张桓瑜
- 作品数：7 被引量：17H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- 缺氧诱导丝裂原因子在高氧诱导肺上皮和成纤维细胞凋亡中的作用及意义被引量：1
- 2013年
- 目的探讨缺氧诱导丝裂原因子（HIMF）在高氧诱导肺上皮和成纤维细胞凋亡中的作用及其意义。方法肺泡Ⅱ型上皮MLE-12细胞和成纤维NIH／3T3细胞分别转染靶向HIMF的小干扰RNA后，置于正常氧（21％O2）、高氧（85％O2）条件下培养3—18h，采用实时定量聚合酶链反应（Real．timePCR）法检测细胞中HIMFmRNA水平，运用吖啶橙-溴化乙锭染色法、Hochest33258染色法及膜联蛋白V（AnnexinV）-碘化丙锭（PI）双染流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果与对照组比较，高氧暴露3、6、9、18h后，MLE-12和NIH／3T3细胞中HIMFmRNA水平分别增高2．783—5．023倍（P〈0．05）、2．864～15．162倍（P〈0．05），细胞凋亡率增高1．5～2．3倍（P〈0．05）、1．1～2．1倍（P〈0．05）；沉默HIMF基因后，高氧诱导的MLE．12和NIH／3T3细胞凋亡率分别进一步升高1．5～2．5倍（P〈0．05）、1．3—2．0倍（P〈0．05）。结论HIMF基因可能通过对抗高氧诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞和成纤维细胞凋亡，参与高氧肺损伤的发病机制。
- 杨春雷张桓瑜普佳睿郑丽端童强松李爽
- 关键词：肺泡上皮细胞成纤维细胞小干扰RNA
- 微小RNA145靶向抑制HIF-2α表达对神经母细胞瘤增殖、凋亡及血管生成的影响
- 第一部分miR-145在神经母细胞瘤中的表达及其真核表达载体的构建 目的：研究miR-145在神经母细胞瘤临床标本中的表达,构建miR-145表达载体。 方法：收集5例神经母细胞瘤患者手术组织标本,通过real-ti...
- 张桓瑜
- 关键词：神经母细胞瘤血管生成RNA干扰技术低氧诱导因子-2
- 文献传递
- 微小RNA-7对人神经母细胞瘤侵袭和转移能力的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨微小RNA-7（miR-7）对神经母细胞瘤侵袭和转移能力的影响。方法将化学合成的miR-？在阳离子脂质体Lipofectamine2000的介导下，瞬时转染人神经母细胞瘤细胞株，实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）检测细胞中miR-7表达水平；黏附实验和Transwell小室实验检测体外癌细胞游走和侵袭能力；裸鼠转移模型检测体内癌细胞转移能力。结果化学合成miR-7转染神经母细胞瘤后，miR-7表达上调1128．3倍（P〈0．01），细胞黏附能力下降51．3％（P〈0．01），细胞侵袭能力下降52．9％（P〈0．01），裸鼠体内转移能力下降。结论miR-7转染细胞后能抑制瘤细胞的侵袭和转移能力。
- 张桓瑜鹿洪亭董蒨杨传民郝希伟苏南
- 关键词：神经母细胞瘤
- 人pre-miR-145真核表达载体的构建及其对胃癌细胞游走、侵袭活性的影响被引量：3
- 2011年
- 目的构建人微小RNAl45（miR-145）前体的真核表达载体，探讨其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法根据人pre-miR-145序列，合成两条互补的寡核苷酸链，退火后连接人pPG-miR-EGFP载体，转化扩增后进行测序鉴定；重组质粒在阳离子脂质体Lipofectamine2000的介导下，瞬时转染人胃癌细胞株SGC-7901，实时定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞中miR．145表达水平，黏附实验和Transwell小室实验检测癌细胞游走、侵袭能力。结果所构建的pPG—miRl45-EGFP载体中插入基因片段与设计序列完全匹配；重组质粒转染SGC．7901细胞后，miR-145表达分别上调20．45倍（P〈0．01），细胞黏附能力分别下降51．5％（P〈0．01），细胞侵袭能力分别下降30．4％（P〈0．01）。结论成功构建人pre—miR-145真核表达载体，转染胃癌细胞过表达后，能抑制癌细胞的游走和侵袭能力。
- 张桓瑜梁铸林郑丽端童强松董继华
- 关键词：胃癌
- 缺氧诱导丝裂原因子在小鼠支气管肺发育不良模型中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨缺氧诱导丝裂原因子（HIMF）在小鼠支气管肺发育不良（BPD）模型中的表达及意义.方法 32只新生昆明小鼠随机分为对照组（n=16）、高氧暴露组（n=16）,分别置于正常空气（21%,O2）及氧箱（85%,O2）中,于暴露后第7、14、21、28天每组随机选取4只,采用苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织形态学改变,运用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot方法检测肺组织中HIMF mRNA和蛋白表达水平.结果 对照组肺泡逐渐发育成熟,大小均匀,肺间质变薄 高氧暴露组肺泡隔增厚、肺泡融合,放射状肺泡计数减少31.1%～65.3% 与对照组比较,高氧暴露7、14、21 d后肺组织HIMF mRNA和蛋白水平分别增高2.435～2.528倍（P〈0.05）、2.45～5.42倍（P〈0.05）,而高氧暴露28 d后分别下调52.81%（P〈0.05）、74.60%（P〈0.05）.结论 成功建立小鼠BPD模型,HIMF基因表达异常可能参与BPD的发生、发展过程.
- 普佳睿吴泽华童强松胡涛梅红张桓瑜杨春雷郑丽端
- 关键词：支气管肺发育不良基因表达
- miRNAs的表达在神经母细胞瘤转移过程中的作用及意义被引量：2
- 2013年
- 目的检测荷瘤鼠的神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）原发瘤与转移瘤中微小RNA（miRNA）的表达差异情况，探讨异常表达的miRNA参与神经母细胞瘤发生侵袭和转移的可能分子机制。方法建立神经母细胞瘤原发瘤和转移瘤的裸鼠模型，获取原发瘤和转移瘤的组织，分别提取总RNA和小分子RNA，在miRNA微阵列芯片中杂交检测，通过芯片扫描和数据分析并通过实时荧光定量Rrr_PCR验证，获得神经母细胞瘤原发瘤与转移瘤异常miRNAs表达谱。结果筛选出54个可能与神经母细胞瘤侵袭和转移的相关的miRNAs，表达上调35个，下调19个。其中，miR-483—3p、miR-99b、miR-145、miR602、miR-26b、miR125a-3p、let-7f在神经母细胞瘤原发瘤中与转移瘤中的表达的差异倍数分别为9．9583、3．2086、4．9442、4．4085、0．1380、0．1463和0．2864，基因芯片显著性分析指数分别为26．8754、22．8393、22．2147、8．5906、-24．5380、-10．5580和-12．6103，差异有统计学意义（P〈O．01）。结论筛选出的在神经母细胞瘤原发瘤与转移瘤中表达有差异的miRNAs可能在神经母细胞瘤的侵袭和转移过程中发挥着重要作用，为研究神经母细胞瘤的转移和治疗提供了新的靶点。
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- 关键词：神经母细胞瘤肿瘤转移聚合酶链反应
- 人肠凝集素-1真核表达载体的构建及其在胃癌细胞中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的构建人肠凝集素-1（ITLN-1）基因的真核表达载体，观察其在胃癌细胞中的表达。方法采用逆转录聚合酶链反应（1iT-PCR）法扩增ITLN-1eDNA，定向克隆至真核表达载体pEGFP—N1，测序鉴定；在脂质体的介导下，重组质粒瞬时转染人胃癌细胞株SGC-790172h后，West—ernblot法检测细胞培养上清中ITLN．1表达，四甲基偶氮唑盐比色（MTr）法、Transwell小室实验检测癌细胞增殖、侵袭活性。结果真核表达载体pEGFP—ITLN-1转染SGC-7901细胞72h后，ITLN-1蛋白表达上调5．72倍（P〈0．01），细胞增殖活性降低52．8％（P〈0．01），细胞侵袭能力下调58．1％（P〈0．01）。结论成功构建人ITLN-1真核表达载体，转染胃癌细胞过表达后，能抑制癌细胞的增殖和侵袭活性。
- 齐盟张桓瑜郑丽端戚腾童强松
- 关键词：胃癌基因表达
