张剑
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
- 供职机构：清华大学化学工程系生物化工研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- H_2O_2对热带假丝酵母醇氧化酶的影响及其作用机理分析被引量：3
- 2004年
- 考察了H2 O2 对热带假丝酵母代谢烷烃生产二元酸过程中醇氧化酶 (fattyalcoholoxidase ,AOX)的影响。研究表明 :2mmol L和 5mmol L的H2 O2 对AOX的比酶活有明显的促进作用 ,分别比对照提高了 68 2 %和 82 9%。研究还发现 ,H2 O2 是以超氧阴离子自由基等形式在胞内存在 ,并对H2 O2 在代谢过程中的作用机理进行了分析。
- 张剑李春高弘曹竹安
- 关键词：H2O2热带假丝酵母生物法生产长链二元酸
- 热带假丝酵母肉毒碱乙酰转移酶酶活测定及重组菌的性质被引量：2
- 2005年
- 建立了快速部分提纯和测定热带假丝酵母中肉毒碱乙酰转移酶 (carnitine acetyltransferase, CAT) 酶活的方法. 并考察了重组热带假丝酵母的CAT酶活、产酸能力及烷烃转化率. 结果表明, 重组菌的 CAT酶活比原始菌降低了45%, 胞内二元酸通过β 氧化的无益消耗得到有效抑制. 相应地, 重组菌的产酸能力和烷烃转化率分别提高了11%和12%.
- 张剑高弘李春曹竹安
- 关键词：长链二元酸重组菌热带假丝酵母
- 肉毒碱乙酰转移酶基因敲除对长链二元酸生产代谢过程的影响被引量：7
- 2005年
- 在利用热带假丝酵母发酵生产长链二元酸的过程中 ,脂肪酸将进入 β 氧化途径 ,代谢产生能量 ,从而降低产物收率。首次以负责运输的肉毒碱乙酰转移酶为改造目标 ,在肉毒碱乙酰转移酶基因中插入潮霉素B抗性基因 ,构建DNA转化质粒 ,并进行一次同源重组 ,得到肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝敲除的基因工程菌。根据摇瓶实验结果 ,该基因工程菌与原始菌株相比 ,十三碳二元酸的产量与摩尔转化率分别提高了 13 0 %和 11 8%。
- 高弘张剑华玉涛李春曹竹安
- 关键词：十三碳二元酸热带假丝酵母同源重组代谢调控
- CAT基因敲除对热带假丝酵母产DCA13代谢网络的影响被引量：3
- 2006年
- 肉毒碱乙酰转移酶在脂肪酸β-氧化过程中起着重要作用.利用同源重组技术,构建了热带假丝酵母CAT基因单拷贝缺失菌CZ-15和双拷贝缺失菌CKC-11后,发现CZ-15的β-氧化过程受到抑制,与原始菌F10-1相比,十三碳二元酸的产量和烷烃转化率都得到了明显提高,菌体生长情况与F10-1基本一致;CKC-11则无法代谢烷烃,菌体生长也受到了较大的影响.采用代谢动力学模型对发酵数据进行了计算与分析,实验结果与模型相符.根据实验和模型计算结果完善了热带假丝酵母代谢葡萄糖和十三碳二元酸的途径.
- 高弘黄英明刘铭张剑华玉涛曹竹安
- 关键词：十三碳二元酸热带假丝酵母代谢网络重组菌
