崔金生
- 作品数：12 被引量：44H指数：3
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 论实验室的文化建设被引量：19
- 2008年
- 关于进行实验室文化建设，首先要理解实验室文化的内涵并认识其特征和功能，其次要明确实验室文化建设的理念和进行精心策划，最后从各个方面论述了实验室文化建设中应注意的问题。
- 郭文龙朱瑞良马荣德崔金生
- 关键词：实验室文化建设
- 支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立和应用被引量：4
- 2009年
- 根据支气管败血波氏杆菌ptxA基因设计1对引物,扩增特异的872bp核酸片段,建立了应用PCR检测支气管败血波氏杆菌的方法。特异性试验结果表明,3株支气管败血波氏杆菌参考菌株均能扩增出872bp特异性的核酸片段,兔源性的大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,PCR的最低检出限量为210个支气管败血波氏杆菌。利用建立的PCR检测方法对22株从山东省泰安地区某兔场采集的疑似兔支气管败血波氏杆菌病病兔鼻黏液棉拭子进行检测,结果19株为阳性。并同时进行普通血清学方法和细菌学方法,对检测结果进行了比较,结果显示,PCR方法阳性检出率高于其他检测方法。
- 肖海君崔金生翁立雪王小娥杨春晓曲朝杰朱彩霞刘冠华朱瑞良
- 关键词：支气管败血波氏杆菌PCR
- 支气管败血波氏杆菌外膜蛋白的提取及其免疫效果的检测被引量：3
- 2008年
- 本研究以小鼠为实验动物模型,研究支气管败血波氏杆菌的外膜蛋白(OMP)和其中的有效保护抗原成分(OMP68)的免疫原性及免疫保护作用。本研究利用改进的Wooldridge的方法提取了支气管败血波氏杆菌P11和P13的OMP,利用SDS-PAGE比较了2株之间差异,采用Western-blotting进行了分析并确定了P13菌株OMP(P13-OMP)中的有效保护性抗原成分,采用电洗脱方法获的分子量为68kD的P13-OMP有效保护抗原成分(OMP68),然后制备了油乳剂P13的全菌、P13-OMP和OMP68免疫抗原。抗体动态变化:将清洁级小鼠70只随机分成7组,10只/组,用油乳剂P13的全菌和不同剂量的P13-OMP和OMP68免疫抗原分别免疫,采用间接ELISA检测免疫小鼠的相应抗体水平并分析抗体动态变化;主动免疫保护试验:将清洁级小鼠80只随机分成8组,10只/组,分别采用制备的油乳剂P13-OMP(OMP25μg/只)、OMP68(25μg/只)和P13菌体免疫抗原在免疫10d后,分别用100LD50的P11和P13腹腔攻毒,然后统计保护率并分析免疫原所提供的免疫保护力。免疫P13-OMP和OMP68油乳剂抗原后,7d时,抗体水平开始逐渐上升,42d时,抗体水平分别达到215.3和214.8,然后逐渐下降,70d时,抗体水平分别达到29.1和210.2。主动免疫时,P11和P13攻毒的P13-OMP免疫组分别均得到9/10和9/10的保护,OMP68免疫组分别均得到9/10和10/10的保护,而P13全菌免疫组分别得到4/10和6/10保护,对照组全部死亡。P13-OMP和OMP68抗原均具有良好的免疫原性和免疫保护作用,为支气管败血波氏杆菌OMP亚单位疫苗的研制奠定了良好的理论基础。
- 肖海君闫振贵崔金生刘冠华王小娥杨春晓朱瑞良
- 关键词：支气管败血波氏杆菌小鼠外膜蛋白免疫原性
- 2种益生菌菌体OMP对新城疫病毒免疫增强作用被引量：1
- 2009年
- 为研究乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP的免疫增强作用,本试验利用超声波细胞粉碎器破碎、TritonX-100处理技术提取了乳酸杆菌与地衣芽孢杆菌OMP,通过考马斯亮蓝G-250法测得两者菌体OMP含量,进行了SDS-PAGE电泳检测,然后将提取的菌体OMP以不同的方式、含量作为免疫增强剂与新城疫病毒尿囊液混合后再与油佐剂以1∶3比例制备成免疫原,免疫7日龄雏鸡,通过持续10周的抗体检测、外周淋巴细胞比例(A)及白细胞吞噬指数(B)检测,判断菌体OMP对新城疫病毒具有免疫增强作用。结果,乳酸杆菌与地衣芽孢杆菌菌体OMP含量分别为2 323.5、867.6 mg/L;SDS-PAGE电泳试验得出分子量分别为6.4×104、8.6×104的乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP蛋白含量多,带的颜色较深,为起主要作用的蛋白;各试验组HI抗体效价免疫保护期远远高于单独使用新城疫LaSota株灭活油苗的对照组及空白组,差异显著(P<0.01或P<0.05);各试验组外周淋巴细胞比例(A)及白细胞吞噬指数(B)均高于单独使用新城疫LaSota株灭活油苗的对照组及空白组,差异显著(P<0.01或P<0.05);同时还可以得出菌体OMP含量越高则HI抗体效价、淋巴细胞比例(A)、白细胞吞噬指数(B)均增高;不同菌体OMP混合免疫增强作用高于单独使用一种菌体OMP。由此表明乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP能显著增强ND疫苗的免疫效果,为今后研制免疫效果更好地ND疫提供了技术支持。
- 王小娥朱瑞良杨春晓崔金生肖海军王允超岳寿松
- 关键词：乳酸杆菌地衣芽孢杆菌外膜蛋白新城疫病毒免疫增强作用
- 蓝狐多重感染的病原学及主要病原的分子生物学特性被引量：1
- 2009年
- 2006-2007年期间,山东6地区规模化毛皮动物养殖场出现母狐空怀、流产,幼狐呼吸困难,鼻孔出血,气喘并伴有腹泻、死亡等症状,为探明病因,对发病场进行流行病学调查和送检的236份病料组织进行病原学检查,结果表明造成该病的主要原因是由绿脓杆菌(Pseudomonas aerudinosa)、沙门菌(Salmonella)、大肠杆菌(Escherichiacoli)和普通变形杆菌(Proteus vulgaris)共感染所致。这4种细菌单独感染、二重感染、三重感染和四重感染的平均感染率分别为50%、45.8%、3.8%和0.4%。在分离的4种细菌中以绿脓杆菌的分离率为最高,达到86%,对该病原又进行(G+C)mol%、16SrRNA序列同源性和系统发育分析,构建了包括9株邻近种属细菌在内的系统发育树,其中与绿脓杆菌(AJ249451)同源性最高,为99.2%,进一步确定该病原菌属于假单胞菌属中绿脓杆菌。本研究为目前规模化毛皮动物养殖场蓝狐病的原因提出了新的思路,为疾病的防治提供了依据。
- 崔金生朱瑞良阎振贵肖海君王小娥杨春晓
- 关键词：蓝狐绿脓杆菌分子生物学
- 我国免疫佐剂的研究进展被引量：1
- 2008年
- 免疫佐剂,是一类通过非特异性途径提高机体对抗原或微生物特异性反应的物质。本文介绍了各种免疫佐剂的研究概况,并结合佐剂研究和应用中存在的问题,对免疫佐剂的发展趋势作了展望。
- 刘悦竹王允超崔金生
- 关键词：免疫佐剂
- 禽波氏杆菌免疫荧光检测和抗体检测ELISA方法的建立与应用被引量：7
- 2008年
- 采用改良的Wooldridge法提取了禽波氏杆菌外膜蛋白(OMP),通过Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量为320μg/mL,SDS-PAGE电泳检测发现禽波氏杆菌P5株OMP含有5种成分,相对分子质量分别为58、47、41、36、24 ku;P8株OMP含有6种成分,相对分子质量分别为58、47、41、38、211、6 ku。将提取的禽波氏杆菌OMP免疫健康青紫兰兔,每周免疫1次,共免疫4次,获得了兔抗禽波氏杆菌OMP高免血清,以此高免血清建立了检测禽波氏杆菌的间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)方法,并对其工作条件进行了优化和筛选,试验结果表明间接ELISA抗原、抗血清最佳工作浓度分别为10μg/mL、1∶12 800,酶标二抗工作浓度为1∶5 000,最佳包被条件为4℃2、4 h,最佳封闭条件为37℃1、h;间接免疫荧光(IFA)兔高免血清释释度为1∶20,FITC标记羊抗兔IgG稀释度为1∶10,感作时间为45 min时,禽波氏杆菌特异性黄绿色荧光最清晰,非特异性荧光最弱。经临床检测证明该两种方法均具有简便、快速、特异性强的特点,为禽波氏杆菌病的流行病学、血清学调查和临床快速诊断奠定了基础。
- 杨春晓王小娥刘冠华肖海君崔金生朱瑞良
- 关键词：禽波氏杆菌OMP间接ELISA
- 枝原净对提高肉种鸡生产性能的研究被引量：2
- 2008年
- 目前，国内大多数肉种鸡场在育成期通过2～3次败血支原体（MG）活苗或灭活苗的接种来预防支原体病的发生^[1,2]，但由于MG疫苗不能预防滑液囊支原体（MS）的发生，同时疫苗诱导的抗体持续时间短，不能有效控制产蛋中后期支原体病的发生，故免疫过MG疫苗的种鸡群在产蛋中后期仍多见支原体病的发生。
- 朱瑞良崔金生杨春晓肖海君王小娥李勤修庄志伟程雨法
- 关键词：肉种鸡产蛋中后期支原体病滑液囊支原体败血支原体灭活苗
- “高热病”病猪细菌性病原的分离鉴定被引量：3
- 2008年
- 2006年-2007年对济宁地区不同养殖场(户)猪"高热病"进行流行病学调查,通过细菌病原学检查,从表现出"高热病"症状的患猪体内主要分离到5种细菌。通过对分离株的病原形态学、培养特征、生化特性和致病性等方面进行传统鉴定,结果表明,引起猪"高热病"的细菌性病原主要为大肠埃希菌(64.4%)、沙门菌(61.6%)、巴氏杆菌(34.9%)、猪丹毒杆菌(30.8%)和链球菌(34.2%),并且多呈混合感染。通过药敏试验测定,结果显示,多数细菌对环丙沙星、头孢噻肟有较高的敏感性,而对复合磺胺、青霉素等有不同程度的耐药性。
- 曹思军肖海君崔金生朱瑞良王汝义马荣德
- 关键词：细菌性病原
- 鸡新城疫与大肠杆菌病混合感染的诊断与防治
- 2008年
- 鸡新城疫是由鸡新城疫病毒引起的一种急性、高度接触性传染病，死亡率较高。我国目前普遍采用以新城疫疫苗接种为主的综合防制措施，在很大程度上控制了该病的大规模流行，但由于某些养殖场用的免疫程序不合理或免疫方法不当，鸡新城疫仍时有发生。鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌引起的一种传染病，大肠埃希氏菌的各个血清型是各种动物肠道内的常驻菌，因此其分布极为广泛。
- 曹思军肖海君崔金生
- 关键词：鸡新城疫病毒鸡大肠杆菌病接触性传染病大肠埃希氏菌综合防制措施
