施红
- 作品数：17 被引量：64H指数：5
- 供职机构：解放军第302医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HBVC基因启动子变异患者血清铁蛋白对干扰素治疗的影响被引量：2
- 2000年
- 目的 :探讨血清铁蛋白 (SF)水平对有HBVC基因启动子 (BCP)变异的患者干扰素疗效的影响。方法 :采用错配PCR RFLP技术检测HBVC基因启动子 (BCP)变异 ,并检测其血清铁蛋白 (SF)水平。结果 :随着病情的加重SF水平升高 ,且当SF≥ 30 0ng/ml时 ,可明显降低干扰素的疗效 (P <0 0 5 ) ;发生BCP变异的病例 ,在干扰素治疗的过程中 ,SF水平升高的程度明显高于野生株组 (P <0 0 0 1)。结论 :提示SF升高与肝功能损伤有着密切关系 ,SF水平升高可降低干扰素治疗的有效率 ,且有变异的病例可促使SF水平升高。
- 邢利和朱传琳李力解放军302医院王惠芬施红
- 关键词：血清铁蛋白慢性乙型肝炎
- 中国大陆庚型肝炎病毒NS区部分基因序列分析及变异的初步研究被引量：1
- 1999年
- 目的研究中国庚型肝炎患者分离的病毒基因的特异性及变异规律。方法应用逆转录－巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从１６例庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染住院病人血清中扩增了ＨＧＶＮＳ５区部分基因片段（１４１ｎｔ）。经纯化后采用双脱氧链末端终止法进行序列分析。结果观察到在ＨＧＶＮＳ５区第７８２０－７９６０核苷酸之间的５′端较３′端核苷酸及其编码氨基酸变异率高。与Ｌｉｎｎｅｎ等报道的美国株ＨＧＶ相比，中国人ＨＧＶＮＳ５区核苷酸的变异主要集中在ＨＧＶＮＳ５工第７８２４，７８４５～７８６０，７８９２，７９１４，７９１７和７９３５核苷酸位点及区域，各个核苷酸位点的变异率在０～８９．５％，与美国株相比核苷酸序列的同源性为８３．６％～９５．７％，平均８９．６％；氨基酸为８３．０％～１００％，平均为９１．２％。在７９３３核苷酸位点与美国株相比变异率为９３．７％。结论中国人群之间ＨＧＶＮＳ５区部分基因及其推测编码蛋白较保守，但与美国株有明显差别。不同硷基在序列中呈散在分布，而在某些位点虽与美国株相比变异很大，但中国人群之间离散度较小，ＨＧＶ核酸的变异可能与地域因素有关。
- 李伯安董志锋程云程云高蓉郭仁峰施红罗清华郭仁峰张建宗
- 关键词：庚型肝炎病毒序列同源性核酸氨基酸PCR
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子与HBsAg融合蛋白基因的分子克隆及序列测定
- 1998年
- 目的研究粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的免疫活性。方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增出粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）３８４ｂｐ的基因片段及ＨＢｓＡｇ８４６ｂｐ基因片段，扩增产物经柱纯化后，由Ｔ４ＤＮＡ酶连结为１２３０ｂｐ的片段，将此片段命名为ＬＧＨ，克隆到ｐＵＣ１９质粒中，利用菌落ＰＣＲ法快速筛选阳性克隆及限制酶切鉴定插入片段的大小。结果该基因全长１２３０ｂｐ，经序列分析，证实为ＧＭ－ＣＳＦ－ＨＢｓＡｇ基因。结论ＧＭ－ＨＢｓＡｇ融合蛋白基因构建成功，为进一步研究其生物学活性及表达奠定了基础。
- 薛净程云罗清华李伯安李伯安张郁郭仁峰曹阳林秀玉施红
- 关键词：HBVHBSAGGM-CSF
- 对PCR扩增片段克隆操作的几点体会被引量：5
- 1997年
- 徐东平施红韩凤连
- 关键词：聚合酶链反应基因片段扩增克隆
- 人α-干扰素与乙型肝炎病毒前S2嵌合蛋白的表达纯化和鉴定被引量：5
- 2000年
- 目的 重组表达人α 干扰素与乙型肝炎病毒前S2融合蛋白 (IFN PreS2 ) ,探索治疗HBV感染的特异性免疫药物。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)技术扩增出人IFN α2b和HBVPreS2基因片段 ,分步克隆获取融合基因 ,构建pBV IFN PreS2重组表达载体 ,转化E .coli后诱导表达IFN PreS2融合蛋白。结果 在E coli中表达了相对分子质量为 2 70 0 0的目标蛋白 ,后者以包含体形式存在 ,表达量占菌体总蛋白的 15 %。经过反相高效液相色谱 (RP HPLC)等步骤纯化后 ,目标蛋白纯度达到 95 %。复性的表达产物在体外测定具有相应的生物活性和免疫学特性 ,干扰素生物比活达到 10 8IU/mg蛋白质。融合蛋白能与抗IFN α抗体、抗HBVPreS2抗体及多聚人血清白蛋白 (PH SA)结合。结论 在原核系统中有效表达了具有高生物活性的IFN PreS2融合蛋白。
- 徐东平韩凤连施红王福生程云金磊雷周云刘明旭
- 关键词：乙型肝炎病毒干扰素Α
- 急慢性肝病患者全血及血清中bcl-2的检测及其临床意义
- 1998年
- 目的:研究与细胞凋亡相关的bcl-2在急慢性肝病患者全血中存在情况及其临床意义,以及判断是否在血清中存在bcl-2;方法:选择46例患者为研究对象,其中男37例,女9例,年龄17岁～67岁,平均38.1岁。急性肝炎4例,慢性肝炎轻度8例,中度4例(慢性肝炎均经病理证实),肝炎肝硬变20例,慢性重型肝炎10例。乙型肝炎41例。
- 邹正升辛绍杰张占红施红徐东平韩凤连
- 关键词：BCL-2病毒性肝炎全血
- 反义寡核苷酸抗丁型肝炎病毒基因组RNA中核酶的研究
- 1996年
- 以质粒 pSVLD3为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增得到1条139bp 的片段,它含有丁型肝炎病毒(HDV)基因组 RNA 中核酶(Ribozyme)区的 cDNA,该核酶具有自身裂解功能,将此片段插入到 pGEM-3Z 中,经筛选、鉴定得到重组质粒 pHDV108,经测序发现有2个碱基变异。以该质粒为模板,通过T7 RNA 聚合酶,转录出核酶的前体,并观察到其自身裂解产物,自裂率达71%。针对核酶唯一的自裂位点,设计并合成1条反义寡核苷酸(ASODN),当在转录反应中同时加入 ASODN 后,核酶的自裂率明显下降,当 ASODN 浓度分别为1、2、4、8和16μmol/L 时,核酶的自裂率分别为28.0%、17.0%、8.0%、2.0%和0.0%,自裂抑制率分别为56.0%、73.0%、88.0%、97.0%和100.0%。结果显示 ASODN 可与核酶的自裂位点区结合,从而抑制核酶的自裂。
- 邹正升陈菊梅王升启马立人施红韩凤莲程云雷周云王玉芝
- 关键词：反义寡核苷酸丁型肝炎病毒核酶RNA病毒
- 慢性HBVC基因启动子变异的检测被引量：3
- 2000年
- 目的 了解慢性乙型肝炎病毒 (HBV)C基因启动子变异的情况以及对病毒血清学的影响。方法 应用错配聚合酶链反应特异性扩增含有HBVC基因启动子的片段 ,扩增产物用限制性内切酶BcLⅠ酶切 ,琼脂糖凝胶电泳后 ,观察酶切后的限制性片段长度多态性 (RFLP)图谱 ,分析C基因启动子区段的核苷酸 (nt) 176 2由碱基A→T和 (nt) 176 4碱基由G→A的变异 ,并经直接测序分析证实RFLP结果。结果 110例慢性乙型肝炎病人中HBVDNA阳性 89例 ,其中HBeAg阳性组 43例 ,检测出T 176 2 /A 176 4变异株 2 1例 ;46例抗 HBe阳性组中检出T 176 2 /A 176 4变异 2 6例 ,两组相比 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。同时对 15例中、重型慢性乙型肝炎病人血清检测 ,发现T 176 2 /A 176 4变异11例 ,在 5例发生变异株与野生株的混合感染中 ,变异株有优势积累趋势。结论 HBVC基因启动子变异特别是T 176 2 /A 176 4联合位点变异在我国慢性乙型肝炎患者中普遍存在 ,变异的发生只是降低了HBV前CmRNA的转录效率 ,而不是完全中止HBeAg的复制 ,这种变异明显不同于前C区终 2 8变异对血清学的影响 ,且随着病情的发展 ,变异株发生优势积累。提示 ,这一变异似乎与病理变化轻重程度有一定关系。
- 邢利和朱传琳施红韩凤连
- 关键词：乙型肝炎病毒RFLPC基因启动子
- 反义寡核苷酸体外抗丁型肝炎病毒的初步研究
- 1995年
- 以质粒（ｓＳＶＬＤ３）为模板，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增得到一条１３９ｂｐ的片段，它含有丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）基因组ＲＮＡ中核酶（ｒｉｂｏｚｙｍｅ）区的ｃＤＮＡ，该核酶具有自身裂解功能，将上述片段插入到ｐＧＥＭ－３Ｚ中，经筛选、鉴定，得到一重组质粒（ｐＨＤＶ１０８），经测序发现有２个碱基变异，以该质粒为模板，通过Ｔ７ＲＮＡ聚合酶，转录出核酶的前体，并观察到其自身裂解产物，自裂率达７１％。针对核酶两个重要的单链区，设计并合成二条反义寡核背酸（ＡＳＯＮ），当在转录反应中同时加入ＡＳＯＮ后，核酶的自裂率下降均较明显，当ＡＳＯＮ浓度为１６ｕｍｏ１／Ｌ时，核酶自裂抑制率均在７０％以上。提示，ＡＳＯＮ可与核酶两个重要的单链区结合，从而抑制核酶的自裂活性。
- 邹正升王升启陈菊梅陈菊梅马立人马立人施红雷周云韩凤连
- 关键词：反义寡核苷酸丁型肝炎病毒基因治疗
- 丙型肝炎患者血清抗丙型肝炎病毒抗体IgM及HCVRNA检测结果的比较被引量：1
- 1997年
- 用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对住院病人抗丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）阳性血清标本进行抗－ＨＣＶＩｇＭ的检测，并与ＨＣＶＲＮＡ检测结果比较。结果表明，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阳性，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阴性及ＨＣＶＲＮＡ阴性、抗－ＨＣＶ阳性三种类型中均有抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性者。结果还表明ＨＣＶＲＮＡ阳性病例的抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性率明显高于ＨＣＶＲＮＡ阴性的病例（Ｐ＜０．０５），在临床诊断上ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性病例的肝病大多数为急性肝炎（ＡＨ）和慢性活动性肝炎（ＣＡＨ），ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性比较，各类肝病的病例数无明显差别。
- 雷周云逯好英韩凤连逯好英韩凤连
- 关键词：丙型肝炎丙型肝炎病毒病毒抗体
