目的探讨血必净(XBJ)是否能通过上调血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达,来减轻脓毒症小鼠的肺损伤(ALI)。方法本实验在哈尔滨医科大学附属第一医院肝脾外科中心实验室进行。采用改良盲肠结扎穿孔法(CLP)制作脓毒症小鼠模型。48只雄性C57BL/6小鼠,随机分为假手术组(Sham组,n=12)、模型组(CLP组,n=12)、血必净组(XBJ+CLP,n=12)和HO-1抑制剂组(XBJ+Zn PP+CLP组,n=12)。血必净进行干预时,造模前2h经尾静脉注射血必净(2ml/kg),HO-1特异抑制剂锌卟啉Zn PP(40μmol/kg)在给予血必净1h后经腹腔注射,其余各组给予等体积的生理盐水。术后12h后处死,光镜下观察肺组织的形态学改变,检测肺组织的湿干重比值(W/D),测定小鼠血清中的炎性介质(TNF-ɑ、IL-6),采用Western blot法以及免疫组化法检测肺组织HO-1的表达情况,Western blot法检测HO-1上游转录因子——核因子E2相关因子2(Nrf-2)的表达情况。用单因素方差分析(ANOVA)进行4组间比较,再进行Turkey检验,进行两组间多重比较差异有统计学意义(P<0.05)。结果与参照组(Sham组)相比,CLP组血清中TNF-ɑ、IL-6水平均明显增加(32.45±9.62 vs573.51±105.26,47.38±11.84 vs 853.72±198.56pg/ml,P<0.05),光镜下观察肺损伤及炎性细胞浸润程度明显加重(肺损伤评分:3.24±1.38 vs 12.32±3.45,P<0.05),肺组织W/D比值增加(4.52±0.34 vs 5.98±0.85,P<0.05),蛋白印迹法及免疫组化法检测结果显示肺组织中HO-1、Nrf-2的蛋白表达含量均轻度的增加(P<0.05)。给予血必净(XBJ)干预后,与CLP组相比,血清中TNF-ɑ、IL-6释放均减少(573.51±105.26 vs 327.45±68.52,853.72±198.56 vs 504.72±113.28pg/ml,P<0.05),肺组织病理损伤及炎性细胞浸润程度减轻(肺损伤评分:12.32±3.45 vs 6.34±1.68,P<0.05),肺组织W/D比值减少(5.98±0.85 vs 4.75±0.56,P<0.05),肺组织中HO-1、Nrf-2蛋白表达含量均明显增加(P<0.05)。XBJ对于肺组织的上述保护作用被HO-1抑制剂Zn PP所逆转,
目的探讨外源性一氧化碳释放分子2对脓毒症大鼠T淋巴细胞的影响。方法采用腹腔注射LPS方法制备脓毒症模型。采用数字表法将28只雄性SD大鼠随机分为阴性对照组(n=7)、LPS组(n=7)、外源性一氧化碳释放分子2(CORM-2)(10mg/L LPS^+10μmol/L CORM-2干预)、无活性外源性一氧化碳释放分子2(iCORM-2)组(10mg/L LPS^+10μmol/L iCORM-2干预)。给予相应试剂预处理24h后处死大鼠,收集血液、脾脏、肠系膜淋巴结等标本,进行模型验证,应用流式细胞仪观察和计数CD4与CD8标记阳性T细胞数,计算CD4/CD8阳性细胞比值(CD4^+/CD8^+),苏木精-伊红(HE)染色观察脾脏组织病理变化,观察T淋巴细胞含量计数,用Western blot法检测Fas、caspase-9、caspase-3的蛋白表达。结果观察大鼠小肠光镜下形态,与阴性对照组比较,大鼠脓毒症模型造模成功。流式细胞仪观察,与阴性对照组比较,LPS组24h后CD4^+T细胞百分比显著降低(41.05%±5.26%vs 53.06%±6.28%),CD8^+T细胞百分比显著降低(33.98%±7.47%vs 40.33%±7.23%),CD4^+/CD8^+比值显著降低(1.21±0.70 vs 1.31±0.87),差异有统计学意义(P<0.05)。与LPS组比较,LPS^+CORM-2组24h后CD4^+T细胞百分比显著增加(50.02±5.58 vs 41.05±5.26),CD8^+T细胞百分比显著增加(38.12±7.41 vs 33.98±7.47),CD4^+/CD8^+比值显著增加(1.31±0.75 vs 1.21±0.70),差异有统计学意义(P<0.05)。LPS^+iCORM-2组与LPS组上述各指标比较,差异无统计学意义。取脾脏病理学观察,与阴性对照组比较,LPS组T淋巴细胞含量计数在光镜下观察明显减少,与LPS组比较,LPS^+CORM-2组T淋巴细胞含量计数在光镜下观察明显增加。用Western blot法检测Fas、caspase-9、caspase-3的蛋白表达,与阴性对照组比较,LPS组处理24h后,Fas、caspase-9、caspase-3蛋白表达明显上调(P<0.05),在同时间点,与LPS组比较,经过LPS^+CORM-2处理24h后,Fas、caspase-9、caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05),LPS^+iCORM-2组与LPS组上述各指标比较,差�
