康向东
- 作品数：78 被引量：346H指数：11
- 供职机构：上海中医药大学附属普陀医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 实时荧光定量PCR检测抑癌基因PHBI在胃肠肿瘤中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的检测抑癌基因PHBI在胃肠肿瘤中的表达情况,探讨PHBI在胃肠肿瘤的发生和发展过程中所起的作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术进行检测。结果抑癌基因PHBI在胃肠肿瘤组织的表达比在癌旁组织中有显著增高,差异有统计学意义(P<0.01);另外对照胃肠肿瘤组织病理切片,发现低分化胃癌组织中PHBI的表达比中分化胃癌组织高,差异有统计学意义(0.01
- 季青张隆孙健康向东
- 关键词：实时荧光定量聚合酶链反应胃肠肿瘤
- 结肠癌患者外周血microRNA-21、淋巴细胞亚群及炎性因子的相关性研究被引量：15
- 2021年
- 目的探讨结肠癌患者外周血microRNA-21(miR-21)表达及淋巴细胞亚群细胞数在结肠癌诊断中的意义。方法利用实时荧光定量PCR技术检测53例结肠癌患者(结肠癌组)和53例健康对照者(对照组)血浆中miR-21的表达,受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估miR-21早期诊断结肠癌的临床价值。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群细胞数,酶联免疫吸附法检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)水平。分析结肠癌患者外周血中miR-21表达和淋巴细胞亚群细胞数变化与临床病理特征的关系。对结肠癌患者外周血中miR-21水平、淋巴细胞亚群与TNF-α和IL-6水平作Pearson相关性分析。结果结肠癌组患者血浆中miR-21表达水平高于对照组(P<0.01)。结肠癌患者血浆中miR-21水平在肿瘤分化程度、肿瘤分期和淋巴结转移方面比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结肠癌患者的ROC曲线下面积为89.5%(95%CI:0.84~0.95)。结肠癌组患者外周血CD3^(+)、CD4^(+)和CD19^(+)细胞数及CD4^(+)/CD8^(+)比值较对照组均下降,而CD8^(+)细胞数则升高(均P<0.01)。结肠癌患者外周血中淋巴细胞亚群水平在肿瘤分期方面比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,miR-21水平与IL-6和TNF-α水平均呈正相关(r=0.48,P<0.01;r=0.40,P<0.01),淋巴细胞亚群CD3^(+)细胞数、CD4^(+)细胞数、CD19^(+)细胞数和CD4^(+)/CD8^(+)比值与IL-6(r=-0.55,P<0.01;r=-0.64,P<0.01;r=-0.32,P=0.001;r=-0.58,P<0.01)和TNF-α(r=-0.46,P<0.01;r=-0.54,P<0.01;r=-0.34,P<0.01;r=-0.50,P<0.01)水平均呈负相关,CD8^(+)细胞数与TNF-α呈正相关(r=0.20,P=0.035)。结直肠癌患者血浆miR-21水平与CD3^(+)细胞数、CD4^(+)细胞数、CD19^(+)细胞数和CD4^(+)/CD8^(+)比值呈负相关(r=-0.57,P<0.01;r=-0.59,P<0.01;r=-0.43,P=0.020;r=-0.48,P<0.01)。结论结肠癌患者外周血miR-21水平上调,细胞因子水
- 陈自喜张孟哲朱兆伟相芬芬吴蓉康向东
- 关键词：结肠癌MICRORNA-21淋巴细胞亚群炎性因子
- 乳腺癌循环肿瘤细胞分离鉴定试剂盒的建立被引量：2
- 2015年
- 目的探讨乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)分离鉴定试剂盒中上皮细胞黏附分子(Ep CAM)免疫脂质磁球及人乳腺珠蛋白(h MAM)单克隆抗体在乳腺癌CTC分离鉴定中的应用价值。方法将乳腺癌MCF-7细胞混于健康志愿者的新鲜血样中,采用免疫磁球分离技术分析Ep CAM免疫脂质磁球对乳腺癌细胞的分离效果。在强生Cell TracksAuto PrepCTC检测仪(简称强生CellsearchTM系统)上进行Ep CAM免疫脂质磁球和强生磁球对MCF-7细胞捕获效率的模拟实验及乳腺癌患者血液的临床检测。结果荧光显微镜的观察结果显示Ep CAM免疫脂质磁球的细胞捕获能力明显强于无抗体修饰的纳米磁球。激光共聚焦显微镜的观察结果显示Ep CAM抗体修饰可显著增强磁球捕获MCF-7细胞的效率和特异性。模拟实验结果显示Ep CAM免疫脂质磁球对10、20、40、80、150、200个MCF-7细胞的捕获结果与强生磁球接近;对乳腺癌患者血液中的CTC捕获效率与强生磁球相当,部分病例要明显优于强生磁球。结论构建的基于Ep CAM免疫脂质磁球和h MAM单克隆抗体的CTC分离鉴定试剂盒对乳腺癌患者血液中的CTC具有较高的捕获效率,这将为实现乳腺癌早期诊断、术前、术后分析及治疗效果检测提供了有力的支撑。
- 张健冯晓燕孙亭亭王凯张希锐高杰锋梁晓飞康向东彭俊杰张贺秋苗朝良沈鹤柏
- 关键词：循环肿瘤细胞上皮细胞黏附分子人乳腺珠蛋白
- 产ESBLs大肠埃希菌对氨基糖苷类药物的耐药性及其耐药基因序列分析被引量：7
- 2016年
- 目的研究云南玉溪市江川地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌对氨基糖苷类抗菌药物的耐药性及其耐药基因表达的频率,并对其耐药基因进行测序分析。方法采用纸片扩散法检测32株产ESBLs大肠埃希菌对庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药性。采用聚合酶链反应(PCR)检测7种氨基糖苷类修饰酶(AME)基因[aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰad、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ]和6种16S rRNA甲基化酶基因(armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA),采用双脱氧末端终止法对aac(3)-Ⅱ基因进行测序分析。结果 32株产ESBLs大肠埃希菌对庆大霉素、阿米卡星、奈替米星、卡那霉素和妥布霉素的耐药率分别为100%、0%、0%、18%和87%。有6株菌株同时携带2种AME基因。从32株产ESBLs大肠埃希菌中检出aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ4种AME基因,阳性率分别为100%、9.4%、6.2%和3.1%;未检出16S rRNA甲基化酶基因。32株产ESBLs大肠埃希菌中有4株发生相同的aac(3)-Ⅱ突变,分别为G232A、T251C、G580A和T612A。8株不产ESBLs大肠埃希菌均未检出AME基因及16S rRNA甲基化酶基因。结论云南玉溪市江川地区产ESBLs大肠埃希菌耐氨基糖苷类药物与AME基因表达有关,奈替米星的耐药率增加可能与aac(3)-Ⅱ基因突变有关。
- 吴蓉吕玉江戴俊华相芬芬孔倩倩钱宁张贵留杨玉玲陈丽春康向东
- 关键词：大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶基因
- 淋病奈瑟菌的耐药性及氟喹诺酮耐药基因突变的分析被引量：5
- 2005年
- 目的了解本地区淋病奈瑟菌(NG)流行株对5种抗生素的敏感性,分析NG的耐药性特点,为淋病的治疗提供实验依据。方法纸片扩散法检测108株NG对5种抗生素的敏感性,用产色头孢硝噻吩法检测β内酰胺酶,用聚合酶链反应(PCR)扩增NGgyrA和parC基因的氟喹诺酮耐药决定区(QRDR)相关序列并作测序分析。结果108株NG中检出84株对青霉素耐药(77.8%),由质粒介导的产青霉素酶NG(PPNG)为60株(55.6%);四环素耐药率为61.1%,其中质粒介导高度耐四环素NG(TRNG)为28株,占25.9%;环丙沙星耐药率为83.3%;未发现对大观霉素和头孢曲松的耐药菌株。耐氟喹诺酮的22株NG均发生gyrA基因的91、95氨基酸位点突变,原91位氨基酸全部由丝氨酸转变为苯丙氨酸,parC基因的氨基酸突变位点分别为86、87和91。结论青霉素、四环素以及氟喹诺酮类药物已不宜作为本地区治疗淋病的常规药物;大观霉素、头孢曲松可作为治疗淋病的首选药物,基因检测分析证明了NGgyrA和parC基因突变与氟喹诺酮耐药性有关。
- 吴蓉康向东戴俊华郑瑾吴译筠
- 关键词：淋病奈瑟菌耐药性微生物敏感性试验氟喹诺酮
- 革兰阴性杆菌16SrRNA甲基化酶基因检测及作用研究
- 吴蓉张隆戴俊华康向东
- MyD88抑制剂在制备治疗乳腺癌和逆转乳腺癌紫杉醇耐药的药物中的应用
- 本发明提供了MyD88抑制剂在制备治疗乳腺癌和逆转乳腺癌紫杉醇耐药的药物中的应用。本发明验证了抑制MyD88基因的表达可以增加乳腺癌患者对紫杉醇的敏感性进而提高治疗乳腺癌的效果，而熊果酸可以有效抑制MyD88基因的表达，...
- 吴蓉康向东相芬芬张涛刘荣荣
- 2型糖尿病患者C-反应蛋白与纤维蛋白原、体重指数的关系被引量：4
- 2006年
- 目的探讨2型糖尿病(DM)患者C-反应蛋白(CRP)与纤维蛋白原(FIB)、体重指数(BM I)间的关系。方法对92例2型DM患者和63名健康者同时检测CRP、FIB并测量他们的身高、体重。结果2型DM患者的CRP、FIB、BM I均明显升高,与正常对照组差异有显著性(P<0.01)。CRP同BM I(r=0.412,P<0.001)、FIB(r=0.735,P<0.001)呈正相关,同时对CRP与FIB的实验数据进行回归分析(F=105.96,P<0.001),结果与国外报道的2型DM患者的CRP是FIB的独立预测因子的结论相一致。结论CRP为2型DM的病因、治疗效果及其大血管并发症的早期诊断、预防、治疗及预后评价手段提供了理论依据,定期监测2型DM患者血清中的CRP浓度有重要的临床价值。
- 李倩崔巍于采君姜志凤康向东
- 关键词：2型糖尿病C-反应蛋白纤维蛋白原体重指数
- 一种HPV16E7单克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种HPV16E7单克隆抗体及其制备方法和应用，本发明从临床标本中克隆得到正确的HPV16E7基因序列，该基因经正确插入pET28a(+)原核表达质粒后，在IPTG诱导下在BL21(DE3)大肠杆菌中以可溶性...
- 康向东吴蓉孔倩倩相芬芬詹月萍许建蒋洁敏乐红红郝文斌
- 文献传递
- 抗HPV18 E6多肽单克隆抗体的制备及鉴定
- 2016年
- 目的制备特异性抗人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）18 E6多肽抗体。方法通过在线分析软件AB-Cpred和Bcepred预测 HPV 18E6特异性多肽序列，将多肽序列与牛血清蛋白（bovine albumin，BSA）偶联，以偶联后多肽为抗原免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备抗 HPV18 E6多肽单克隆抗体；以 HPV18阳性分泌物标本DNA为模板，聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）获得 HPV 18 E6基因，将该基因插入表达质粒 pET-28a，转化大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达；采用 Western Blot方法鉴定抗 HPV18 E6多肽抗体与目的蛋白的反应性。结果建立的杂交瘤细胞株能稳定产生 HPV18 E6多肽单克隆抗体；重组表达质粒 pET-28a-HPV18 E6测序证明构建正确，成功表达 HPV18 E6蛋白；纯化后的抗 HPV 18 E6多肽抗体可特异性识别原核表达 HPV 18 E6蛋白。结论成功制备抗 HPV18 E6多肽序列，该抗体具有较好的特异性。
- 孔倩倩唐振华相芬芬詹月萍许健吴蓉康向东
- 关键词：人乳头瘤病毒多肽单克隆抗体
