廖丹
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌MycP1蛋白的原核表达及其对巨噬细胞的毒性作用
- 2012年
- 目的:构建结核分枝杆菌MycP1蛋白原核表达系统。方法:构建pGEX-4T-1-Rv3883c重组质粒,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Westernblot法检测目标蛋白的表达情况。目标蛋白经亲和层析纯化后,以不同质量浓度MycP1作用于小鼠巨噬细胞ANA-1,48h后XTT法检测活细胞数,同时测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,以评价其细胞毒性。结果:成功构建pGEX-4T-1-Rv3883c质粒,该质粒能在大肠杆菌中表达,经鉴定,表达的融合蛋白为目标蛋白MycP1。该融合蛋白作用后可使ANA-1活细胞数下降(F=34.327,P<0.001),培养上清液中LDH活力升高(F=336.720,P<0.001)。结论:成功构建了MycP1原核表达系统,目标蛋白对巨噬细胞有一定的毒性效应。
- 黄丹丹鲍朗杨晓玲邓仪昊廖丹
- 关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞细胞毒性
