宋颖琦
- 作品数:7 被引量:135H指数:5
- 供职机构:哈尔滨工业大学理学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- AtPIP5 K2基因参与拟南芥盐胁迫的调节过程被引量:2
- 2006年
- 植物在长期进化过程中演化出不同机制来适应环境中的各种胁迫,如盐碱、干旱等.该研究从拟南芥T-DNA插入突变体库中筛选到一个对盐反应不敏感的突变株系eto(enhanced tolerance to osmotic stress),种子萌发和幼苗生长试验表明呦突变株系早期生长发育对盐胁迫不敏感.TAIL-PCR分析表明eto突变株系中T-DNA插入在拟南芥1号染色体上(BAC F3M18的27502位置),位于拟南芥AtIg77740基因起始密码子前487bp处,该基因编码磷脂酰肌醇-4-磷酸5-激酶(AtPIP5K2),共分离分析表明T-DNA插入与盐不敏感性紧密连锁.以野生型拟南芥总RNA为模板,克隆拟南芥AtPIP5K2基因cDNA,其开放读码框为2265bp,编码755个氨基酸.与已报道物种PIPKs基因氨基酸序列比较分析表明,AtPIP5K2与植物PIPKs基因氨基酸相似性高达62%~75%,但与其他生物物种PIPKs基因之间的氨基酸相似性仅为33%~37%;AtPIP5K2推导的氨基酸序列中含有植物PIPKs基因所具有的高度保守区域“PIPKc”、“MORN repeat”.进一步分析表明AtPIP5K2基因在拟南芥根及莲座叶片中表达量较强,并且由于T-DNA的插入,使eto突变株系与野生型相比,其AtPIP5K2基因过量表达,表明AtPIP5K2基因编码的产物可能参与调节拟南芥适应盐胁迫的调节反应.
- 宋颖琦杨谦秦跟基瞿礼嘉
- 关键词:拟南芥盐胁迫TAIL-PCRCDNA
- 农杆菌介导的拟南芥AtMIPS基因启动子片段的克隆、序列分析及转基因植株的获得
- 以野生型拟南芥基因组DNA为模板,克隆得到拟南芥肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因(AtMIPS)启动子片段,全长为1740bp.利用PLACE数据库及DNASTAR软件对AtMIPS启动子元件进行分析,其中具有拟南芥发育早期...
- 宋颖琦杨谦
- 关键词:拟南芥融合蛋白克隆
- 文献传递
- 磷脂酶在植物逆境胁迫信号传导中的作用被引量:15
- 2006年
- 磷脂酰肌醇是构成细胞膜的重要组分,它在磷脂酶的作用下水解产生三磷酸肌醇、二酰基甘油、磷脂酸、溶血磷脂、不饱和脂肪酸等,不仅可以作为磷脂的合成原料,而且在细胞感受外界刺激及其信号传导过程中也起着重要作用.磷脂酰肌醇信号传导途径与光合作用、激素调控等影响植物生长发育过程及抗逆信号传导关系密切,由于磷脂酶的活性直接影响这些信号分子的产生,磷脂酶在磷脂酰肌醇信号传导途径中处于一个中心地位,根据磷酯不同水解位点所分类的磷脂酶PLA2,PLC和PLD具有多种同功酶形式,分别在植物生长发育的不同阶段及对外界环境因子应答的信号传导过程中起着重要的调节作用.
- 宋颖琦杨谦
- 关键词:磷脂酶植物逆境胁迫信号传导
- 拟南芥肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因的克隆表达被引量:6
- 2005年
- 以野生型拟南芥总RNA为模板,逆转录PCR反应获得拟南芥肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因cDNA(AtMIPS1),开放读码框为1533 bp,编码510个氨基酸.与已报道物种MIPS基因氨基酸序列比较分析表明,AtMIPS1与植物MIPS基因的氨基酸同源性和相似性较高达86%~90%与95%~96%,并含有MIPS基因的保守区域'334SYNHLGNNDG'.将该cDNA序列不改变阅读框架克隆到pET28a(+)原核表达载体上,SDS-PAGE结果表明:在0.12g/L IPTG诱导2 h的条件下得到最佳的蛋白表达效果,AtMIPS1的成功表达为其功能研究打下基础.
- 宋颖琦杨谦
- 关键词:拟南芥克隆原核表达
- 哈茨木霉几丁质酶基因的cDNA克隆及表达被引量:8
- 2008年
- 为了研究全新几丁质酶基因Chit37(DQ647957)的特性与功能,将该基因在大肠杆菌中进行了外源表达.通过构建哈茨木霉(Trichoderma harzianum)菌丝生长期的cDNA文库及对部分表达序列标签序列的测定与生物信息学分析,成功获得了基因Chit37的全长cDNA序列.该基因的编码框长度为1032bp,编码343个氨基酸,理论分子量为36.6kDa.采用PCR扩增的方法克隆该基因并将其构建到原核表达载体pET28(a+)上,构建了原核表达载体pET-Chit37并转化宿主菌BL21(DE3),菌落PCR及酶切鉴定均证实转化子的正确性,重组蛋白经IPTG诱导后获得表达.优化的表达条件为终浓度0.1mM IPTG诱导培养4h.
- 黄彩红杨谦宋颖琦
- 关键词:哈茨木霉几丁质酶
- 纤维素降解菌的筛选及其降解特性的研究被引量:97
- 2002年
- 在自然环境和秸秆降解物中筛选出 3种分解纤维素能力较强的木霉、青霉和曲霉 ,将 3种菌株以不同的组合形式在羧甲基纤维素钠为唯一碳源的产酶培养基中进行产酶特性的研究 ,计算其对玉米秸秆粉中粗纤维的利用率并观测玉米秸秆粉的降解状态 .其中木霉与青霉的混合培养在纤维素筛选培养基上培养 2 4h后即可生长 ,在发酵培养基中培养 72h后达到产酶高峰 ,酶活可达 3.116u ,对粗纤维的利用率为 6 8%,远超过青霉和木霉的单独培养 ;木霉与曲霉二者混合 ,木霉与青霉、曲霉三者混合培养的产酶效果也要超出青霉和曲霉的单独培养 ,但与木霉相比无明显差异 .实验结果表明优良菌株的混合培养会增加其对纤维素的降解能力 ,为实际生产中有效的处理农作物秸秆提供了理论依据 .
- 宋颖琦刘睿倩杨谦宋金柱杜金哲
- 关键词:纤维素降解菌降解特性木霉青霉曲霉废弃物处理
- 对哈茨木霉转化子菌体形态观察及抗药性测定被引量:7
- 2002年
- 为深入了解木霉转化子的抗药性,对哈茨木霉及其转化子在PDA培养基上进行平板点植培养和小室培养,其菌体形态于40倍显做镜下观察,结果显示,转化子的菌落形态、菌丝形状、菌丝横隔间距、孢子颜色、产孢数量均发生一定变化.对传代3年转化子抗药性的测定结果表明,哈茨木霉野生菌在多菌灵质量浓度为1.0μg/mL时不能生长,而其转化子在多菌灵质量浓度高达1 000.0μg/mL时仍能正常生长,说明此转化子仍具抗药性且抗药性稳定.
- 迟玉杰杨谦宋颖琦
- 关键词:多菌灵菌体形态抗药性植物病原菌生物防治