杨绍兴
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院附属医院更多>>
- 发文基金：首都医学发展科研基金国家重大科学仪器设备开发专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 稳定低表达CD147的人肺腺癌细胞系的建立及对细胞增殖的影响
- 2012年
- 目的构建CD147慢病毒干涉载体,建立稳定下调CD147表达的人肺腺癌A549细胞系,观察下调CD147表达后人肺腺癌细胞增殖能力的变化。方法将携带不同特异性干涉序列的3个DNA片段分别插入干涉质粒pSicoR中,构建pSicoR-siCD147慢病毒干涉载体(pSicoR-siCD147-1,pSicoR-siCD147-2,pSicoR-siCD147-3)。分别将构建好的载体转染入293FT细胞中,进行慢病毒包装。建立稳定下调CD147表达的细胞系。利用CCK-8法检测细胞增殖能力的变化。结果与结论构建了pSicoR-siCD147慢病毒干涉载体,RT-PCR和实时PCR结果显示pSicoR-siCD147-2的干涉效率最高。建立了稳定下调CD147表达的人肺腺癌A549细胞系(A549-siCD147)。CCK-8法检测发现A549-siCD147细胞的增殖能力显著性下降(P<0.05),下调CD147的表达可以使人肺腺癌细胞的增殖能力受到明显抑制。
- 杨绍兴汤传昊王思涵宋三泰刘晓晴
- 关键词：CD147慢病毒属RNA干涉细胞增殖
- CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 背景与目的 CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白,可促进肿瘤的浸润和转移。本研究拟构建CD147慢病毒表达载体,建立稳定过表达CD147的人肺腺癌A549细胞系,观察过表达CD147后对MMP-9及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 RT-PCR扩增CD147基因全长序列,将序列插入pEGFP载体,构建pEGFP-CD147慢病毒表达载体,随后转入293FT细胞中进行慢病毒包装,用获得的慢病毒毒液感染人肺腺癌细胞系A549,建立稳定过表达CD147的A549细胞系。Real-timePCR检测MMP-9的变化情况,CCK-8及Transwell法检测人肺腺癌细胞增殖、侵袭能力的变化。结果经限制性内切酶鉴定及测序分析,成功构建了pEGFP-CD147慢病毒表达载体质粒。Real-timePCR和Westernblot检测显示,与对照组相比,转染pEGFP-CD147慢病毒表达载体组的细胞,CD147的表达在mRNA和蛋白两个水平均增高,成功建立了A549-CD147细胞系。上调CD147的表达后,MMP-9的mRNA表达水平明显升高。同时,A549-CD147细胞增殖和侵袭能力明显增加(P<0.05)。结论成功构建CD147慢病毒表达载体和A549-CD147细胞系,过表达CD147可上调MMP-9的表达,增强人肺腺癌细胞的增殖和侵袭能力。
- 杨绍兴汤传昊王思涵宋三泰刘晓晴
- 关键词：CD147慢病毒载体转染
- CD147分子在肺腺癌A549细胞生物学行为中的功能和作用的研究
- 恶性肿瘤因其快速生长和进展的生物学特性,以及缺乏有效的早期诊断手段,病死率高、预后差,己成为严重威胁人类健康的重要疾病。肺癌是发病率和病死率均居第一位的肿瘤,其中非小细胞肺癌占80％,按其病理分型依次递减为腺癌、鳞癌、大...
- 杨绍兴
- 关键词：肺腺癌A549细胞CD147分子生物学病理特征
- 文献传递
- CD147分子及其与肿瘤关系的研究进展被引量：3
- 2012年
- 肿瘤的浸润、转移是一个多因素参与、多步骤的复杂过程,其中包括基底膜降解、基质渗透以及肿瘤细胞进出血管和对靶组织的侵袭。已证实CD147分子能刺激肿瘤细胞周围的成纤维细胞产生基质金属蛋白酶,促进肿瘤的浸润和转移,并在肿瘤的早期诊断、治疗及预后等方面具有重要的临床意义,其与肿瘤的关系是目前研究的热点。本文综述了CD147分子及其与肿瘤关系的研究进展。
- 杨绍兴汤传昊刘晓晴
- 关键词：CD147肿瘤生物学特性
- 应用MALDI-TOF-MS检测肺鳞癌患者血清多肽并分析其与化疗疗效相关性被引量：3
- 2017年
- 背景与目的晚期肺鳞癌(squamous cell carcinoma of lung,SCC)一线治疗以化疗为主,其标准铂二联方案化疗只能给患者带来有限的获益。并且不同的患者对于化疗药物的获益不同。所以实现化疗药物最优选择达到个体化预见性治疗尤为重要。本研究应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测初治晚期SCC患者接受紫杉醇类联合铂类化疗前血清多肽,并分析其与化疗疗效的相关性。方法初治晚期SCC患者接受紫杉醇类联合铂类方案化疗,每两周期进行疗效评价。评效为完全缓解(complete response,CR)或部分缓解(partial response,PR)患者定义为化疗敏感组,疾病进展(progressive disease,PD)患者定义为耐药组。留取SCC患者化疗前血清样本,81例患者按照3:1的比例随机分为训练组(敏感组I与耐药组I)和验证组(敏感组II与耐药组II),预处理训练组血清样本并进行MALDI-TOFMS检测,得到血清多肽指纹图谱。经Clin Pro Tools软件系统分析处理,得到敏感组I与耐药组I的差异多肽。应用软件内置的3种不同的生物学算法分别建立疗效预测模型,选取最优算法建立疗效预测模型。运用验证组进行盲样验证。结果训练组共纳入30例敏感组患者,31例耐药组患者;验证组共纳入敏感与耐药组患者各10例。训练组在敏感与耐药组有96个差异多肽,其中具有统计学意义的多肽有16个(P<0.001)。由5个多肽(1,897.75 Da,2,023.93 Da,3,683.36 Da,4,269.56 Da,5,341.29 Da)建立疗效预测模型。该模型对化疗敏感组患者的识别率为95.11%,交叉验证率为89.18%。经验证组进行盲样验证,其模型的准确率为85%,灵敏度为90.0%,特异性为80.0%。敏感组I中位无进展生存期(progress free survival,PFS)为7.2个月(95%CI:4.4-14.5);耐药组I中位PFS为1.8个月(95%CI:0.7-3.5)。结果发现:4,232.04 Da、4,269.56 Da的差异多肽与S
- 赵冠华许斌李晓燕汤传昊秦海峰王红杨绍兴王伟霞高红军何昆刘晓晴
- 关键词：肺肿瘤化疗蛋白质组学治疗疗效
