毕汝昌
- 作品数：64 被引量：133H指数：8
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重大航天工程更多>>
- 相关领域：生物学航空宇航科学技术理学医药卫生更多>>
- 三种金属硫蛋白聚合物静电效应的研究被引量：3
- 2000年
- 考察了三种金属硫蛋白(大鼠金属硫蛋白亚型Ⅱ,兔肝金属硫蛋白亚型Ⅰ和兔肝金属硫蛋白亚型Ⅱ)的单体、二聚体和三聚体在pH为5.6～8.5和10.6两种缓冲条件下的静电势分布.其中大鼠金属硫蛋白亚型Ⅱ的结构直接来自于晶体数据,兔肝金属硫蛋白亚型Ⅰ和Ⅱ的结构则通过同源蛋白模型搭建.三种金属硫蛋白的静电势通过有限差分方法求解Poisson-Boltzmann方程得到.对于三种金属硫蛋白的二聚体,pH为5.6～8.5时,单体和单体之间的静电势分布具有明显的互补性;但pH≥10.6时,这种互补性会大大削弱.对于三种金属硫蛋白的三聚体,单体和二聚体之间主要表现为静电排斥,而且pH在10.6下的静电排斥力明显强于pH为5.6～8.5时的静电排斥.
- 侯廷军李有勇徐筱杰安钰茹炳根毕汝昌
- 关键词：金属硫蛋白静电势
- 枯草杆菌蛋白酶突变体的纯化和晶体生长被引量：1
- 1996年
- 应用基因工程手段，获得了枯草杆菌蛋白酶Ｅ的双突变体基因（Ｍ２２２Ａ，Ｎ１１８Ｓ），此基因在枯草芽孢杆菌中表达得到了既抗氧又耐高温的碱性蛋白酶，含Ｍ２２２，Ｎ１１８Ｓ碱性蛋白酶基因的枯草杆菌发酵液经过硫酸铵分级沉淀和ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５阴离子交换层析柱，再在ＦＰＬＣ层析系统上用Ｈｉｌｏａｄ２６／１０ＳＳｅｐｈａｒｏｓｅＨＰ阳离子交换柱分离得到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳纯的蛋白酶样品。突变体酶的等电点为ｐＨ８．９，分子量为２７４００，用四肽底物测得的动力学参数也有较大的变化。对该突变体酶进行了晶体生长研究，获得了较大的单晶体。
- 林峥朱榴琴马建华毕汝昌
- 关键词：枯草杆菌枯草杆菌蛋白酶突变体晶体
- 蛋白质晶体生长用可调式汽相扩散法结晶室
- 本实用新型属于生物化学仪器设备,所提供的一种蛋白质晶体生长用可调式汽相扩散法结晶室,包括结晶室体和结晶室座。结晶室体上有一蛋白质池,蛋白质池的底面为圆柱面的一部分,结晶室座上有两个外液池,一中空的汽室板盖在结晶室座上使蛋...
- 王欣敏付世樒王大成仓怀兴毕汝昌江丕栋陈晨杨兆年孟涛
- 文献传递
- 应用动态光散射对一些蛋白质结晶性能的研究被引量：10
- 2000年
- 动态光散射是研究生物大分子溶液物化行为和结晶性能的重要工具。以溶菌酶为模型蛋白 ,对其溶液的DLS研究表明 ,一定范围的蛋白质浓度不会影响蛋白质聚合性质 ,而起沉淀剂作用的盐对多色散性的影响较大。考虑这些研究结果 ,应用DLS研究对空间微重力下晶体生长样品的质量做了考察 ,这对于提高空间样品准备水平 ,进而提高空间实验成功率是一重要途径。
- 吕鹤书舒占永龚海韵韩毅王耀萍毕汝昌
- 关键词：动态光散射溶菌酶蛋白质
- 枯草杆菌蛋白酶与蛋白质工程被引量：13
- 1991年
- 在以蛋白质三维结构及其与功能关系为基础的蛋白质工程的兴起中,枯草杆菌蛋白酶的定位诱变起了重要作用。以该酶为代表的蛋白质的工程研究,反映了这种生物技术所取得的进展和存在的主要问题。虽然,为了达到工程改造蛋白质的目标仍需要做大量基础性研究,但目前取得的成果足以说明蛋白质工程发展的光明前景。
- 毕汝昌储乃明
- 关键词：枯草杆菌蛋白酶蛋白质工程
- 不同重力条件下生长的溶菌酶晶体的结构被引量：1
- 1998年
- 利用我国返回式卫星和国内研制的蛋白质结晶装置 ,先后进行了 2次空间蛋白质晶体生长实验 ,均获得了质量较好的溶菌酶晶体 .为了探索微重力对溶菌酶晶体结构的影响 ,对
- 董君王耀萍韩青毕汝昌
- 关键词：微重力溶菌酶晶体结构晶体生长
- 固氮酶CrFe蛋白和MnFe蛋白的空间晶体生长(英文)被引量：2
- 2003年
- 从分别生长于含Mn和Cr培养基中的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种UW3分离纯化出MnFe和CrFe蛋白。为适应包括固氮酶在内的氧敏感蛋白的空间晶体生长的要求,应用简易而适用的厌氧加样装置代替固氮酶实验室所用的笨重厌氧箱(dry box),在地面进行厌氧加样。在充满氮气的简便有机玻璃箱内厌氧加样的所有样品中,分别用液/液扩散法和汽相扩散的坐滴法都可在一周内使MnFe和CrFe蛋白在宇宙飞船上从溶液中结晶出来。在所用的数种蛋白沉淀剂中,飞船上形成的所有晶体都为单晶,而地面上在多数沉淀剂中都生成大量孪晶。在相同沉淀剂中用液/液扩散法,飞船上生成CrFe蛋白的最大晶体比地面生成的最大晶体大1倍。而在相同沉淀剂中用汽相扩散的坐滴法,飞船上生成的MnFe蛋白最大晶体却没有地面生成的最大晶体大。这种差异也许是由不同结晶方法而不是不同蛋白所引起的。
- 赵颖赵剑峰吕玉兵黄巨富王耀萍仓怀兴毕汝昌
- 关键词：固氮酶棕色固氮菌
- 天花粉凝集素的晶体学研究被引量：3
- 1998年
- 天花粉凝集素是从中药天花粉瓜蒌块根中分离出的一种能专一结合糖类的新蛋白质。用悬滴汽相扩散法培养出了该蛋白质的晶体，最大线度尺寸达１．１ｍｍ。该晶体属正交晶系，空间群为Ｐ２１２１２１，晶胞参数ａ＝４４．７，ｂ＝６９．５，ｃ＝１８０．９，晶胞内每个不对称单位含１个天花粉凝集素分子。收集了３．０分辨率的衍射数据，并以具有某些相似性能的已知蛋白质结构为模型，做了分子置换研究。本文报导天花粉凝集素的晶体培养及Ｘ射线晶体学研究的初步结果。
- 王耀萍韩毅李平卫毕汝昌王克夷
- 关键词：天花粉凝集素
- 沉淀剂类型对蛋白质晶体分子堆积的影响被引量：13
- 2002年
- 以不对称单位只有一个分子的牛胰核糖核酸酶和T4溶菌酶晶体为材料,着重研究了无机盐、有机溶剂和PEG三类不同的沉淀剂对晶体分子堆积的影响。经研究发现两种蛋白质中用无机盐做沉淀剂的晶型几乎都含有面积较大的二次轴对称接触面和较少的相邻分子数,同时其含有的参与接触的非极性残基集中分布于二次轴对称接触面,而盐键则在二次轴对称接触面上分布稀少。用有机溶剂作沉淀剂的晶型却含有面积较小的非二次轴对称接触面和较多的相邻分子数,而参与接触的非极性残基和盐键在各个非二次轴对称接触面上随机分布。用PEG作沉淀剂的晶型其分子堆积特征总体上类似于用有机溶剂作沉淀剂的晶型,但个别晶型具有与用无机盐做沉淀剂的晶型相似的分子堆积特征。以上结果提示,用三类沉淀剂得到的不同的分子堆积特征可能与三类沉淀剂不同的诱导结晶机理密切相关。
- 代小虎毕汝昌
- 关键词：T4溶菌酶
- 空间蛋白质晶体生长用液面扩散法结晶室
- 本实用新型涉及一种空间蛋白质晶体生长用液面扩散法结晶室，包括有一结晶室体，在结晶室体的纵向开有一可容置旋塞的圆通孔，与圆通孔垂直、并与圆通孔相交开有若干个圆孔，圆通孔上侧边的圆孔为蛋白质溶液室，圆通孔下侧边的圆孔为沉淀剂...
- 傅世樒江丕栋王欣敏毕汝昌任清荣康惠珍袁宇临安红宇
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