汪淼
- 作品数：15 被引量：81H指数：7
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省“十一五”科技攻关项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学电气工程经济管理更多>>
- 表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的重组乳酸菌口服免疫小鼠特异性免疫应答分析被引量：8
- 2007年
- 将表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的重组乳酸乳球菌pNZ8112-Sa/NZ9000经口服免疫BALB/c小鼠,在免疫后的不同时间收集免疫鼠粪便样品,断尾采血收集血液样品并分离血清,用间接ELISA技术检测血清中的IgG抗体及血清和粪便中的IgA抗体的动态产生规律;在加强免疫后流式细胞仪检测分析外周血T细胞的变化情况及无菌收集免疫鼠的肠黏液,经中和试验检测其抗体的中和能力。结果表明重组菌株口服免疫小鼠后血清中的IgG和IgA抗体产生能力由于非特异性干扰不能确定,外周血中T细胞百分数在实验组和对照组间变化不显著;粪便中的IgA抗体水平产生效果明显;黏液的抗体具有一定的中和能力,其效价检测结果为1:36。
- 唐丽杰魏颖葛俊伟任晓峰汪淼徐义刚李一经
- 关键词：特异性免疫应答
- 猪流行性腹泻病毒S1蛋白在干酪乳杆菌中的分泌表达及免疫原性分析被引量：12
- 2009年
- 将猪流行性腹泻病毒(PEDV)纤突蛋白S1基因片段插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG-2中,构建了重组表达载体pPG-s1,将其电转化干酪乳杆菌L.casei393,获得了表达PEDV S1蛋白的重组乳酸菌杆菌。重组杆菌诱导后,经western blot、间接ELISA实验表明,目的蛋白获得了分泌表达。将该重组干酪乳杆菌经口服接种途径免疫BALB/c小鼠,免疫后于不同时间分别测定了粪便中特异性的sIgA和血清中IgG;用MTT法检测免疫小鼠细胞脾淋巴细胞增殖情况。结果表明该重组干酪乳杆菌表达系统能刺激动物黏膜免疫应答和系统免疫应答,在肠道可产生分泌型IgA抗体,并可检测到高水平血清IgG;不仅能诱导体液免疫反应,还可诱导细胞免疫应答。表明所构建的重组干酪乳杆菌表达系统作为口服疫苗具有潜在的应用价值,为探索新型猪流行性腹泻口服疫苗的研制奠定了基础。
- 葛俊伟姜艳平汪淼乔薪瑗徐义刚唐丽杰李一经
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S蛋白干酪乳杆菌
- 表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白重组乳酸乳球菌在模拟动物胃肠道内的稳定性检测
- 2007年
- 为确定本实验室研究构建的表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白重组乳酸乳球菌pNZ8112-Sa/NZ9000在模拟动物肠道内稳定性,对重组菌株的培养条件、蛋白表达和质粒携带以及在模拟胃肠道环境中的稳定性进行了检测。实验结果表明能够保持其蛋白表达的稳定性及重组质粒的稳定性;模拟胃肠道环境实验结果表明重组菌能够耐受胰蛋白酶溶液、0.1%的胆汁及在含有胃蛋白酶pH 1.5的盐酸存活1 h和在pH 2.5的盐酸耐受性良好。
- 唐丽杰魏颖葛俊伟任晓峰汪淼徐毅刚李一经
- A公司送变电工程项目投标风险管理研究
- 随着电网工程的不断推进,对电力基础设施建设的需求不断提升,送变电行业的竞争越来越激烈。在这种情况下,如何有效地管理和控制投标过程中的风险,提高公司的竞争力和项目中标率,变得越来越重要。尽管国内外已有很多关于项目风险管理的...
- 汪淼
- 关键词：送变电工程投标风险风险管理层次分析法
- 表面表达猪流行性腹泻病毒核蛋白蛋白的重组干酪乳杆菌诱导产生的免疫应答被引量：16
- 2009年
- 为探讨表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)核蛋白(N)基因的重组干酪乳杆菌口服免疫小鼠后诱导特异性免疫应答,本研究制备表达流行性腹泻病毒核蛋白的重组干酪乳杆菌,应用Western blotting、间接免疫荧光和全细胞ELISA鉴定目的蛋白的表达。然后用该重组干酪乳杆菌口服免疫BALB/c小鼠,分别测定了免疫后不同时间血清中特异性IgG、粪便中特异性的sIgA水平以及血清的中和活性;并测定免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞因子水平。结果显示,目的蛋白表达在细胞表面,可被阳性血清所识别。免疫小鼠后,可分别在血清中和粪便中检测到较高水平特异性IgG、sIgA(P<0.01),但血清并没有中和活性;淋巴细胞增殖试验和细胞因子测定结果显示,免疫组可产生明显的细胞免疫应答。结果表明,该重组干酪乳杆菌表达系统可诱导小鼠产生黏膜免疫应答和系统免疫应答,具有作为口服疫苗潜在的应用价值。
- 葛俊伟姜艳平汪淼乔薪瑗刘敏唐丽杰李一经
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N蛋白干酪乳杆菌免疫反应
- 表达猪流行性腹泻病毒中和抗原区重组乳酸乳球菌系统的构建
- 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)是冠状病毒家庭成员。猪流行性腹泻病毒感染猪的肠道上皮细胞而引起严重腹泻，尤其对于仔猪，感染后死亡率几乎为100％。该病是以发病猪...
- 汪淼
- 关键词：猪流行性腹泻病毒
- 文献传递
- 一例貉肉毒梭菌毒素中毒的诊治
- 2011年
- 肉毒梭菌毒素中毒是由梭状芽孢杆菌属肉毒梭菌污染肉类饲料产生的外毒素引起。目前，饲喂貉的饲料以肉类和蛋白质类饲料为主。在温、湿度比较高的夏、秋季节，饲料容易变质，饲喂后易导致貉发生肉毒梭菌中毒。笔者在临床诊疗实践中曾遇到一起典型的貉肉毒梭菌中毒病例，现将诊断过程叙述如下。
- 汪淼邸金海
- 关键词：肉毒梭菌毒素中毒诊治肉毒梭菌中毒芽孢杆菌属蛋白质类中毒病例
- 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在干酪乳杆菌中的分泌表达及其GM1结合活性分析
- 2010年
- 为获得表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的乳酸菌表达系统,并分析其免疫反应性和神经节苷脂受体(GM1)结合活性,本研究将编码LTB蛋白的eltb基因片段插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG-2中,构建重组质粒pPG-2-eltb,电转化于干酪乳杆菌393中。筛选获得重组干酪乳杆菌,应用western blot和间接ELISA方法鉴定LTB表达情况,并检测其与GM1结合活性。结果显示,目的蛋白以分泌形式表达,可被LTB阳性血清识别。GM1-ELISA试验结果证实表达的LTB可与牛GM1特异性结合。表明LTB蛋白在重组干酪乳杆菌获得了表达,并且具有免疫反应活性和佐剂活性,为以LTB为分子佐剂研制乳酸菌黏膜疫苗奠定基础。
- 葛俊伟姜艳平汪淼刘敏乔薪瑗唐丽杰李一经
- 关键词：干酪乳杆菌
- 表达猪流行性腹泻病毒中和抗原位点的重组干酪乳杆菌免疫小鼠诱导的免疫应答被引量：22
- 2010年
- 为研究猪流行性腹泻病毒中和抗原位点(COE)基因在乳酸菌中的表达情况,进而探讨重组乳酸菌的免疫原性。将COE基因插入干酪乳杆菌细胞表面表达载体pPG-1中,构建重组表达载体pPG-1-COE,并将其电转化入干酪乳杆菌Lactobacilluscasei393中,应用Western-blotting、间接免疫荧光染色和全细胞ELISA检测重组蛋白的表达情况,用重组干酪乳杆菌口服免疫小鼠,测定免疫应答水平。结果表明,COE可在构建的重组干酪乳杆菌表达系统中表达,目的蛋白定位于细胞表面。在免疫组小鼠血清、粪便中检测到较高水平的特异性IgG、sIgA(P<0.01);血清具有中和活性(1∶12);脾淋巴细胞增殖指数明显高于对照组,IL-4和IFN-γ水平显著提高(P<0.01)。证实,该重组干酪乳杆菌表达系统可诱导小鼠产生对猪流行性腹泻病毒特异的黏膜免疫应答和系统免疫应答。
- 葛俊伟姜艳平汪淼乔薪瑗刘敏唐丽杰李一经
- 关键词：猪流行性腹泻病毒干酪乳杆菌免疫反应
- 猪传染性胃肠炎病毒纤突S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统的构建被引量：2
- 2007年
- 根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR,获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的约2000 bp目的片段,将其分别与表达载体质粒pPG611.1和pPG612.1进行连接,通过电转化进入宿主菌Lacto-bacillus casei393细胞内,通过质粒提取、PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定分析,表明TGEV S基因已成功插入到表达载体质粒中,获得了TGEV S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统。
- 唐丽杰王荣军钟涛徐义刚汪淼欧笛李一经
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统
