曾忠铭
- 作品数：7 被引量：44H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人源性抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库的构建被引量：2
- 2003年
- 应用噬菌体表面呈现技术,从腮腺炎病毒抗体阳性者淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增出抗体重链Fd和轻链基因,经XhoI/SpeI、SacI/XbaI双酶切,先后克隆入噬粒载体pComb3中,再电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染。从分离出的淋巴细胞中共提取高质量RNA约110μg,经逆转录、PCR,分别扩增出约700 bp大小的κ、λ和Fd基因。PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接,在2.5 kV、200 Ω、25μF的条件下电转化,转化率为2.48×107。最终得到库容量为6.4×106,滴度为7.8×1013 cfu/L的噬菌体抗体库。所构建的抗腮腺炎病毒特异性噬菌体抗体库容量中等大小,能满足从中筛选抗HN蛋白噬菌体抗体的需要。
- 俞慕华曾忠铭段永翔黄锐敏叶友松雷智刚詹希美
- 关键词：腮腺炎病毒逆转录聚合酶链反应电穿孔噬菌体抗体
- 一株抗腮腺炎病毒Fab抗体克隆的筛选
- 2007年
- [目的]获得抗腮腺炎病毒Fab段基因工程抗体。[方法]将腮腺炎病毒抗原(MUV-Ag)包被在固相ELISA板中,采用"吸附-洗脱-扩增"的方法,对已构建的抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库进行富集。从富集后的抗体库中筛选抗腮腺炎病毒阳性克隆,并交叉筛选鉴定其特异性。[结果]在对176个克隆筛选后,再用麻疹病毒抗原(MEV-Ag)、混合副流感病毒抗原(mPIV-Ag)和呼吸道合胞病毒抗原(RSV-Ag)进行交叉筛选,最终获得特异性抗MUV-Ag阳性克隆2个(B206和D210)。对其中1株B206序列分析表明它的κ轻链V基因属于VκⅠ(O12)亚群,J基因属于Jκ1;γ链V基因属于VH1-69亚群,D基因来自D3-10,J基因则来自JH6。[结论]用腮腺炎病毒抗原成功地从抗体库中筛选到特异性阳性克隆,构建的噬菌体抗体库是有效的。
- 俞慕华曾忠铭段永翔袁梦刘楚云Fang SY
- 关键词：FAB抗体噬菌体可变区基因腮腺炎病毒
- 细菌性阴道病的优势菌群半定量培养分析
- 2012年
- 目的探讨临床适用的菌群培养方法,用于检测分析细菌性阴道病患者阴道优势菌群,以更好地指导临床诊治。方法采集32例细菌性阴道病(BV)患者的阴道分泌物标本,在不同气体环境中用非选择性、半定量方法做细菌培养,比较培养结果,分析患者阴道优势菌群。结果在厌氧环境中培养时菌落数量最多,检出的优势菌共15种,每份标本的优势细菌种类多数为2种(20/32),少数为3种(3/32);而在微需氧及需氧环境中检出的主要菌分别为8种及5种。结论非选择性半定量、厌氧培养的方法可有效、简便地了解BV阴道优势菌群的构成,可用于临床对BV菌群的检测分析研究。
- 党好傅强段永翔邓启文许欣曾忠铭
- 关键词：细菌性阴道病半定量优势菌群
- 幽门螺杆菌感染与慢性口臭关系的初步研究被引量：23
- 2005年
- 目的调查主诉口臭患者的幽门螺杆菌(H.py lori)感染率和主诉消化不良的口臭发生率。方法研究对象为125例主诉慢性口臭患者和212例主诉慢性消化不良患者。口臭以口气挥发性硫化物(V SC)检测与闻诊联合诊断,H.py lori感染以14C-尿素呼气试验诊断。结果125例主诉慢性口臭的患者有87例是真性口臭,其余38例为假性口臭,真性口臭患者的H.py lori感染率显著高于假性口臭(40.2%和13.2%,P<0.01)。212例主诉慢性消化不良的患者发生口臭105例(49.5%)、感染H.py lori 94例(44.3%),H.py lori阳性患者的口臭发生率显著高于H.py lori阴性患者(57.5%和43.2%,P<0.05)。无论何种主诉,大部分口臭患者属于V SC阳性(88.5%),但H.py lori阳性患者和H.py lori阴性患者口气V SC水平差异无显著性,V SC阳性口臭和V SC阴性口臭的H.py lori感染率差异也无显著性。结论H.py lori感染可能与口臭的发生有一定关系,但口气V SC并非由H.py lori直接产生。
- 张厚德曾忠铭杜泽园
- 关键词：口臭幽门螺杆菌
- 深圳市南山区全人口结核病控制项目实施研究
- 赵锦曾忠铭王健郑仪丁治桂肖炳忠陈辉张立民徐海涛周天祥杨庆文李培根
- 该课题利用世界银行贷款和地方政府配套经费对全人口（户籍和暂住）可疑肺结核患者提供免费X线、痰结核菌检查定诊，对传染肺结核提供免费抗结核统一化疗方案治疗这一现代结核病防治技术策略的实施，研究探索我区全人口结核病控制高发现、...
- 关键词：
- 关键词：结核病控制
- 16S rRNA序列同源性分析结合系统发育树构建鉴定6株生殖道乳杆菌被引量：17
- 2013年
- 目的对6株分离自健康妇女生殖道乳杆菌进行16S rDNA鉴定和系统发育分析。方法采用Nugent评分进行镜检,筛选健康女性阴道分泌物进行乳杆菌纯培养,抽提染色体DNA,16S rRNA PCR扩增,构建系统发育树。结果采用16S rRNA序列同源性分析方法与系统发育树构建,鉴定201101菌株、201102菌株、201103菌株、201201菌株和201202菌株分别相应与唾液乳杆菌、加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌及卷曲乳杆菌形成一个分支,验证可信度均达到100%;201104菌株16S rDNA序列与鸡乳杆菌的16S rDNA序列同源性达99%,系统发育树验证可信度达到98%以上。结论 16S rRNA序列同源性分析与系统发育树构建相结合,可以较准确鉴定细菌种类。
- 何亮谢小军王冲曾忠铭
- 关键词：系统发育树乳杆菌生殖道
