李心晖
- 作品数：9 被引量：65H指数：5
- 供职机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同地区铜绿假单胞菌第一类整合子和整合子相关基因盒的分布被引量：18
- 2006年
- 目的对石家庄、昆明两地分离的铜绿假单胞菌临床菌株进行第一类整合子的分布及整合子相关基因盒携带率的比较分析,探讨第一类整合子在两地菌株分布的差别。方法采用PCR方法筛选检测64株石家庄、昆明两地临床分离的铜绿假单胞菌第一类整合子和及其所携带的整合子相关基因盒。结果64株铜绿假单胞菌临床菌中共有43株为第一类整合子阳性菌(阳性率67.2%);其中石家庄菌株和昆明菌株阳性率分别为71.4%和64.3%,两地铜绿假单胞菌第一类整合子阳性率无显著性差异。第一类整合子阳性铜绿假单胞菌中,石家庄菌株和昆明菌株携带一类整合子相关基因盒的阳性率分别为80.0%和38.%,两地第一类整合子阳性菌中整合子相关基因盒的携带率具有显著性差异(P<0.01);两地菌株携带的基因盒大小不同。结论第一类整合子在铜绿假单胞菌临床菌株中广泛分布,环境的选择压力影响细菌整合子相关基因盒的分布。
- 杨维青石磊尹晓琳李心晖谢轶程曦曾蔚殷长甫贾文祥
- 关键词：铜绿假单胞菌
- 铜绿假单胞菌生物被膜形成能力与基因型的相关性分析
- 2006年
- 目的探讨铜绿假单胞菌(PA)临床分离株的粘附性、生物被膜形成能力及其与基因型的相关性。方法采用改良的微量平板法对临床分离的48株PA生物被膜的形成进行定量分析;通过肠杆菌基因间重复一致序列-PCR(ERIC-PCR)技术绘制48株PA的指纹图谱,应用计算机软件建立遗传相似性系数矩阵及聚类分析树状图。结果48株临床分离PA菌株生物被膜的形成能力不同。生物被膜形成能力不同的PA在基因型上表现出多态性,PA在17%遗传相似性系数上分为A、B、C、D、E五个基因型,生物被膜形成能力强的PA大都属于D型,其遗传相似性系数为42%。结论绝大多数临床分离的PA株具有较强的生物被膜形成能力;生物被膜形成能力不同的PA在基因型上表现出多态性;生物被膜形成能力较强的PA在基因型上表现出一定的相似性。
- 程曦杨维青石磊尹晓琳谢轶曾蔚李心晖苏建裕寇亚丽贾文祥
- 关键词：铜绿假单胞菌生物被膜基因型
- 临床分离铜绿假单胞菌中整合子的研究
- 目前，细菌的耐药性已经是世界关注的问题。医院感染的发生率及其病原菌的耐药率一直居高不下，对人类的健康造成了很大的威胁。铜绿假单胞菌作为主要的医院感染病原菌，具有复杂的耐药机制。近年，整合子一耐药基因盒系统成为研究人员关注...
- 李心晖
- 关键词：铜绿假单胞菌耐药基因盒整合子整合酶医院感染病原菌基因水平转移
- 文献传递
- 三类整合酶基因(intⅠ)的简并引物PCR方法建立及应用被引量：20
- 2005年
- 目的 建立一种筛选第一、二和三类整合酶基因 (intⅠ )的简并引物PCR方法 ,并对临床菌株进行整合子筛选和分类。方法 用梯度PCR方法确定PCR反应的最适退火温度 ,并对 1 6株临床标本进行PCR扩增 ,通过对阳性PCR扩增产物的限制性内切酶分析进行整合子分类。结果 根据梯度PCR结果确定最适退火温度为 4 6℃。应用简并引物PCR法检测 1 6株临床分离株 ,其中 8株阳性 ,经酶切分类后确定其中 4株只含有第一类整合酶基因 ,有 3株含有第二类整合酶基因 ,1株同时含有第一类和第二类整合酶基因。结论 建立了一种同时筛选第一、二和三类整合子的方法 ,实际检测显示其可行性 ,为全面细致研究整合子介导的细菌耐药提供了一种快速、简便的方法。
- 李心晖石磊杨维青曹以诚张宏梅尹晓琳郑美萍
- 关键词：PCR方法PCR法检测PCR反应临床菌株
- 临床分离绿脓假单胞菌第一类整合子结构及同源性研究
- 目前,由具有捕获及表达外来耐药基因盒能力的整合子系统介导的细菌耐药机制正越来越引起研究者们的关注[1],其对多重耐药性研究有着非常重要的意义[2],研究表明细菌整合子可以携带6种或者更多耐药基因盒[3,4],并同时对10...
- 李心晖石磊
- 关键词：绿脓假单胞菌细菌耐药
- 文献传递
- 细菌耐药整合子intI分类的多重PCR方法的建立及应用被引量：15
- 2005年
- 目的建立快速筛选细菌耐药整合子的分类方法,并对21株来自临床的菌株进行整合子筛选和分类。方法根据G enB ank/EM BL内的第一、第二和第三类的整合酶序列,通过软件C lustalW的多重比对分析设计出各类整合子的特异性引物,用对照菌株建立多重PCR方法并对21株临床菌株进行PCR扩增,通过其PCR扩增产物片段大小的不同进行整合子分类。结果对照菌株实验结果显示,21株临床分离菌株中,15株在565bp处有扩增片段,即为含有第一类整合酶基因;4株在403bp处有扩增片段,即含有第二类整合酶基因;1株在565bp和403bp处均有扩增片段,提示其同时含有第一、二类整合酶基因;1株没有得到任何扩增片段,即不含有这三类整合酶基因;在被测菌株中未发现第三类整合酶基因的阳性菌株。结论本文报道的筛选细菌耐药整合酶基因分类的多重PCR方法效果良好,具有可行性,为更加全面细致研究整合子类型以及整合子介导的细菌耐药机制提供了一种简单易行、快捷有效的方法。
- 冯洁石磊肖增璜李琳陈洵苏健裕李心晖郑美萍邱春嫦付强
- 关键词：多重PCR整合子整合酶基因
- 临床致病菌整合子检测及耐药基因盒序列分析被引量：9
- 2005年
- 目的对临床菌株中的第一类整合子分布及其耐药基因盒的结构特征进行分析。方法应用PCR方法检测33株临床菌株中的第一类整合酶基因intI,并对intI阳性菌株整合的耐药基因进行测序及序列分析。结果33株临床菌株(100%)均为第一类整合酶基因阳性。耐药基因盒特异PCR扩增发现,29株菌得到1913bp的扩增产物,2株得到1664bp的产物,1株得到1009bp的产物,1株得到1913bp和1009bp两种不同产物。序列分析结果表明,1913bp的扩增产物携带基因盒dhfr、orfF和aadA2,1664bp的扩增产物携带基因盒aadA5和dfr17,1009bp的扩增产物携带基因盒aadA2,aadA2和aadA5均为编码对氨基糖苷类抗生素产生耐药的基因盒,dhfr和dfr17均为编码对磺胺类药物甲氧苄氨嘧啶产生耐药的基因盒;orfF为未知功能的开放阅读框。结论第一类整合子介导的耐药基因广泛存在于临床致病细菌中,提示要加强对耐药基因在细菌种属间水平转移的监测工作。
- 石磊郑美萍肖增璜李琳邱春嫦付强苏健裕李心晖冯洁
- 关键词：整合酶基因序列分析
- 定量分析铜绿假单胞菌第一类整合酶基因的表达被引量：6
- 2006年
- 目的整合子是具有整合和表达外来耐药性基因盒能力的基因元件,在细菌耐药性基因的积累和传递中起重要作用。本研究通过定量分析第一类整合子整合酶基因(intI1)在细菌不同生存状态的表达水平,探讨整合子的作用机制。方法培养和提取两株第一类整合子阳性铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌、被膜脱落菌等三种生长状态的总RNA,采用竞争RTP-CR方法定量检测菌体在以上三种状态下intI1m RNA的表达水平。结果铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌和被膜脱落菌都有intI1m RNA表达;两株菌在三种状态下intI1m RNA的表达量不同,其中生物被膜菌表达最高,被膜脱落菌次之,液相培养菌最低;生物被膜菌intI1m RNA的量较液相培养物高约15倍,较被膜脱落菌高约4倍。结论铜绿假单胞菌intI1在生物被膜中m RNA表达上调,随着菌体从被膜脱落以及菌体持续的液相培养intI1表达下调。提示整合子在生物被膜菌中可进行活跃的基因盒的捕获、移动和积累,有利于细菌耐药性的提高及扩散。
- 杨维青石磊谢轶苏建裕李心晖寇亚丽程曦曾蔚贾文祥
- 关键词：铜绿假单胞菌生物被膜整合子整合酶
- 一株携带突变cmlA1基因绿脓假单胞菌流行株的检测被引量：1
- 2006年
- 石磊李心晖
- 关键词：绿脓假单胞菌流行株耐药基因盒突变
