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张锦生: 作品数：52 被引量：385H指数：12; 供职机构：复旦大学基础医学院病理学系更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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大鼠早期肝纤维化形成和消退过程中纤维连接蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白变化的动态观察被引量：5: 1993年; 以免疫组化方法对CCl_4加低酒精饮水及低胆碱饲料诱发的大鼠早期肝纤维化形成及消退过程中纤维连接蛋白(FN),层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原蛋白(Col Ⅳ)的演变作了观察;何时用免疫单扩散法测定了实验各期大鼠血浆FN。发现实验早期在肝细胞坏死区扩张的血窦壁及周围基质中首先见FN增多,形成早期间隔;以后LN和Col Ⅳ也在此处血窦壁及间隔内血管和新生小胆管的基膜处沉积,但基质中无明显沉积。随实验进展,FN继续增多,并先于胶原纤维在肝内形成完全间隔。肝纤维化消退时,FN消退最快,LN和Col Ⅳ则较慢。血浆FN在实验早期明显上升,以后逐步回降,其变化与肝组织中FN的量并不平行。; 刘伟张锦生张秀荣许祖德张月娥应越英; 关键词：肝纤维化纤维连接素蛋白

四氯化碳诱导大鼠肝纤维化过程中肝内细胞骨架蛋白表达的变化被引量：8: 1998年; 探讨肝纤维化发生过程中，细胞骨架蛋白—结蛋白（Ｄｍ）和α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）阳性细胞动态变化的规律以及这些阳性细胞之间的关系。方法用四氯化碳辅以低胆碱饲料诱导大鼠肝纤维化，应用免疫组化、电镜技术和图像分析方法对肝纤维化过程中出现的Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞进行定位和定量研究。结果α－ＳＭＡ阳性细胞的变化几乎与Ｄｍ阳性细胞同步，两者于实验早期均有增生，但前者少于后者，至纤维间隔大量形成时（１２周），两者增生均达到最高峰，但前者多于后者，以后两者均逐步下降；从形态分析，Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞主要为贮脂细胞（ＦＳＣ），部分卵圆细胞和新生胆管上皮细胞也表达此两种骨架蛋白。结论除了ＦＳＣ以外，α－ＳＭＡ和Ｄｍ阳性卵圆细胞也可能在肝纤维化发生发展中起重要作用。; 王新禾张锦生张秀荣许祖德张月娥; 关键词：肝纤维化四氯化碳骨架蛋白结蛋白

缺氧、高氧对肝星形细胞基质金属蛋白酶Ⅱ表达及活性的影响被引量：5: 2002年; 目的　研究缺氧、高氧对肝星形细胞基质金属蛋白酶Ⅱ (MMP 2 )表达及其活性影响。方法　分离大鼠肝星形细胞 ,在缺氧或高氧条件下培养 ,以免疫细胞化学标记链霉素卵白素生物素(LSAB)法及酶联免疫吸附 (ELISA)法分别检测细胞内MMP 2、基质金属蛋白酶组织抑制因子Ⅱ(TIMP 2 )、膜型基质金属蛋白酶Ⅰ (MT1 MMP)的表达 ,和培养上清中MMP 2、TIMP 2的相对含量 ,并以酶谱法测培养上清MMP 2活力。结果　 (1)缺氧培养 12h ,MMP 2表达增高 (缺氧组阳性指数 :5 7±2 0 ;对照组 :3 2± 1 0 ,;P <0 0 1) ,TIMP 2表达则降低 (缺氧组阳性指数 :2 5± 0 7;对照组 :3 6±1 0 ;P <0 0 5 ) ;培养上清中MMP 2酶活性明显降低 (缺氧组总吸光度值 :7 334± 1 92 2 ;对照组 :17 2 77± 7 4 2 4 ;P <0 0 1)。缺氧不同时段 (6、12、2 4h)比较 ,变化以 6h段最明显。 (2 )高氧培养 12h ,上清中MMP 2、TIMP 2蛋白相对含量均高于对照组 ,TIMP 2更明显 (高氧组A450 :0 0 5 0± 0 0 14 ;对照组 :0 0 2 2± 0 0 10 ;P <0 0 1) ,酶活性亦高于对照组 (高氧组总吸光度值 :5 2 5 2± 0 771;对照组 :4 30 4± 1 0 83;P <0 0 5 ) ,高氧组MT1 MMP表达增强。结论　肝星形细胞对氧敏感。缺氧使肝星形细胞MMP 2表达增加 ,该影响在?; 陈平圣翟为溶张月娥周筱梅张锦生凌玉琴顾映红; 关键词：细胞低氧高氧症明胶酶A 星形细胞

基础医学领域知识创新的管理思路被引量：5: 2000年; 张锦生阮文仙; 关键词：知识创新医学科研管理

Effect of retinoid X receptor alpha (RXRα) transfection on the proliferation and phenotype of rat hepatic stellate cells in vitro被引量：1: 2002年; Objective To study the effect of retinoid X receptor alpha (RXRα) transfection plus treatment with the RXRα ligand, 9-cis-RA, on the proliferation and phenotype of platelet-derived growth factor (PDGF)-activated hepatic stellate cells (HSCs). Methods PDGF activated rat hepatic stellate cells were transfected with eukaryotic expression vector pcDNA3.1- human RXRα, and confirmed by Western blot. Proliferation of transfected HSC was assayed by bromodeoxyuridine (BrdU) incorporation as well as MTT, and the phenotype (α-smooth muscle actin, desmin) was observed by immunocytochemistry with image analysis. Results Transfection of the RXRα gene and treatment with ligand 9-cis-RA of PDGF-activated HSCs extended the increased expression of RXRα protein for at least 168 hours. Cell proliferation and expressions of alpha-smooth muscle actin (α-SMA) and desmin were blocked, compared with groups of sham-transfected, PDGF-activated, no transfection, no ligand treatment, and irrelevant ligand treated HSCs. Conclusion Transfection with the RXRα gene followed by 9-cis-RA ligand treatment will inhibit the proliferation and reverse the phenotype of activated HSC.; 李华张锦生黄光存张农陈琦张秀荣

肝素和PDGF对人肾小球系膜细胞基质合成和分泌的影响被引量：2: 1998年; 目的：探讨肝素和血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）胶原合成和分泌以及纤连蛋白（ＦＮ）、α１（ＩＶ）型胶原ｍＲＮＡ表达的影响。方法：应用３Ｈ－脯氨酸掺入、胶原酶消化法测定胶原含量；采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＦＮ、α１（ＩＶ）型胶原ｍＲＮＡ。结果：对照组、肝素组及ＰＤＧＦ组细胞内胶原含量分别为（１．２５０±０．５０１）％，（０．８０９±０．１６１）％和（２．６９０±０．５９７）％，而其培养液中的含量分别为（１．６０８±０．５１２）％，（０．１２２±０．０８９）％和（３．８７０±０．６４７）％。上述结果显示肝素对该细胞合成和分泌胶原有抑制作用（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），而ＰＤＧＦ则具有明显促进作用（Ｐ均＜０．０１）。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析结果显示肝素可抑制ＭｓＣＦＮ、α１（ＩＶ）型胶原ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ则可明显增强其表达。结论：肝素对人肾小球ＭｓＣ基质的合成和分泌有抑制作用，而ＰＤＧＦ则具有促进作用，其作用机制均发生在基因转录水平上。; 陈广平郭慕依张月娥张锦生周筱梅张秀荣陈琦; 关键词：肾小球系膜细胞肝素 PDGF 基质合成分泌

Dukes C期大肠癌原发灶与淋巴结转移灶中p53基因突变的比较被引量：2: 1997年; 目的探讨大肠癌转移与ｐ５３基因突变的关系。方法用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测７３例ＤｕｋｅｓＣ期大肠癌及４０例相应的淋巴结转移灶ｐ５３基因第５至第９外显子的突变。结果７３例原发灶有２７例（３７％），４０例淋巴结转移灶中有１９例（４７．５％）检测到ｐ５３基因突变，总突变率为４４％。在原发灶和转移灶同时检测的４０例中，有２１例（５２．５％）两者均未见ｐ５３突变；另１２例（３０％）两者均可见完全相同的突变条带；余下的７例（１７．５％）两者ＰＣＲ－ＳＳＣＰ的结果不一致。这７例经ＤＮＡ直接测序确定了ｐ５３基因突变位点。其中５例原发灶未见ｐ５３突变，而转移灶ｐ５３有明确突变；７例中２例转移灶可见ｐ５３有二个外显子突变，而原发灶仅一个或无突变点。结论多数ｐ５３基因突变发生在转移之前并持续存在于大肠癌进展至转移的整个时期，大肠癌的转移可伴有ｐ５３基因的新突变，或转移对ｐ５３基因突变有一定选择，提示ｐ５３基因突变可能与大肠癌转移相关。; 张锦生ScottCaplinJeanBenhattar; 关键词：P53基因基因突变淋巴转移

非同位素法直接测序检测DNA片段突变的改良方法被引量：1: 1997年; 张锦生JeanBenhattar; 关键词：肿瘤病理学癌基因抑癌基因基因突变 DNA片段

低抗凝肝素在制备防治肝纤维化药物中的应用: 本发明涉及低抗凝肝素及其衍生物在制药领域中的新用途。该物质可使肝组织内I、III、IV型胶原和纤连蛋白明显减少，对早期肝纤维化有明显干预作用，但无加重肝功能异常的副作用，可制成注射剂、缓释剂等，用于防治慢性肝病肝纤维化。; 张锦生李文才朱虹光张秀荣; 文献传递

人肝细胞癌中整合素α5、β1亚基和纤维连接蛋白mRNAs的表达被引量：13: 1998年; 目的研究肝细胞癌（ＨＣＣ）中整合素α５、β１亚基和纤维连接蛋白（ＦＮ）ｍＲＮＡｓ表达的生物学意义。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交和核酸原位杂交技术，对１５例ＨＣＣ癌组织、５例癌旁肝硬化和３例正常肝组织中整合素α５、β１亚基和ＦＮｍＲＮＡｓ表达作杂交分析。结果高分化ＨＣＣ癌组织中三种ｍＲＮＡｓ表达水平与癌旁及正常肝组织相近，而低、中分化ＨＣＣ癌组织内明显减少，甚至消失（分别Ｐ＜００１）；整合素α５亚基和ＦＮｍＲＮＡｓ主要见于癌细胞胞浆内；ＨＣＣ伴肝内浸润和／或转移组癌组织内三种ｍＲＮＡｓ水平较无浸润转移组显著下降（Ｐ＜００５）；５例伴肝内转移的ＨＣＣ癌组织中ＦＮｍＲＮＡ呈异质性表达。结论ＨＣＣ中整合素α５、β１和ＦＮ蛋白的表达变化系癌细胞基因转录水平下调的结果，可能与ＨＣＣ细胞分化、浸润和转移相关；异质性ＦＮｍＲＮＡ及其编码的ＦＮ蛋白可能在ＨＣＣ转移中有意义。; 赵景民翟为溶张月娥周筱梅朱虹光张锦生; 关键词：整合素纤维连接蛋白

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