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王东宝

作品数：10 被引量：19H指数：3
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家科技支撑计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇化学工程

主题

  • 5篇疫苗
  • 4篇病毒
  • 3篇免疫
  • 3篇甲型
  • 3篇甲型肝炎
  • 3篇减毒活疫苗
  • 3篇肝炎
  • 2篇蛋白
  • 2篇免疫效果
  • 2篇甲肝
  • 2篇甲型肝炎减毒...
  • 1篇滴度
  • 1篇毒性
  • 1篇多表位
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎疫苗
  • 1篇原核表达
  • 1篇增殖
  • 1篇增殖研究

机构

  • 10篇中国医学科学...
  • 1篇昆明医学院第...
  • 1篇江苏丞宇米特...

作者

  • 10篇王东宝
  • 4篇廖国阳
  • 4篇胡凝珠
  • 4篇李卫东
  • 3篇胡云章
  • 3篇柯华昕
  • 3篇段骞
  • 2篇瞿素
  • 2篇马磊
  • 2篇杨伟
  • 2篇杨卉娟
  • 2篇宋绍辉
  • 2篇陈洪波
  • 1篇杨净思
  • 1篇孙明波
  • 1篇李彦涵
  • 1篇肖红剑
  • 1篇兰芸
  • 1篇曹逸云
  • 1篇朱文勇

传媒

  • 4篇中国生物制品...
  • 2篇病毒学报
  • 1篇云南大学学报...
  • 1篇中国公共卫生
  • 1篇实验动物与比...
  • 1篇中国病原生物...

年份

  • 1篇2023
  • 1篇2022
  • 1篇2020
  • 1篇2018
  • 1篇2017
  • 1篇2014
  • 1篇2007
  • 1篇2006
  • 2篇2001
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
狂犬病毒aG株核蛋白和糖蛋白双表达质粒的构建及其在真核细胞中的表达被引量：1
2006年
目的构建狂犬病毒aG株核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)双表达重组质粒,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中表达核蛋白和糖蛋白。方法提取狂犬病毒RNA,应用RT-PCR方法扩增NP和GP基因,分别将其克隆到pIRES载体上,获得同时含有NP和GP基因的双顺反子重组质粒pING,并以脂质体介导法转染CHO-K1细胞,G418筛选,用ELISA和IFA检测NP和GP的表达。结果限制性内切酶分析表明重组质粒pING含有NP和GP基因片段,长度分别为1353bp和1575bp。应用ELISA和IFA方法,在转染细胞中均检测到NP和GP的表达。结论重组双表达质粒可在CHO细胞中同时表达NP和GP,为进一步开发重组狂犬病疫苗奠定了基础。
杨卉娟陈俊英孙明波张新文钱源段骞王东宝姜述德廖国阳李卫东
关键词：狂犬病毒糖蛋白核蛋白真核细胞
无针皮内免疫接种Sabin IPV疫苗的安全性及免疫原性研究被引量：3
2020年
全球消灭脊髓灰质炎野病毒后,必须全面使用脊髓灰质炎灭活疫苗(Inactivated poliovirus vaccine,IPV)才能维持无脊灰状态,然而IPV成本较高,难以满足全球需要。皮内免疫途径能够降低Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)(Inactivated poliovirus vaccine derived from Sabin strains,sIPV)的抗原量,本研究将评估无针皮内免疫sIPV的安全性及免疫原性。本研究采用中国医学科学院医学生物学研究所生产的sIPV进行1/5(0.1 ml)剂量无针皮内免疫接种Wistar大鼠,并设计全剂量肌肉免疫对照组以及无针皮内免疫阴性对照组,按0月、1月、2月基础免疫程序,于免疫前及每剂免疫后第30 d采血,检测血清中和抗体水平,评价免疫原性,并通过观察大鼠的皮肤刺激反应及豚鼠的全身过敏反应,评价安全性。Wistar大鼠3剂免疫后,1/5剂量皮内免疫组与全剂量肌肉免疫组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳转率均达到100%,各型别中和抗体几何平均滴度(Geometric mean titer,GMT)均远高于1∶8保护水平。大白鼠接种疫苗后体重增加,皮肤刺激试验及全身过敏反应试验结果表明无针皮内免疫sIPV具有良好的安全性。本研究结果表明sIPV疫苗无针皮内注射免疫安全、有效,并可降低sIPV的抗原量,可为全球消灭脊髓灰质炎提供可负担得起的疫苗。
朱文勇蔡玮王东宝杨伟孙溢胡文著宋绍辉李卫东廖国阳陈洪波马磊
关键词：安全性免疫原性
重组破伤风毒素重链片段C蛋白原核表达条件的优化
2023年
目的 优化重组破伤风毒素重链片段C (recombinant tetanus toxin heavy chain fragment C,rTTHc)蛋白的原核表达条件。方法 将密码子优化后的rTTHc基因片段分别插入原核表达载体pET30a、低温表达载体pColdⅡ和高温诱导表达载体pBV220中,构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以表达量及可溶性为检测指标,比较不同温度条件下rTTHC蛋白的表达情况。结果 42℃诱导4 h pBV220-rTTHc表达量较低,蛋白可溶性较差;37℃诱导4h pET30a-rTTHc表达量与15℃诱导8 h pCold-rTTHc表达量相当,但可溶性表达略低于pCold-rTTHc。28℃诱导4 h,pET30a-rTTHc可获得高表达量和高可溶性表达,且表达周期短。结论 pET30a-rTTHc在28℃经2mg/mL IPTG诱导可高效表达rTTHc蛋白。
官月婵马鑫宇肖红剑王东宝王学付李娇春谭银珍李智华寸韡
关键词：破伤风毒素原核表达温度
用加速热稳定试验筛选甲型肝炎减毒活疫苗热稳定保护剂被引量：2
2001年
为筛选具有良好热稳定保护效果的甲肝减毒活疫苗 (H2 株 )保护剂 ,利用正交设计和加速热稳定试验 ,将不同配比的保护剂和液体疫苗混合后 ,封入安瓿 ,分别置 37℃和 45℃ ,不同时间取样 ,检测其感染性滴度 .结果表明无保护剂的对照疫苗在 45℃条件下感染性滴度仅能维持 2d不变 ,第 3天开始下降 ,至 4d已下降1.2 7logCCID50 ·mL-1;而有保护剂的 5批疫苗在 45℃条件下感染性滴度能维持 5d无显著变化 .在 37℃条件下无保护剂的对照疫苗感染性滴度仅能维持 7d无显著变化 ,10d显著变化 ,下降 1.0～ 1.1logCCID50 ·mL-1,而有保护剂的 5批疫苗在 37℃条件下感染性滴度能维持 10d无显著变化 .研究表明 0 .1mol·L-1MgSO4 ,w =5 %乳糖 ,0 .0 1mol·L-1精氨酸 ,0 .0 1mol·L-1甘氨酸组成的保护剂具有最佳保护效果 ,其热稳定保护效果明显优于现在使用的对照疫苗 .
胡凝珠柯华昕瞿素陈洪波王东宝段骞胡云章
关键词：甲型肝炎减毒活疫苗保护剂感染性滴度
悬浮吸附方法生产H_2株甲肝减毒活疫苗的产量质量及免疫效果被引量：3
2001年
:目的　在生产规模条件下 ,对悬浮和单层吸附方法应用于H2 株甲肝减毒活疫苗生产进行了 5年产量质量及人体免疫效果的比较。方法　采用悬浮吸附方法和单层吸附方法并进行比较。结果　悬浮吸附方法HAV增殖高峰比单层吸附方法提前 4天 ,抗原滴度高一个稀释度 ,病毒繁殖全程细胞质量优于单层吸附方法 ,整个生产周期可缩短 9天。历年大规模对比生产和人体免疫效果观察结果表明 :悬浮吸附方法生产甲肝疫苗滴度略高于单层吸附方法 ,两者生产的疫苗在人体免疫效果方面无显著差异。结论　悬浮吸附方法更适宜H2 株甲肝减毒活疫苗工业化、规模化生产。
杨净思曹逸云王晓辉胡凝珠蒋国润柯华昕杨晓蕾王东宝董德祥
关键词：免疫效果
C3d分子多表位DNA疫苗体液免疫应答的增强作用被引量：3
2007年
目的研究C3d分子对多表位DNA疫苗体液免疫应答的增强作用。方法通过PCR方法合成多表位HME基因,分别插入真核表达载体pcDNA3.1和pcDNA3.1-3C3d,构建多表位DNA疫苗pcDNA3.1-HME和pcDNA3.1-HME-3C3d,经肌肉注射免疫小鼠,ELISA检测小鼠特异性抗体水平。结果经免疫的小鼠均能产生针对各表位的特异性IgG抗体,且pcDNA3.1-HME-3C3d免疫组小鼠的抗体水平明显高于pcDNA3.1-HME免疫组。结论C3d可增强多表位DNA疫苗的体液免疫应答水平。
程玉兴朱高红瞿素兰芸胡云章胡凝珠高承钢王东宝段骞
关键词：DNA疫苗多表位C3D体液免疫应答
树鼩经甲型肝炎减毒活疫苗、乙型肝炎疫苗及联合硫酸乙酰肝素佐剂免疫后的免疫效果评价被引量：2
2017年
目的探讨甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)、乙型肝炎疫苗(Hbv)以及HepA-1、Hbv分别与佐剂硫酸乙酰肝素(HS)联合对树鼩进行免疫后树鼩体液免疫应答的影响。方法按照疫苗种类、佐剂以及免疫途径将树鼩随机分组,同时设空白对照组,分别于末次免疫后的4周、8周、12周、16周和20周尾静脉采血,用ELISA法检测树鼩血清中的特异性IgG抗体水平。结果除空白对照组外,实验组均在末次免疫的第四周检测到抗甲型肝炎病毒(HAV)及抗乙型肝炎病毒(HBV)抗体,抗体水平随着免疫时间延长而逐渐升高并于12周达到峰值,此后逐渐下降。同时,联合HS佐剂组的体液免疫效果均优于单纯疫苗免疫组。并且不同抗原以及联合佐剂采用不同的免疫途径免疫树鼩其免疫效果存在显著性差异。结论通过对树鼩进行疫苗免疫原性和增强免疫效果检测,证实以树鼩作为动物模型进行疫苗评价的可行性。
王东宝胡云章胡凝珠罕园园匡德宣李彦涵
关键词：树鼩
一株引起病毒性脑炎的柯萨奇B3病毒的生物学特性分析被引量：2
2014年
目的通过分析分离自病毒性脑炎病人的一株柯萨奇病毒B3株KMA103-09生物学特性,研究其致病机理。方法将KMA103-09病毒分别按一定量接种至KMB17细胞、RD细胞、VERO细胞、Hep-2细胞、Hela细胞及MRC-5细胞进行培养,观察细胞的生长情况,并采用微滴法检测病毒在不同时间、不同细胞中的病毒感染滴度;将一定量KMA103-09病毒注射乳鼠和成鼠脑内,观察病毒的致病性,并检查鼠血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-r、TNF、IL-17A、IL-10含量。结果该病毒株在6种细胞上皆能适应生长,并产生明显的细胞病变效应。病毒在Hela细胞上生长繁殖最快,42h时细胞全部发生病变,感染性滴度达8.625lgCCID50/ml;在MRC-5细胞上病毒的感染性滴度最低,120h才全部发生病变,感染性滴度为5.50lgCCID50/ml。该病毒对一日龄乳鼠致死并在脑、肺和心脏等组织产生病理改变,实验乳鼠血清IL-6、IL-10、TNF含量分别为4.71pg/ml、21.08pg/ml和36.79pg/ml,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余4种皆无表达。该病毒对成鼠不致病,脑、肺、心脏病理检查无异常。结论 KMA103-09病毒在Hela细胞生长适应性良好,对乳鼠致病而对成鼠不致病。
李华杨卉娟王东宝柯华昕王玺沈冬王庆玲马绍辉
关键词：柯萨奇病毒B3生物学特性
流感病毒超滤工艺的优化被引量：2
2018年
目的分析截留相对分子质量不同的超滤膜浓缩对流感病毒纯化效果的影响,以获得杂质含量低的高浓度病毒液。方法将H1N1、H3N2、Bv和By 4个型别流感病毒分别接种9~11日龄鸡胚,经(34±1)℃培养72 h后,收获尿囊液,经连续流离心获得澄清的病毒液后,再进行截留相对分子质量1 000 000、300 000的超滤膜及其两种超滤膜组合的超滤浓缩,测定超滤前后的总蛋白含量、卵清蛋白含量和血凝滴度。结果截留相对分子质量1 000 000的超滤膜超滤后,杂质去除率高,均在80%以上,截留相对分子质量300 000的超滤膜超滤后杂质去除率相对低,但后者病毒回收率较高,二者组合既能降低杂蛋白含量,又可提高病毒回收率。结论流感病毒鸡胚尿囊液采用截留相对分子质量1 000 000+300 000超滤膜组合超滤浓缩,病毒纯化效果较好。
高菁霞宋绍辉王东宝杨伟欧阳圣洁代小虎马磊廖国阳李卫东
关键词：流感病毒鸡胚尿囊液超滤纯度
甲型肝炎病毒H2快速复制株在人二倍体细胞中的增殖研究被引量：1
2022年
研究甲型肝炎病毒H_(2)快速复制株在人二倍体细胞中的生长特性,并缩短甲肝病毒的培养周期。将甲型肝炎病毒H_(2)株感染人二倍体细胞(KMB_(17)细胞株),采用高病毒感染复数(MOI)将病毒培养时间从26d缩短至10d后收获病毒,并通过连续传代进行适应研究,建立H_(2)株快速复制毒种库,在不同培养时间检测病毒抗原、感染性滴度,绘制病毒生长曲线,进行传代稳定性验证和病毒形态学的观察。甲肝H_(2)株快速复制病毒株在KMB_(17)细胞上培养10d后收获,连续传代从第5代至第9代,抗原含量均在512~2048之间,感染性滴度均在8.33 lgCCID_(50)/mL±0.125lgCCID_(50)/mL,H_(2)株快速繁殖至5代病毒和9代病毒在电镜下观察到多为成熟的实心颗粒。在5批次的重复试验中,病毒培养至10d、16d、22d时,收获的病毒感染性滴度无显著差异(P>0.005)。筛选后的甲型肝炎病毒H_(2)株的快速复制株缩短了甲肝病毒的培养时间,且保持较好的稳定性和重复性,具有重要的应用价值。
王东宝马忠飞刘泽宋盛波卢志敏施红进何陆涛李燕李卫东廖国阳
关键词：甲肝病毒连续传代
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