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不同培养系统和传代方法对昆明白小鼠原始生殖细胞分离培养的影响: 2008年; [目的]寻求适合昆明白小鼠EG细胞的培养系统和传代方法。[方法]常规方法从昆明白小鼠原始生殖细胞中分离EG细胞,用不同培养系统(EG细胞基础培养液,RH-CM,EG细胞基础培养液+MEF)及不同传代方法(机械法,酶消化法,连同饲养层消化法),研究对昆明白小鼠EG细胞分离克隆的影响。[结果]以RH-CM作为培养基效果最好,RH-CM能够更好地促进EG细胞贴壁增殖和集落的形成,有效地维持EG细胞未分化状态;酶消化法和连同饲养层消化法均能获得较高的克隆形成率。[结论]RH-CM和连同饲养层消化法可分别作为昆明白小鼠EG细胞的培养系统和传代方法。; 王轶敏王新庄李金辉李义书冯勋伟; 关键词：昆明白小鼠原始生殖细胞传代

不同饲养层对兔原始生殖细胞传代培养的影响被引量：2: 2008年; 为了探讨不同饲养层细胞对兔原始生殖细胞体外培养与传代的影响,从14-18 d的兔胎儿生殖嵴中分离得到原始生殖细胞（PGCs）,分别培养在小鼠胎儿成纤维细胞（MEF）、兔胎儿成纤维细胞（REF）饲养层上或与同源兔胎儿生殖脊成纤维细胞（HEFgr）、兔睾丸支持细胞（RSC）共培养。观察兔类EG集落的生长状态,并检测其碱性磷酸酶活性。结果表明：4种方法均能分离克隆出兔类EG集落,碱性磷酸酶染色均呈阳性,但是采用共培养的模式分离得到的集落明显多于传统的饲养层模式。与RSCs共培养得到的EG集落数最多,保持未分化的时间最长,并传了8代,与HEFgr共培养得到的EG集落数与RSCs相比差异不明显,但最高只传了6代。培养在MEF上的兔类EG也能较好的保持未分化状态,传了4代。培养在REF上的兔类EG集落数目较少,出现分化时间较早,只传了3代。因此可以用与RSCs或HEFgr共培养的方法传代培养兔PGCs。; 李义书王新庄冯勋伟王轶敏李金辉; 关键词：共培养胚胎干细胞

小鼠胚胎冷冻和重复冷冻的研究: 2008年; 研究了不同冷冻方法对小鼠胚胎的冷冻保护效果及能否进行重复冷冻、重复冷冻后胚胎的继续发育率情况。采用乙二醇(1.8 mol/L、2.7 mol/L、3.6 mol/L、4.5 mol/L)和EFS玻璃化液(EFS20、EFS30、EFS40)对小鼠的桑椹胚和囊胚进行程序化冷冻和细管法玻璃化冷冻并再进行重复冷冻。结果表明以1.8mol/L EG和EFS30对小鼠的胚胎冷冻效果最好,一次冷冻解冻后的发育率桑椹胚分别为92.5%和91.5%,囊胚分别为82.8%和81.3%,两种冷冻方法差异不显著(P>0.05)。经1.8 mol/L EG首次冷冻再经EFS30重复冷冻的效果最好,桑椹胚和囊胚的发育率分别为53.8%和33.9%。; 冯勋伟王新庄李义书王轶敏牛晖; 关键词：小鼠胚胎冷冻桑椹胚囊胚

IFN-γ在怀孕早期山羊下丘脑-垂体-性腺轴的表达被引量：8: 2006年; 为了探讨γ-干扰素(in terferon-,γIFN-γ)在下丘脑-垂体-性腺轴(hypotha lam ic-p itu itary-gonada lax is,HPG轴)中的免疫调节作用,应用免疫组织化学SP法对IFN-γ免疫反应阳性产物在怀孕早期山羊HPG轴的分布特点进行了研究。结果显示,IFN-γ分布于乳头体内侧核、视前内侧核、下丘脑前区、腹内侧核、连接核、室旁核、视上核等20个核团中,各部分核团细胞着色程度深浅不一;在视上核、室旁核分泌部、乳头体内侧核等有大量的阳性神经纤维;同时在室周核、视前外侧核、视前内侧核等13个核团中散布有一些阳性星形胶质细胞,与阳性神经细胞交错共存;腺垂体中腺细胞和神经垂体中神经纤维均有IFN-γ表达;卵泡和黄体中也有IFN-γ存在。表明IFN-γ与动物的神经内分泌活动关系密切,参与了免疫-神经-内分泌网络中的生殖免疫调节。; 赵慧英孙健红徐永平陈树林马夜肥李义书刘根胜龙敏; 关键词：Γ-干扰素怀孕早期奶山羊免疫组织化学SP法

兔类胚胎干细胞体外培养体系的优化与建立: 本研究以兔为材料，系统地研究了不同培养条件和传代方法对兔类ES、EG细胞分离培养的影响，为完善兔类ES、EG细胞建系的技术路线提供资料。实验主要结果如下： 1 试验比较不同饲养层和不同培养液对ES细胞分离培养的...; 李义书; 关键词：细胞体外饲养层细胞细胞分离培养细胞集落消化法体外分离培养; 文献传递

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李义书