文海平
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- EGCG对因子Ⅶa促进SW620细胞增殖与迁移的干预作用及机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对因子Ⅶa促进SW620细胞增殖与迁移的干预作用及机制。方法用EGCG、因子Ⅶa等处理SW620细胞,应用流式细胞术、Transwell法分别检测细胞增殖周期及迁移能力;Western blotting检测细胞NF-κB抑制蛋白(IκB-α)、核NF-κB(p65/RelA)的蛋白水平变化。结果 EGCG(100 mg/L)能干预因子Ⅶa对SW620细胞增殖与迁移的促进作用;EGCG能抑制因子Ⅶa对IκB-α表达的下调作用及对核NF-κB(p65/RelA)表达的促进作用。结论 EGCG可能通过干预信号分子IκB-α和NF-κB(p65/RelA)的表达和调节作用,抑制因子Ⅶa对SW620细胞增殖与迁移的促进作用。
- 周芳周红吴莺郭东琳许国莹文海平
- 关键词：结肠肿瘤EGCG增殖迁移
- 信号分子IRAK1/4在antiβ-2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF中的作用探讨被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨IRAK1和IRAK4在antiβ-2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒分别检测THP-1细胞表达TF mRNA及TF活性;Western blot检测anti-β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达IRAK1、磷酸化-IRAK1(p-IRAK1)、IRAK4情况;观察IRAK1/4抑制物是否干预anti-β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1表达TF。结果:Antiβ-2GPI/β2GPI复合物(100μg/ml)诱导THP-1细胞表达TF显著增加(P<0.05 vs control);Antiβ-2GPI/β2GPI复合物(100μg/ml)刺激THP-1细胞表达IRAK1、p-IRAK1、IRAK4(蛋白)显著升高(P<0.05 vscontrol);IRAK1/4抑制物(50μmol/L)能够阻断antiβ-2GPI/β2GPI复合物(100μg/ml)诱导THP-1表达TF及IRAK1磷酸化的效应。结论:antiβ-2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,信号分子IRAK1/4被激活进而发挥重要作用。
- 文海平周红许国莹郭东琳周芳陈东东解鸿翔
- 关键词：抗磷脂综合征
- EGCG对TF/Ⅶa/PAR2促进SW620细胞增殖与迁移的干预作用
- 2011年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对组织因子(TF)/凝血因子Ⅶa/蛋白酶激活受体(PAR)2促进结肠癌细胞株SW620细胞增殖与迁移的干预作用。方法用不同浓度EGCG、蛋白酶激活受体2激动剂(PAR2-AP)、Ⅶa刺激SW620细胞,采用MTT法t、ranswell法分别检测细胞增殖及迁移能力,实时定量PCR检测细胞TF及半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)7 mRNA表达,发色底物法与Western blot分别检测TF活性、Caspase-7蛋白表达。结果与PAR2-AP或Ⅶa单独处理相比,EGCG+PAR2-AP、EGCG+Ⅶa对SW620细胞增殖、迁移的促进作用明显降低,TF mRNA表达及活性下降,Caspase-7 mRNA及蛋白表达上调(P<0.05)。结论 EGCG可干预SW620细胞TF和Caspase-7的表达,抑制TF/Ⅶa/PAR2对细胞增殖与迁移的促进作用。
- 周芳周红吴莺王婷郭东琳许国莹文海平张先梅
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯蛋白酶激活受体2
- 核因子κB在凝血因子Ⅶa促进结肠癌SW620细胞增殖迁移中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨核因子KB（NF—κB）在促进结肠癌SW620细胞增殖迁移过程中的作用及其可能的机制。方法以凝血因子VIIa、NF—κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）等处理结肠癌细胞株SW620，采用Westernblot法检测细胞核NF—κB（p65）、细胞浆NF-κB抑制蛋白（IκB-α）和凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶7（caspase-7）的蛋白表达变化；采用流式细胞术检测SW620细胞的细胞周期变化；采用Transwell法测定SW620细胞的迁移能力；采用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测白细胞介素8（IL-8）和组织因子（TF）mRNA的表达水平。结果凝血因子Ⅶa能够显著下调细胞浆中IκB-α的表达水平，并使细胞核内NF—κB的表达水平升高，单克隆抗TF和抗蛋白酶激活受体2（PAR2）抗体能够抑制凝血因子Ⅶa的这一作用。PDTC能够明显干预凝血因子Ⅶa对SW620细胞增殖、迁移的促进作用。PDTC能够明显干预凝血因子Ⅶa对SW620细胞中TF、IL-8mRNA表达的促进作用和对caspase-7蛋白表达的下调作用。结论凝血因子Ⅶa与细胞表面TF结合形成TF／Ⅶa复合物，活化受体PAR2，经NF—κB通路上调IL-8、下调caspase-7的表达，促进SW620细胞的增殖与迁移。TF／Ⅶa／／PAR2／NF—κB通路还可进一步上调TF的表达，从而形成TF／Ⅶa／PAR2／NF—κB／TF正反馈通路。
- 郭东琳周红吴莺周芳张先梅许国莹文海平
- 关键词：结肠肿瘤蛋白酶激活受体2核因子ΚB
- 慢病毒介导的RNA干扰抑制PAR2表达影响结肠癌细胞SW620增殖与迁移被引量：2
- 2010年
- 目的构建人蛋白酶激活受体2(protease-activated receptor 2,PAR2)RNA干扰(RNAi)的重组慢病毒表达载体,探讨PAR2在结肠癌细胞SW620增殖与迁移中的作用。方法根据PAR2基因信息,设计4条PAR2 RNAi片段及1条阴性对照片段,western blotting筛选有效干扰片段,于293T细胞进行病毒包装,采用real-time PCR及western blotting检测干扰效率。PAR2激动剂(PAR2-AP)刺激感染后的SW620细胞,通过流式细胞仪、Transwell试验分别检测细胞周期及细胞迁移能力。结果构建的PAR2-RNAi慢病毒颗粒感染SW620细胞后,PAR2 mRNA及蛋白表达均被明显抑制。与对照相比,PAR2-AP不能促进感染后的SW620细胞增殖,细胞各周期比率未见明显差异,迁移试验结果显示穿膜细胞数也未见明显增多。结论成功构建的PAR2-RNAi慢病毒颗粒能显著抑制结肠癌细胞SW620的PAR2表达,进而阻断PAR2-AP对细胞增殖与迁移的促进效应,证明PAR2在SW620细胞增殖与迁移过程中发挥重要作用。
- 周保成周红严一红郭东琳文海平许国莹周芳
- 关键词：慢病毒蛋白酶激活受体2RNA干扰
- TLR4在anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物诱导THP-1细胞表达TF中的作用探讨被引量：10
- 2010年
- 目的:探讨TLR4及相关信号分子在anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-timePCR)检测anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ诱导THP-1细胞TFmRNA表达,采用试剂盒检测细胞TF活性;利用自制的β2GPⅠ胶联亲和层析柱(β2GPⅠ-Affi-Gel)分析β2GPⅠ与THP-1细胞表面相应受体结合情况;Real-timePCR及Western蛋白印迹检测anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物诱导细胞表达TLR4、MyD88、MD-2情况;观察TLR4途径抑制物——紫杉醇是否干预anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物对细胞的作用。结果:Anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物(100μg/ml)诱导THP-1细胞TF表达显著增加(P<0.05);THP-1细胞表面的TLR4能够结合于β2GPⅠ-Affi-Gel柱;Anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物(100μg/ml)刺激THP-1细胞表达TLR4、MyD88、MD-2显著升高(P<0.05);紫杉醇(1μmol/L)能够抑制anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物对细胞的刺激效应。结论:TLR4及相关信号分子在anti-β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物诱导THP-1细胞表达TF中具有重要作用。
- 严一红周红周保成文海平许国莹周芳
- 关键词：抗磷脂综合征髓样分化蛋白-2髓样分化因子88
- TRAF6在抗β_2GPI/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞表达组织因子时的活化被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRNA水平,发色底物法检测细胞TF活性;RT-qPCR及Western blot分别检测细胞TRAF6mRNA和蛋白表达情况;进一步采用蛋白酶体抑制剂MG-132,观察是否能够干预抗β2GPI/β2GPI复合物对细胞的刺激效应。结果:抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)能够刺激THP-1细胞表达TF mRNA及活性,与对照相比差异显著(P<0.05);使细胞TRAF6 mRNA和蛋白表达均增加,并显示时间相关性,分别在刺激15 min和30 min时表达至高峰;MG-132(5μmol/L)明显抑制抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)对THP-1细胞TRAF6 mRNA和蛋白的刺激效应及TF的诱导表达。结论:抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,TRAF6被激活并发挥重要作用。
- 许国莹周红文海平郭东琳周芳陈东东解鸿翔
- 关键词：抗磷脂综合征NECROSIS
- 白细胞介素-1受体相关激酶家族与自身免疫性疾病被引量：6
- 2011年
- 自身免疫性疾病的发病机制复杂,与免疫调节异常有关。白细胞介素-1受体相关激酶(IL-1 receptor-associatedkinase,IRAK)作为TIR(Toll/IL-1 receptor)信号通路中的重要连接体,通过调节相关信号转导影响机体的免疫状态,在自免疫性疾病的发生发展中起重要作用。文中综述IRAK的分子特点、作用机制及其与自身免疫性疾病的关系等方面的研究进展。
- 文海平周红
- 关键词：TLR自身免疫性疾病
