曹勇
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用甲基营养型酵母表达外源基因被引量：1
- 1998年
- 甲基营养型酵母是一种新型外源基因表达系统,它兼具原核细胞良好的可操作性和真核系统的后加工,其发酵条件简单,表达水平高,适宜高密度培养,并且具有分泌型表达的优势,为工业化生产和纯化提供极大的方便.它作为一个具有广阔前景的系统正日益受到人们的重视.
- 曹勇
- 关键词：甲基营养型酵母外源基因
- 抑瘤素-M(OSM)在原核系统中的表达被引量：1
- 1998年
- 目的和方法：抑瘤素－Ｍ是一种具有多种生物活性的细胞因子，采用ＰＣＲ的方法在ＯＳＭ全长的ｃＤＮＡ基础上截去编码Ｃ端的３１个氨基酸的核苷酸序列，将其分别克隆至ｐＢＶ２２０和ＴｈｉｏＦｕｓｉｏｎＴＭ表达系统中进行表达，并对其包涵体进行初步的变性、复性和活性测定。结果和结论：证实了截去Ｃ端３１个氨基酸之后，ＯＳＭ仍保持其抑制活性。构建重组质粒ｐＢＶ２２０－ＯＳＭ、ｐＴＦ－ＯＳＭ。
- 曹勇李淑琴张兆山文立民
- 关键词：PBV220PCR扩增原核系统
- 抑瘤素M cDNA的克隆及表达
- 1996年
- 抑瘤素M(Oncostatin M,OSM)是一种多功能的细胞生长调节因子。从PMA刺激后的U937细胞系提取总RNA,采用逆转录-PCR方法分离到了抑瘤素M的cDNA;将抑瘤素M的cDNA克隆到质粒pUC19中,筛选3个阳性克隆进行序列分析,与国外报道序列完全一致;将抑瘤素M的cDNA克隆到质粒pBV220后再转化大肠杆菌DH5α进行模拟表达,SDS-PAGB分析表明有OSM表达,表达量约占细菌总蛋白的5％;经过初步纯化的OSM能明显抑制A375细胞的生长。
- 段海清张兆山董自正曹勇黄翠芬
- 关键词：抑瘤素M基因表达活性测定
- 抑瘤素-M(OSM)在GST融合表达系统中的表达、纯化和活性测定被引量：2
- 1999年
- 抑瘤素Ｍ是一种具有多种生物活性的细胞因子，具有重要的研究价值和潜在的应用前景。基于ＧＳＴ融合表达载体，构建了一个ＯＳＭ的高效表达系统，诱导表达后融合蛋白占全菌蛋白的５０％以上，在低温诱导的条件下，可溶性蛋白中融合蛋白的含量可达１５％。在对包涵体形式的融合蛋白变复性的基础上，通过亲和层析一步纯化达到９０％左右的纯度。对融合蛋白进行了活性测定，结果提示了Ｎ端的头两个氨基酸对ＯＳＭ的生物活性是重要的。
- 曹勇张兆山文立民李淑琴
- 关键词：活性测定GST
- 新型粘膜免疫佐剂候选株LTA~ˉB^+的构建被引量：3
- 2000年
- 目的 :产肠毒素大肠杆菌产生的不耐热肠毒素 (LT)不仅是很强的口服免疫原 ,而且其粘膜免疫佐剂作用显著。LT的毒性限制了它的直接使用 ,希望通过体外定点诱变技术 ,获得具有粘膜免疫佐剂作用的LT减毒株。方法 :以人源LT基因为研究对象 ,首先构建了重组质粒 pUC19 LT ,然后用单引物PCR法和重叠延伸PCR法分别构建了LTQ7和K63基因突变体。结果 :CHO细胞体外试验和家兔肠结扎体内试验毒性测定的结果表明 ,LT突变体K63的毒性明显降低。结论 :K63有希望成为候选的高效粘膜免疫佐剂。
- 程芳李淑琴舒东张兆山曹勇
- 关键词：不耐热肠毒素定点诱变突变体
- 抑瘤素McDNA的克隆及表达研究被引量：2
- 1997年
- 抑瘤素M（onecostatinM，OSM）是一种多功能的细胞生长调节因子．从PMA刺激后的U937细胞系提取总RNA，采用逆转录-PCR方法分离到了抑瘤素M的cDNA；将抑瘤素M的cDNA克隆到质粒pUC19中，筛选三个阳性克隆进行序列分析，与国外报导序列完全一致；将抑癌素M的cDNA克隆到质粒pBV220后再转化DH5a进行模拟表达，SDS-PAGE分析表明有OSM表达，表达量约占细菌总蛋白5％，经过初步纯化的OSM能明显抑制A375细胞的生长．
- 段海清张兆山董自正曹勇黄翠芬
- 关键词：抑瘤素M基因表达CDNA基因克隆
