朱昀
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生天文地球更多>>
- 紫绀型先心病患儿心肌组织SOCS3基因启动子甲基化分析及机制研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨紫绀型先心病患儿右心室心肌组织中细胞信号抑制因子3(suppressor of cell signaling 3,SOCS3)基因启动子甲基化水平及其可能机制。方法选取先心病患儿34例,其中紫绀组18例,非紫绀组16例。取手术中切除的右心室流出道心肌组织作为标本,采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)及重亚硫酸盐测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测心肌细胞中SOCS3启动子CpG岛甲基化程度。Western blot检测DNA甲基化转移酶3A(DNA methyltransferase,DNMT3A)、DNA甲基化转移酶3B(DNMT3B)蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果与非紫绀组相比,紫绀组SOCS3启动子CpG岛甲基化程度较高,DNMT3A蛋白较高[(0.407±0.469)vs(0.160±0.034),P<0.05],DNMT3B蛋白无明显差异[(0.054±0.012)vs(0.052±0.093),P>0.05]。结论紫绀型先心病患儿心肌组织中,SOCS3启动子CpG岛呈高甲基化。高表达的DNMT3A蛋白很可能参与了SOCS3启动子CpG岛高甲基化。高甲基化的SOCS3启动子CpG岛,可能不是调控慢性缺氧适应心肌中SOCS3转录的主要因素。高表达的SOCS3启动子CpG岛以及高表达的DNA甲基化转移酶3A蛋白可能是心肌慢性缺氧适应的一种体现。
- 冯泽洲王学锋朱昀何思毅方骏唐富琴顾强肖颖彬
- 关键词：紫绀型先心病SOCS3甲基化
- Sirt1在缺氧条件下对心肌细胞线粒体融合与分裂中的作用被引量：5
- 2016年
- 目的探讨缺氧条件下线粒体动态学变化及Sirt1在其中的作用。方法 1收集2014年于新桥医院心血管外科行手术治疗的先心病患儿29例,其中非紫绀型先心病14例,紫绀型先心病15例,取术中所切除的右室流出道心肌组织为心肌标本,Western blot检测促线粒体分裂蛋白Drp1与Fis1表达情况。2将H9c2心肌细胞置入缺氧培养箱(94%N2,5%CO2,1%O2)中进行培养,检测缺氧0、2、4、8、12 h后促线粒体分裂蛋白Drp1与Fis1的表达水平。3将线粒体靶向质粒分别同空载质粒、Sirt1过表达质粒和Sirt1干扰质粒共转染H9c2细胞,常氧或缺氧培养箱中培养12 h后,激光共聚焦显微镜下观察线粒体融合、分裂情况;4运用腺病毒Ad-Sirt1和慢病毒Lv-Sh-Sirt1分别在H9c2细胞中过表达或干扰Sirt1后,将细胞置于缺氧培养箱中培养12 h,检测Drp1与Fis1表达水平;5分别转染空载质粒、Sirt1过表达质粒和Sirt1干扰质粒至H9c2细胞后,缺氧培养12 h,LDH试剂盒检测细胞毒性。结果 1同非紫绀组相比,紫绀组心肌中Drp1与Fis1表达显著增高,Drp1相对灰度值:[(0.47±0.11)vs(0.76±0.12)、Fis1相对灰度值(0.53±0.02)vs(0.83±0.03),P<0.05];2细胞水平研究结果显示Drp1与Fis1的蛋白表达随缺氧的时间的延长呈递增趋势;3激光共聚焦结果表明,Sirt1过表达后能够一定程度地缓解缺氧诱导的线粒体分裂(P<0.05),而当Sirt1受到干扰后,缺氧所诱导的线粒体分裂水平明显提高(P<0.05);4在缺氧条件下,过表达Sirt1能够抑制Drp1与Fis1蛋白表达水平(P<0.05),而Sirt1被抑制后,Drp1与Fis1蛋白表达水平增加(对照组,过表达组,低表达组Drp1相对灰度值依次为[(0.47±0.02)vs(0.36±0.02)vs(0.78±0.04);Fis1相对灰度值依次为(0.64±0.02)vs(0.42±0.02)vs(0.80±0.04),P<0.05];5Sirt1过表达能够降低缺氧刺激后H9c2心肌细胞的死亡率。结论 Sirt1可能通过调控促线粒体分裂蛋白Drp1与Fis1表达水平促进心肌细胞在缺氧条件下的适应。
- 罗桂平蹇朝张华刚赵鹏南刘波朱昀姜云瀚唐富琴肖颖彬
- 关键词：SIRT1心肌细胞线粒体缺氧
- 慢性缺氧诱导小鼠心肌细胞自噬及其机制被引量：5
- 2017年
- 目的观察慢性缺氧对小鼠心肌细胞自噬水平的影响,并初步探讨AMPKα2敲除对该过程的作用。方法采用野生型与AMPKα2^(-/-)雄性C57小鼠均分为野生型常氧组、野生型缺氧组、敲除型常氧组和敲除型缺氧组(n=10)。常氧组于空气环境中饲养,缺氧组于10%O_2的低氧舱内饲养。4周后野生型小鼠取静脉血标本,测红细胞及血红蛋白水平;取心脏标本用Western blot检测AMPKα2及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与p62的变化,用免疫荧光染色法检测心肌冰冻切片LC3变化。敲除型小鼠取心脏标本用Western blot检测心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值变化。结果 1野生型小鼠中,与常氧组比较,缺氧组红细胞与血红蛋白水平显著增加[红细胞:(9.33±0.15)×10^(12)/L vs(12.78±0.66)×10^(12)/L,P<0.05;血红蛋白:(135±3)g/L vs(192±4)g/L,P<0.05];2野生型小鼠中,与常氧组相比,缺氧组心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加[(0.49±0.29)vs(1.70±0.24),P<0.05];p62表达明显降低[(1.32±0.57)vs(0.71±0.19),P<0.05];免疫荧光结果显示,缺氧组心肌组织LC3荧光较常氧组增多;3在常氧条件下,与野生型小鼠比较,AMPKα2^(-/-)小鼠心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低,但差异无统计学意义[(0.78±0.08)vs(0.73±0.34),P>0.05];在缺氧条件下,与野生型小鼠比较,AMPKα2^(-/-)小鼠心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低[(2.08±0.72)vs(1.01±0.21),P<0.05];4野生型小鼠中,与常氧组比较,缺氧组AMPKα2蛋白表达水平并无显著增加[(1.14±0.13)vs(1.25±0.19),P>0.05]。结论慢性缺氧可能通过AMPKα2依赖的途径增强心肌细胞自噬,该自噬可能是心肌细胞对慢性缺氧的适应机制。
- 刘超蹇朝孟永胜彭文林朱昀姜云瀚罗桂平唐富琴肖颖彬
- 关键词：慢性缺氧心肌
- 心室压力超负荷早期心肌纤维化的动态病理学变化被引量：2
- 2017年
- 目的通过主动脉弓缩窄建立小鼠心室压力超负荷模型,探讨在心室压力超负荷早期心肌纤维化的动态病理学变化。方法选用10周龄、体质量23~25 g的雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为4组(n=10):(1)假手术组(SHAM组)、(2)缩窄3 d组(TAC3D组)、(3)缩窄7 d组(TAC7D组)、(4)缩窄14 d组(TAC14D组)。各缩窄组小鼠行主动脉弓缩窄术,假手术组除不缩窄主动脉弓部,其他操作同各缩窄组。心脏导管检测小鼠心脏功能变化情况;采用心脏体质量比、心肌细胞直径大小等指标评价小鼠心肌结构代偿性变化情况;Masson染色观察小鼠心肌纤维化变化情况。结果 (1)与假手术组相比,各缩窄组射血分数无显著改变(P>0.05);(2)与假手术组相比,各缩窄组心体比显著增加,心肌细胞直径显著增大[SHAM组、TAC3D组、TAC7D组、TAC14D组心肌细胞直径依次为(13.56±0.24)、(18.02±0.52)、(18.76±0.96)、(21.20±1.85)μm,P<0.05]。(3)与假手术组相比,各缩窄组心肌管周纤维化程度显著增加,且随缩窄时间延长而加重[SHAM组、TAC3D组、TAC7D组、TAC14D组血管周围纤维化面积与血管面积比依次为(0.18±0.02)、(0.37±0.02)、(1.22±0.08)、(2.05±0.12),P<0.05]。结论在心室压力超负荷早期,心肌纤维化主要出现于血管周围,且纤维化程度随缩窄时间延长而逐渐加重。
- 孟永胜蹇朝朱昀刘超姜云瀚罗桂平朱雨唐富琴肖颖彬
- 关键词：心肌肥厚心肌纤维化
- PD98059抑制快速起搏诱导心房肌细胞离子通道表达变化的研究被引量：1
- 2012年
- 目的利用原代培养的心房肌细胞建立快速起搏模型,研究ERK1/2的抑制剂PD98059对L-型钙通道及钾通道Kv4.3在快速起搏早期表达的影响。方法采用原代培养大鼠心房肌细胞建立快速起搏细胞模型,随机分为对照组、起搏组及PD98059+起搏组,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法检测L-型钙通道α1c及钾通道Kv4.3在不同情况下mRNA和蛋白的表达变化。结果快速起搏24 h后,L-型钙通道α1c的mRNA和蛋白表达较对照组明显降低;起搏前给予PD98059预处理,能明显抑制快速起搏诱导的L-型钙通道α1c与钾通道Kv4.3 mRNA及蛋白表达降低,与起搏组比较差异显著(P<0.01),但仍低于对照组(P<0.05)。结论快速起搏早期,原代培养心房肌细胞L-型钙通道α1c及钾通道Kv4.3的mRNA和蛋白表达均出现不同程度的降低,提示其发生了离子通道重构,而ERK1/2的抑制剂PD98059能明显抑制这种表达下调,提示ERK1/2参与了快速起搏早期心房肌细胞离子通道的重构。
- 程伟朱昀肖颖彬
- 关键词：心房肌细胞快速起搏离子通道PD98059
- MicroRNA-1、MicroRNA-133、MicroRNA-34a及其可能靶蛋白Ankyrin-B在心房颤动患者心房组织中的表达及意义被引量：2
- 2014年
- 目的通过检测心房颤动(房颤)与窦性心律患者右心耳组织中microRNA-1、microRNA-133及microRNA-34a的表达差异,及其可能靶蛋白锚蛋白-B(Ankyrin-B)的表达变化,分析两者之间的关系,以从microRNAs调控水平研究房颤发生、发展的新机制。方法将第三军医大学新桥医院40例风湿性心瓣膜病行心瓣膜置换术患者分为房颤组[男8例,女12例;年龄(52.9±5.8)岁]和窦性心律组[男9例,女11例;年龄(52.4±6.2)岁]。采用逆转录-实时定量聚合酶链式反应(RTQ-PCR,Real-time quantitive PCR)法检测患者右心耳组织中microRNA-1、microRNA-133及microRNA-34a的表达,ΔΔCt法计算结果;石蜡切片免疫组织化学法检测组织中Ankyrin-B的表达;蛋白免疫印迹(Western Blotting)法检测组织中Ankyrin-B的表达变化。结果房颤组患者右心房组织中的microRNA-1表达较窦性心律组显著降低(0.559±0.252 vs.3.997±1.251;t=-21.455,P=0.000),microRNA-133的表达较窦性心律组显著降低(0.630±0.238 vs.5.514±1.549;t=24.133,P=0.000),而microRNA-34a的表达较窦性心律组增高(4.783±2.012 vs.1.350±0.638,t=12.596,P=0.000)。免疫组织化学法及Western Blotting均显示房颤组心房组织Ankyrin-B表达较窦性心律组明显降低,且差异有统计学意义(0.66±0.45 vs.1.09±0.42;t=-3.396,P=0.001)。结论 MicroRNA-34a可能通过调节Ankyrin-B蛋白的表达,从而参与心房颤动的发生、发展。
- 朱昀肖颖彬冯泽洲何思毅李经纬程伟
- 循环环状RNA hsa_circ_0029642与成人先天性心脏病肺动脉高压的关系被引量：6
- 2017年
- 目的检测血清中环状RNA hsa_circ_0029642的含量,明确其与肺动脉高压是否有密切关系,探讨循环环状RNA hsa_circ_0029642作为肺动脉高压血清标志物的可能性。方法收集2016年3-7月入院的先天性心脏病伴肺动脉高压患者血清20例(A组),先天性心脏病不伴肺动脉高压患者血清20例(B组),风湿性心脏病伴肺动脉高压患者血清20例(C组),各组从血清中提取总RNA并进行质量检测,进行反转录反应,获得相应的c DNA,以GAPDH作为内参进行标定,进行实时荧光定量PCR反应,根据各样本的定量PCR结果计算RQ值,绘制ROC曲线。结果 3组样本的总RNA均有较好的质量,A组与C组的RQ值差异无统计学意义(P>0.05),A组与B组的RQ值差异有统计学意义(P<0.05),B组与C组的RQ值差异有统计学意义(P<0.01)。即A组和C组的RQ值显著低于B组,而A组与C组的RQ值差异无统计学意义。ROC曲线(曲线下面积AUC=0.752,P<0.01,95%CI:0.624~0.884)。结论先天性心脏病肺动脉高压患者血清中环状RNA hsa_circ_0029642明显下调,循环环状RNA hsa_circ_0029642可作为肺动脉高压新的血清标志物。
- 彭文林蹇朝刘超孟永胜朱昀姜云瀚罗桂平唐富琴肖颖彬
- 关键词：先天性心脏病肺动脉高压
- miR-1、miR133b及miR34a及其可能靶蛋白Ankyrin-B在风心病房颤患者中表达变化研究
- 目的 检测风湿性心脏病瓣膜病患者,心房纤颤患者与窦性心律患者相比miR-1、miR-133b及miR-34a表达差异及其可能靶蛋白Ankyrin-B的表达情况,以及两者之间的相关性.
- 程伟朱昀肖颖彬
