梁淑丽
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用免疫沉淀—质谱法筛选胃癌血管内皮细胞靶向性短肽CTKNSYLMC的结合受体
- ＜正＞目的筛选胃癌血管特异性短肽GEBP11（CTKNSYLMC）的结合受体。方法采用Westernblot、免疫细胞化学染色法对共培养人脐静脉内皮细胞（co-HUVECs）CD31和KDR的表达进行检测;化学合成生物素...
- 吕艳香梁树辉刘洋梁淑丽王飚落吴开春丁杰
- 文献传递
- 胃癌血管特异性短肽GEBP11结合受体的免疫沉淀法筛选
- 2010年
- 目的:筛选胃癌血管特异性短肽GEBP11(CTKNSYLMC)的结合受体。方法:采用Western-blot、免疫细胞化学染色法对共培养人脐静脉内皮细胞(co-HUVECs)CD31和KDR的表达进行检测;化学合成生物素标记的GEBP11,应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与GEBP11结合的蛋白质;采用Western-blot检测,确定并获取特异性蛋白条带;利用液相色谱-二级质谱(LC-MS/MS)及生物信息学分析,对条带蛋白进行测序和分析。结果:co-HUVECs表达CD31,KDR表达增加。通过免疫沉淀和Western-blot分析,发现一条与GEBP11特异结合的条带,其分子量约为12KD。经LC-MS/MS和生物信息学分析,获得候选蛋白ATP7B。结论:经鉴定co-HUVECs表达内皮细胞标志性分子且KDR表达上调;利用免疫沉淀-质谱法筛选获得了GEBP11受体的候选蛋白,为研究GEBP11的作用机制奠定了基础。
- 吕艳香梁树辉刘洋梁淑丽乔丽娟苗雨王飙落吴开春丁杰
- 关键词：免疫沉淀LC-MS/MS受体
- 慢病毒载体介导SV40LT致人脐静脉内皮细胞永生化被引量：3
- 2011年
- 为成功分离与鉴定人原代脐静脉内皮细胞,用猿猴病毒40大T抗原(SV40LT)异位表达建立永生化人脐静脉内皮细胞系。将含SV40LT cDNA片段的慢病毒载体,转染人原代脐静脉内皮细胞,连续传代培养。通过形态、细胞免疫组织化学、RT-PCR及管状成形试验进行原代及转染后细胞形态学和功能学鉴定及检测SV40大T抗原表达。结果SV40LT转染后的人脐静脉内皮细胞为扁平多角形或短梭状,呈单层铺路石状镶嵌排列。特异性表达Ⅷ因子、KDR、SV40LT表达,并具有管状成型能力。说明成功分离与鉴定永生化的脐静脉内皮细胞系,为后续血管靶向治疗奠定了基础。
- 梁淑丽薛增福吕艳香刘洋梁树辉殷继鹏窦维佳赵晓迪赵宏喜聂勇战吴开春
- 关键词：内皮血管永生化细胞
- 肿瘤血管靶向肽GX1的受体筛选被引量：1
- 2010年
- 目的:筛选肿瘤血管靶向肽GX1(CGNSNPKSC)的受体。方法:化学合成生物素标记的GX1,分离培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs),培养并收集共培养人脐静脉内皮细胞(co-HUVECs)全蛋白;应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与GX1结合的蛋白质;采用银染检测,确定并获取特异性蛋白条带;利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALD I-TOF-MS)及生物信息学分析,对条带蛋白进行测序和分析。结果:免疫沉淀和银染法获得与GX1特异性结合的蛋白条带,其分子量在10-15KDa之间。利用MALDI-TOF-MS及生物信息学分析获得了一个有意义的候选蛋白核苷二磷酸激酶A(NDPKA)。结论:利用免疫沉淀-质谱法筛选获得了GX1受体的候选蛋白,为研究GX1的作用机制奠定了基础。
- 刘洋吕艳香惠晓丽梁树辉梁淑丽吴开春
- 关键词：人脐静脉内皮细胞免疫沉淀MALDI-TOF-MS受体
