mAb)。方法:分别以含GST、His×6及FLAG标签的融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗相应标签蛋白的mAb。用Westernblot检测mAb对变性融合蛋白的反应性。用流式细胞术(FCM)检测抗FLAGmAb对细胞膜表面融合蛋白的反应性。结果:共获得12株可稳定分泌抗3种标签蛋白mAb的杂交瘤细胞(其中5株可分泌抗GSTmAb,5株可分泌抗His×6mAb,2株可分泌抗FLAGmAb)。11株mAb均可用于相应融合蛋白的Westernblot检测。1株抗FLAGmAb检测细胞膜表面融合蛋白的阳性率,与商品化的mAbM2相接近。用1株抗His×6mAb制备亲和层析柱,并用于纯化IL-8-His融合蛋白,也获得较满意的结果。结论:成功地制备了抗GST、抗His×6及抗FLAG的mAb,为含标签的融合蛋白的研究和应用提供了重要的工具。 徐竹蔚 刘莹 户义 朱参胜 张圆 宋朝君 许晓光 金伯泉关键词:GST FLAG 单克隆抗体