沈辉
- 作品数:10 被引量:20H指数:3
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- 湖北省快生型大豆根瘤菌的血清型
- 1989年
- 根据交叉凝集试验结果将从湖北钟样、广济、监利、潜江等地分离的37株快生型大豆根瘤菌分成5个血清型,用荧光抗体技术检查这5个血清型之间的交叉现象结果表明它们是相互独立的。其中ZA血清型与USDA205有相同的抗原成分。所有的快生型大豆根瘤菌和慢生型大豆根瘤菌之间无相同的抗原成分。
- 石小岩沈辉曹燕玢
- 关键词:大豆根瘤菌快生型血清型
- 菜豆根瘤、类根瘤以及根颈瘤的细胞学观察
- 1993年
- 菜豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum bv.phaseoli)的共生质粒 pSym 3622转移到具有 C58染色体背景的农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中以后,杂交子可以通过伤口感染菜豆(Phaseolus vulgaris)根系,并在接种位点周围诱导类根瘤形成。类根瘤的结构与根瘤和菜豆根颈瘤的结构完全不同,其维管组织位于中央,周围为含有丰富淀粉粒的、高度液泡化的薄壁细胞,而且它的任何细胞以及胞间隙内均不含细菌。但是菜豆有效根瘤则含有大片含菌细胞区,不仅其细胞含有类菌体,而且在胞间隙中也存在细菌。由农杆菌 A208(pTiT37)所诱导的菜豆根颈瘤的任何细胞和胞间隙内也不含细菌。肿瘤的内部结构可以明显地分成许多不同的细胞层次,它们分别起源于不同的分生区;并且其内还可以分化出根伏突起,通过继续发育而形成新根系。此外肿瘤内许多区域的细胞都有明显解体的现象。
- 杨业华周俊初张忠明沈辉
- 关键词:菜豆根瘤菌根瘤
- 大豆基因工程根瘤菌田间结瘤和共生固氮效应被引量:2
- 1991年
- 利用三亲本接合转移方法,将快生型大豆根病菌B_(52)的基因文库克隆转移到受体菌慢生型大豆根瘤菌2210中,获得4株大豆基因工程根瘤菌(32.43、B—2—6、B—3—8)。田间接种试验表明:在大豆分枝期(V2),43和32结瘤效分别比不接种对照增加117.9%和100.4%;在初花期(R_1),32和B—2—6结瘤数分别比对照增加122.5%和91.6%,根瘤固氮酶活性增加233.3%和195.6%;在结荚始期(R3),B—2—6和32结瘤数比对照增加78.5%和70.1%,根瘤固氟酶活性43和B—2—6分别比对照增加53.4%和49.3%。产量统计表明:32、B—2—6和43比对照分别增产16.8%、14.3%和12.2%,亩增收大豆分别为28.2、24.1和20.6公斤。以上三个菌株均比受体菌株2210增产率高。
- 窦新田李晓鸣李新民周继松李树藩周俊初沈辉张忠明胡志浩彭文涛胡福荣陈华癸
- 关键词:大豆根瘤菌基因工程结瘤固氮
- Bradyrhizobium japonicum基因工程菌株HN32中外源片段的来源检验被引量:1
- 1993年
- 采用Southern转移,放射性同位素分子杂交等研究手段,对本课题组构建的一株高效固氮大豆根瘤菌HN32中的外源片段的来源进行了分析。研究结果证实:该外源片段确系来源于Sinorhizobium fredii B52菌株,并且在受体Bradyrhizobium japonicum 22—10菌株中本不存在。
- 沈辉张忠明莫才清周俊初
- 关键词:基因工程菌
- 高效固氮大豆根瘤菌中重组质粒pBj32H_2的物理图谱被引量:2
- 1992年
- 以在我国黑龙江地区广泛应用的慢生型大豆根瘤菌22—10为出发菌株,通过导入克隆有快生型大豆根瘤菌菌株B52的DNA片段的重组质粒pBj32H_2,构建了高效固氮大豆基因工程根瘤菌32.该菌株在黑龙江地区进行田间中试和大面积(15万亩)推广应用,获得比出发菌株22—10增产大豆7.4%和8.5%的效果。为了研究pBj32H_2中所克隆基因的结构和功能,本工作对pBj32H_2进行了限制性内切酶图谱分析,确定了pBj32H_2中外源DNA片段的大小及EcoRⅠ、BglⅡ、XhoⅠ的酶切位点,建立了该片段的物理图谱。
- 张忠明莫才清沈辉周俊初陈华癸
- 关键词:物理图谱质粒大豆根瘤菌大豆
- 26 株快生型大豆根瘤菌的生理和遗传学特性的研究
- 沈辉
- 关键词:快生型大豆根瘤菌生理特性血清型
- Bradyrhizobium japonicum工程菌株HN32中外源质粒pHN32增效作用的验证被引量:4
- 1992年
- 将Bradyrhizobium japonicum HN32菌株中的外源质粒pHN32,通过三亲本杂交转入大肠杆菌HB101中,继而转入Bradyrizobium japonicum22—10中,得到一系列抗性杂交子HNF1,HNF3及HNF5,检测其中所含质粒,并以22—10,HNF5及HN32进行盆栽试验,pHN32的增效作用得到了证实。
- 莫才清张忠明沈辉周俊初
- 关键词:大豆根瘤菌基因工程
- 快生型大豆根瘤菌基因库的构建被引量:2
- 1990年
- 本文报道了用柯斯质粒(cosmid)pLAFRI 作为载体,通过 EcoRI 部分酶切快生型大豆根瘤菌的全部 DNA,获得“目的”DNA 片段,用大肠杆菌 ED8767作为受体菌株,我们构建了一株快生型大豆根瘤菌——B52菌株的基因库。插入的基因片段大小为20~30kb,所获得的抗性菌落数为3.9×10~4,其中外源基因插入频率为70%,重组子数超过“理论”值,达到了希望的建库要求。
- 沈辉张忠明曹燕珍
- 关键词:大豆根瘤菌基因库
- 湖北地区快生型大豆根瘤菌的质粒及结瘤基因的初步定位被引量:3
- 1991年
- 从湖北省潜江县和监利县的4个采集点分离纯化了26株快生型大豆根瘤菌。质粒分离分析结果表明:所测快生型大豆根瘤菌中均有1—3条质粒带,分子量范围在50—300 Md之间。从26株快生型大豆根瘤菌中,选出分属两个血清型的5个菌株,依据根瘤菌nodABC基因在所有根瘤菌种中的结构同源性,对快生型大豆根瘤菌的结瘤基因(nod)进行了初步定位,其结果表明:R173、X143、B21、B2,D13菌株的质粒DNA中没有与nod ABC基因同源的片段存在,而R173、X143、B21、D13菌株的总DNA中含有部分nod ABC基因的EcoRl酶切片段分别为15.96kb、6.56 kb、3.70kb;B2菌株的总DNA中含有部分nod ABC基因的EcoRl酶切片段分别为51.94kb、11.6kb、6.56kb、3.
- 沈辉曹燕珍
- 关键词:大豆根瘤菌快生型质粒结瘤基因
- 高固氮基因工程大豆根瘤菌的研制及其增氮效应被引量:7
- 1996年
- 通过构建快生型大豆根瘤菌B52的基因文库和三亲本杂交,将增效因子DNA片段导入优良的慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得携带来自快生菌增效因子DNA片段的工程菌株HN32,经盆栽和小区试验,证明基因工程菌株HN32比出发菌株22-10平均增产6%,比对照平均增产13.2%~16.9%,相当于每公顷施75~150kg尿素.1992~1995年,在广西推广应用基因工程大豆根瘤菌HN322.16万hm2,每公顷平均增产19%,投入产出比1:30。增加经济效益1409.8万元。
- 刘涛周俊初柏学亮沈辉张学贤马庆生
- 关键词:基因文库基因工程大豆根瘤菌