李云琴
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 极化过程影响巨噬细胞的铁代谢被引量：3
- 2021年
- 本文旨在研究巨噬细胞极化过程对自身铁代谢调节的影响。用20 ng/mLγ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)刺激猪肺泡巨噬细胞(3D4/2细胞)24 h,诱导其为M1型巨噬细胞,另外用10 ng/mL白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)联合10 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)共同刺激3D4/2细胞24 h,诱导其为M2型巨噬细胞,用实时定量PCR、免疫荧光染色法和Western bolt检测巨噬细胞炎症因子和铁代谢相关蛋白的表达。收集M1/M2型巨噬细胞培养液上清液与猪肠上皮IPEC-J2细胞共培养,用CCK-8法检测IPEC-J2的增殖能力。给M1/M2型巨噬细胞外源添加柠檬酸铁铵(ammonium ferric citrate,FAC),用异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(fluorescein isothiocyanate-dextran,FITC-dextran)及流式细胞术检测3D4/2细胞吞噬能力。结果显示,和对照组相比,M1型巨噬细胞铁调素、铁蛋白重链、轻链和脂质运载蛋白-2 mRNA表达水平上调,胞内铁含量增加,显示出铁保留的表型,并且铁可增强M1型巨噬细胞的吞噬能力;M2型巨噬细胞上述基因mRNA表达水平无显著变化,而铁转运蛋白和转铁蛋白受体mRNA表达水平上调,胞内铁含量减少,显示出铁释放的表型,并且其培养液上清液能促进IPEC-J2细胞增殖。上述结果提示,M1型巨噬细胞倾向于将铁保留在细胞内,减少胞外铁含量,从而抑制胞外菌的增殖;而M2型巨噬细胞倾向于释放铁,有助于周围细胞的增殖,从而促进组织修复。
- 李云琴梁莉甘振顺汤学友杜华华
- 关键词：铁代谢细胞增殖
- 烟草曲茎病毒复制蛋白基因的原核表达和免疫定位被引量：2
- 2004年
- 利用PCR方法从烟草曲茎病毒 (TbCSV)Y35分离物的病株中获得复制蛋白 (Rep)基因 ,将其克隆到原核表达载体pGEX 4T 1上获得重组质粒pGEX Y35Rep。重组质粒导入大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中 ,IPTG诱导表达后发现部分Rep融合蛋白以可溶性形式表达。利用GST Sepharose 4B亲和层析柱纯化了Rep的融合蛋白 ,免疫家兔获得Rep蛋白的抗体。对TbCSV侵染烟草中Rep蛋白的亚细胞分布研究发现 ,Rep蛋白主要分布于含有细胞核的组份中。利用免疫胶体金技术对感病烟草中Rep蛋白进行了定位 。
- 崔晓峰李云琴李桂新周雪平
- 关键词：烟草曲茎病毒
- 烟草曲茎病毒 AC4基因的原核表达与免疫定位被引量：3
- 2004年
- 利用 PCR方法从烟草曲茎病毒 ( Tb CSV) Y3 5分离物的病株中获得 AC4基因 ,将其克隆到原核表达载体 p ET-3 0 a上获得重组质粒 p ET-Y3 5 AC4,重组质粒导入大肠杆菌 BL2 1 ( DE3 ) p Lys S中 ,IPTG诱导后 SDS-PAGE发现 ,AC4蛋白已在大肠杆菌中获得了表达。利用 Ni2 +-NTA亲和树脂纯化了 AC4重组蛋白 ,免疫家兔获得 AC4蛋白的多克隆抗体。利用免疫胶体金技术对感病烟草中AC4蛋白进行定位发现,TbCSV AC4蛋白主要在细胞质的叶绿体和线粒体中积累。
- 李云琴崔晓峰胡东维李桂新周雪平
- 关键词：烟草曲茎病毒原核表达
- 生命之源
- 2015年
- 仪器型号：Leica TCS SP5在63×1．4油镜下观察拍摄
幽蓝的细胞核包被在弥散的绿色荧光蛋白之中，绚丽的细胞骨架系着粘着斑蛋白，犹如漫漫苍穹孕育的的五彩星云（图片中蓝色的是DAPI染色的细胞核，绿色的是FITC标记的粘着斑蛋白，红色的是TRITC标记的细胞骨架）。
- 李云琴
- 关键词：绿色荧光蛋白DAPI染色细胞骨架LEICA镜下观察FITC
- 免疫胶体金标记定位昆诺藜中的胼胝质和胼胝质降解酶被引量：1
- 2014年
- 运用免疫胶体金技术研究了感染蚕豆萎蔫病毒2号以及健康昆诺藜细胞中胼胝质和胼胝质降解酶的分布情况。电镜观察发现胶体金特异性标记在含有VP37小管的胞间运动通道周围,其余区域感病和健康细胞的胼胝质及胼胝质降解酶分布差别不大,胼胝质主要分布于细胞间隙的大块电子致密物质以及细胞壁结构发生较大变化的区域,胼胝质降解酶主要分布于筛板、维管束细胞紧贴细胞壁区域的大块电子致密物质上,在细胞壁结构发生较大改变的区域也有胼胝质降解酶的分布。推测胼胝质在昆诺藜细胞中的积累和降解可能与细胞壁结构成分改变有关。
- 李云琴王华谢礼洪健
- 双生病毒及伴随卫星DNA编码蛋白的免疫定位
- 烟草曲茎病毒/(TbCSV/)和中国番茄黄化曲叶病毒/(TYLCCNV/)在我国云南地区的烟草和番茄上引起严重危害。本论文对TbCSV AC4和Rep蛋白及与TYLCCNV伴随的卫星DNA的βC1蛋白进行了分子细胞学研究...
- 李云琴
- 关键词：烟草曲茎病毒中国番茄黄化曲叶病毒DNAΒ
- 文献传递
